生理活性種一酸化窒素のバイオイメージング法の開発と生体系への応用

生理活性物质一氧化氮生物成像方法的开发及其在生物系统中的应用

• 批准号: 10169215
• 负责人: 長野 哲雄
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10169215/
• 关键词: 一酸化窒素; バイオイメージング; 蛍光; プローブ; 内皮細胞; アクロファージ; 一酸化窒素合成酵素; NO

本研究は,生体物質をバイオイメージングとして捉える機能性蛍光プローブの開発を目的として行われたもので,具体的には1998年度のノーベル賞(医学生理学)の授賞対象となった生理活性種である一酸化窒素(NO)の蛍光プローブの開発を目指したものである.昨年度までにジアミノフルオレセイン骨格を有するNO蛍光プローブであるDAF-2,DAF-2 DAを開発し,その薬理学的評価を行ってきた.実際の培養細胞に応用する際にこれらの化合物はpHの影響を受け,微妙に蛍光強度が変化することが問題であった.また内皮細胞から生成する極微量のNOを確かな信頼度で可視化することは感度的に見て十分ではなかった.そこで今回,この点の改良を目的として分子設計と合成を行った結果,DAF-7M2の開発に成功した.本化合物は酸性領域までのpHにおいて蛍光強度は変化せず,感度的にもDAF-2の1.5倍であった.更に光に対しての安定性も増し,非常に使いやすいプローブとなった.現在細胞系への応用を検討している.“百聞は一見に如かず"と古来より言われる.生命科学研究においてもこの諺は的を得ており,上記のように,生体の組織あるいは培養細胞から酵素,受容体,セカンドメッセンジャーなどの機能性物質の作用発現を時々刻々の変化に対応して視覚的に捉えることができれば,生理機能解析の観点から非常に有意義であることは疑いない.他の生理活性種についても今後検討していく予定である.

The purpose of this study is to use biomaterials as a functional materialして行われたもので, specifically には 1998 のノーベル Prize (Medical Physiology) Award 対向となっPhysiologically active species of NO, の蛍光プローブの开発を目 Refers to したものである. Last year DAF-2,DAF-2 DAを开発し, その薬理学的価を行ってきた.実记のcultured cells に応用 する久 にこれらのCompounds はpH のaffected by け, subtleに蛍Light intensity change することがProblem であった.またEndothelial cells からGeneration するExtremely trace amount のNOをConfirmation かなConfidence 頼 Degree でVisualization することは Sensitivityに见て十ではなかった.そこで This time, このPointの ImprovementをPurposeとしてMolecular DesignとSynthesisを行った Results, DAF-7M2の开発にThis compound has been successfully used in the acidic field and the pH value has been improved. The light intensity has been changed, and the sensitivity of DAF-2 has been 1.5 times higher. The light intensity has been improved. It's very stable and stable, it's very stable .Currently, the cell lines are used in を検検している. "Everything is heard once, and once you see it, it is like かず" "と古来より言われる. Life science research においてもこの言は的を得ており,上记のように,生のorganismあるいはcultured cells からzyme element, receptor, function of a functional substance発appear を时々 moment 々の変化 に対応して看覚的に取えることができれば, the analysis of physiological functions is very meaningful, and the physiologically active species will be determined in the future.

项目成果

Naoki Nakatsubo: "Detection of Nitric Oxide From Bovine Aortic Endothelial Cells with New Fluorescence Indicators : Diaminofluoresceins" FEBS Letters. 427. 263-266 (1998)

Nakatsubo 直树：“用新荧光指示剂：二氨基荧光素检测牛主动脉内皮细胞中的一氧化氮”FEBS 快报。

M.Kakoki: "Effects of Hypertension,Diabetes Mellitus and Hypercholeiterolemia on Eudothelin Type B Receptor-mediated Nitric Oxide Release from Rat Kidney" Circulation. (in press).

M.Kakoki：“高血压、糖尿病和高胆固醇血症对 Eudothelin B 型受体介导的大鼠肾脏一氧化氮释放的影响”循环。

Naoki Nakatsubo: "Improvement of Nitric Oxide Detection Method Using 2,3-Diaminonaphthalene and Its Application to Evaluation of Novel Nitric Oxide Synthase Inhibitors" Biol.Pharm.Bull.21. 1247-1250 (1998)

Nakatsubo 直树：“使用 2,3-二氨基萘改进一氧化氮检测方法及其在新型一氧化氮合酶抑制剂评价中的应用”Biol.Pharm.Bull.21。