生きた状態での生理活性種の画像化

对生活条件下的生物活性物种进行成像

• 批准号: 10877387
• 负责人: 長野 哲雄
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10877387/
• 关键词: 一酸化窒素; 一重項酸素; 亜鉛; バイオイメージング; 蛍光; プローブ; 虚血; 内皮細胞; マクロファージ; 一酸化窒素合成酵素; NO

生命現象を時々刻々変化する生理活性ペプチド、一酸化窒素(NO)等の機能性物質あるいは酵素などの活性との相関で解析することは真の生理作用を知る上から、現在最も求められていることである。本研究では"生きた状態"での生理活性種の機能解析を目的に生体の画像化(バイオイメージング)を目指しているが、その為の生体機能探索分子(蛍光プローブ)となる新規化合物を創製してきた。その結果、昨年度までにNOに対する蛍光プローブDAFおよび一重項酸素に対する蛍光プローブDPAXの開発に成功した。今年度はこの成果をうけ、更に以下の二項目について意義ある成果を得ることができた。1.新規および改良型生細胞プローブの開発(1)亜鉛蛍光プローブACF類の開発に成功:亜鉛イオンは生体においては鉄イオンに次いで多量に存在する金属イオンで、近年神経細胞に亜鉛ベシクルが存在するなど、生理機能が注目されている。今年度、亜鉛に対する生細胞蛍光プローブの創製に成功した。(2)pHおよび光に対する安定性、更には高感度化などの改良を加えた実用的新規NO蛍光プローブの開発に成功した。2.培養細胞系および生体組織への応用(1)改良型NO蛍光プローブを用いて、血管内皮培養細胞からNMDA刺激に対応して、生成するNOを画像として捉えることに成功した。(2)大脳切片組織を用いて虚血モデルを作製し、その際生成したNOを画像化した。これにより大脳虚血状態におけるNOの動態を解析することが可能になった。以上の結果は、実用上価値ある成果であり、本科研費のプロジェクトが成功したことを示している。

々 life phenomenon when を 々 the time - the す る physiological activity ペ プ チ ド, a acidification smothering factor (NO), etc. の functional material あ る い は enzyme な ど の active と の phase masato で parsing す る こ と は is の on physiological function を know る か ら, now the most も め ら れ て い る こ と で あ る. This study で は "raw き た state" で の physiological activity of analytical を の function purpose に の portraits the raw body (バ イ オ イ メ ー ジ ン グ) を refers し て い る が, そ の body function for the の students explore molecular (蛍 light プ ロ ー ブ) と な る を created new rules compounds し て き た. そ の results, yesterday's annual ま で に NO に す seaborne る 蛍 light プ ロ ー ブ DAF お よ び 1 heavy acid element に す seaborne る 蛍 light プ ロ ー ブ DPAX の open 発 に successful し た. Our は "こ の results を う け, more に の below 2 projects に つ い て meaning あ を る achievements have る こ と が で き た. 1. The new rules お よ び improved living cells プ ロ ー ブ の open 発 (1) lead 亜 蛍 light プ ロ ー ブ ACF class の open 発 に success: 亜 lead イ オ ン は raw body に お い て は iron objects イ オ ン に times い で す more quantity に る metal イ オ ン で, in recent years, god 経 cell に 亜 lead ベ シ ク ル が exist す る な ど, physiology が attention さ れ て い る. This year, 亜 lead に successfully created に <s:1> light プロ ブ ブ ブ plumbents against する living cells. (2) the pH お よ び light に す seaborne る stability, more に は Gao Gan degree melts な ど の improved を plus え た be with the new rules of NO 蛍 light プ ロ ー ブ の open 発 に successful し た. 2. Culture cell lines お よ び living body tissue へ の 応 with NO (1) the improved type 蛍 light プ ロ ー ブ を with い て, endothelial culture cell か ら NMDA stimulus に 応 seaborne し て, generate す る NO を portrait と し て catch え る こ と に success し た. (2) large 脳 biopsy tissue を with い て virtual blood モ デ ル を as し, そ の interstate generated し た NO を portrait turn し た. <s:1> れによ 脳 large 脳 deficient blood state におけるNO <s:1> dynamic を analysis する とが とが possible になった. 価 は の results above, be used numerical あ る results で あ り, this KeYanFei の プ ロ ジ ェ ク ト が successful し た こ と を shown し て い る.

项目成果

小島宏建: "実験医学"羊土社(分担執筆). 946-950 (1999)

小岛宏健：“实验医学”Yodosha（合著者）946-950（1999）。

Noriyuki Suzuki: "Novel Iron Porphyrin-alkanethiolate Complex with Intramolecular NH...S Hydrogen Bond : Synthesis, Spectroscopy and Reactivity"J. Am. Chem. Soc.. 121. 11571-11572 (1999)

Noriyuki Suzuki：“具有分子内 NH...S 氢键的新型铁卟啉-链烷硫醇络合物：合成、光谱学和反应性”J。

Takanari Inoue: "Synthesis and Evaluation of 1-position-modified Inositol 1,4,5-Trisphosphate Analogs"Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. 9. 1697-1702 (1999)

Takanari Inoue：“1位修饰肌醇1,4,5-三磷酸类似物的合成与评价”Bioorganic

Tetsuo Nagano: "Practical Methods for Detection of Nitric Oxide"Luminescence. 14. 283-290 (1999)

Tetsuo Nagano：“检测一氧化氮的实用方法”发光。

Naoki Nakatsubo: "Detection of Oxide From Bovine Aortic Endothelial cells with New Fluorescence Indicators:Diaminofluoresceins" FEBS Letters. 427. 263-266 (1998)

Nakatsubo 直树：“用新荧光指示剂：二氨基荧光素检测牛主动脉内皮细胞中的氧化物”FEBS 快报。