课题基金 / 基金详情

イネ・スクロース輸送担体のカエル卵母細胞を用いた機能的発現

イネ・スクロース輸送担体のカエル卵母細胞を用いた機能的発現
利用青蛙卵母细胞表达水稻蔗糖转运蛋白
批准号：
09274202
负责人：
鈴木 徹
金额：
$0.58万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1997 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09274202/
关键词：
イネスクロース輸送担体発現ベクター試験管内RNA合成カエル卵母細胞微量注入基質特異性

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项目成果

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光合成反応によって固定・生産された炭水化物はスクロースに変換された後、他の器官へ転流される。この際、スクロースは分子量約5万5千の膜タンパクであるスクロース・トランスポーターを介して輸送される。動物においてはグルコースが生体内で植物におけるスクロースの役割を果たしており、細胞膜表面に存在するグルコース輸送担体がスクロース輸送担体と同様の機能を有している。グルコース輸送担体の遺伝子はジーンファミリーを形成し、互いに構造的に類似しているが器官特異的な発現を示す7種類のcDNAが同定されている。スクロース輸送担体についても組織特異的な複数の遺伝子の存在が想定されている。それぞれのcDNAに由来するスクロース輸送担体のV-maxやKm値を特定し、機能より詳細な解析を進めるためには、酵母の発現系では不十分で、動物のグルコース輸送担体の解析において用いられたカエルの卵母細胞の発現系を確立することが重要である。予備実験としてヒトのレニンのcDNAを発現ベクターに組み込み、試験管内でRNAを合成し、カエルの卵巣より摘出したステージVの卵にRNAを微量注入した。その卵から得た膜画分のタンパクをSDSポリアクリルアミドゲルによって電気泳動したところ、予想されるレニンのタンパクに相当する所に顕著なバンドが見出された。さらに、抗レニン抗体を用いて免疫沈降反応を行ったところ、新たに出現したバンドのみが検出された。このことは、微量注入したRNAがカエルの卵母細胞において発現することを示し、この実験系が確立したことを示している。さらに、イネのスクロース由来のcDNAを発現ベクターへ組み込み、RNAの微量注入を試みたが、現在のところ機能的発現には至っていない。
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シングルセル解析を用いた常染色体優性多発性嚢胞腎の新規病態解明
  • 批准号：
    23K15252
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
  • 资助金额：
    $3.0万
  • 财政年份：
    2023
  • 负责人：
    鈴木 徹
  • 依托单位：
    Yokohama City University
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  • 批准号：
    23K02604
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 资助金额：
    $1.83万
  • 财政年份：
    2023
  • 负责人：
    鈴木 徹
  • 依托单位：
    Akita University
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  • 批准号：
    22K20890
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
  • 资助金额：
    $1.83万
  • 财政年份：
    2022
  • 负责人：
    鈴木 徹
  • 依托单位：
    Yokohama City University
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  • 批准号：
    20K14044
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
  • 资助金额：
    $1.33万
  • 财政年份：
    2020
  • 负责人：
    鈴木 徹
  • 依托单位：
    Akita University