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アルタナティブスプライシングを調整する遺伝子の新規 クローニング法の開発

アルタナティブスプライシングを調整する遺伝子の新規 クローニング法の開発
开发调节可变剪接基因的新型克隆方法
批准号：
10876018
负责人：
鈴木 徹
金额：
$0.32万
依托单位：
Gifu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1998
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1998 至 1999
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10876018/
关键词：
アルタナティブスプライシングFGFR2GFP遺伝子クローニングミニジーン前立腺ガン前立腺がん

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项目成果

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アルタナティブスプライシングよって、エキソンのスイッチングが起ることを、容易に検出することが出来る系を構築した。線維芽細胞増殖因子(FGF)ファミリーのリセプターの一つであるFGFR2は、細胞外に、免疫グロブリン様のループ構造を2つないし3つ有する。このうち最後のループに対応するエキソンが2つ存在し、IIIb,IIIcと呼ばれる。これらのエキソンは、細胞の分化あるいはがん化の過程でスイッチングされる。すなわち、上皮系の細胞においては、IIIbタイプのスプライシングが起き、その他の細胞では、IIIcエキソンが選択される。この制御に関わる遺伝子は、これまでに発見されていない。今回の研究では、このIIIb IIIcを含む領域をプラスミド上にクローン化したミニジーンの下流にGFPをクローン化した。また、IIIb、IIIcそれぞれに、ストップコドンを導入した変異体を構築した。これを、動物細胞に導入し、スプライシングが起きるか否かを、GFPの蛍光の発光で検出することを確認した。これらの、ミニジーンを有するプラスミドを、FGFR2IIIbを発現している比較的良性の前立腺癌細胞DT-3、および、悪性かした前立腺癌細胞AT-3に導入し、抗生物質ジェネティシンで選択することにより、パーマネントトランスフェクタントを得た。IIIbに変異を有するミニジーンは、DT-3では、蛍光を発せず、AT-3で蛍光をを発した。また、IIIcに変異を有するミニジーンは、AT-3では、蛍光を発せず、DT-3で蛍光をを発した。これらのレポーター細胞を用いることに、スプライシングの調整因子のクローニングが可能になると考えられた。
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シングルセル解析を用いた常染色体優性多発性嚢胞腎の新規病態解明
  • 批准号：
    23K15252
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
  • 资助金额：
    $3.0万
  • 财政年份：
    2023
  • 负责人：
    鈴木 徹
  • 依托单位：
    Yokohama City University
場面緘黙児の認知・思考プロセスの特性が社会生活に及ぼす影響に関する研究
  • 批准号：
    23K02604
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 资助金额：
    $1.83万
  • 财政年份：
    2023
  • 负责人：
    鈴木 徹
  • 依托单位：
    Akita University
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  • 批准号：
    22K20890
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
  • 资助金额：
    $1.83万
  • 财政年份：
    2022
  • 负责人：
    鈴木 徹
  • 依托单位：
    Yokohama City University
ASD児における自他理解の枠組みを用いた社会的相互作用の解明
  • 批准号：
    20K14044
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
  • 资助金额：
    $1.33万
  • 财政年份：
    2020
  • 负责人：
    鈴木 徹
  • 依托单位：
    Akita University
国内基金
海外基金
肝内源性FGF10/FGFR2信号调控胆汁淤积性肝损伤的作用机制探究
  • 批准号：
    MS25H310002
  • 项目类别：
    省市级项目
  • 资助金额：
    --
  • 批准年份：
    2025
  • 负责人：
    李三铁
  • 依托单位：
    温州医科大学
FGF2通过FGFR2/PI3K通路调控SGK1介导的线粒体稳态改善肾缺血/再灌注损伤的机制研究
  • 批准号：
  • 项目类别：
    省市级项目
  • 资助金额：
    --
  • 批准年份：
    2025
  • 负责人：
    郑晓梦
  • 依托单位：
SOX9 调控 FGFR2 环路导致前列腺癌疾病进展的机制研究
  • 批准号：
    24ZR1411900
  • 项目类别：
    省市级项目
  • 资助金额：
    --
  • 批准年份：
    2024
  • 负责人：
    卞晓洁
  • 依托单位：
    复旦大学附属肿瘤 医院
CAFs中GPBAR1促进肝外胆管癌FGFR2磷酸化和培米替尼耐药的分子机制
  • 批准号：
    82303324
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    30万元
  • 批准年份：
    2023
  • 负责人：
    刘增利
  • 依托单位：
    山东大学