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遺伝子発現を指標にした卵質評価方法の開発

以基因表达为指标的鸡蛋品质评价方法的建立

基本信息

批准号：
19658072
负责人：
鈴木徹
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年度、FITC標識したビテロゲニン(Vg)を用い、Vgの卵母細胞への取り込みを蛍光でモニターする技術を開発した。さらに培養条件下でFITC-Vgが取り込まれれば、卵母細胞を培養条件下で発生し、ビタミンA等の栄養素が卵成熟に及ぼす影響を培養条件下で解析できるのではと着想した。FITC-Vgを加えた培地でゼブラフィッシュの卵母細胞を培養したが、残念ながらFITC-Vgは濾胞細胞の表面で留まって卵母細胞には取り込まれず、想定した培養系は実現しなかった。環境水中の汚染物質が胚に及ぼす影響を調べることを目的として、ダイオキシンに代わる標準毒性化合物であるジクロロアニリン(DCA)に胚を曝露して、シトクロムP450系酵素(cyp1aとアリル炭化水素受容体ahrの発現を解析した。その結果、孵化前の胚ではDCAによってcyp1aの発現が体表の表皮細胞で強力に誘導され、ahrの発現は変動しないことが分かった。cyp1aの発現により、環境汚染物質の胚への影響をモニターできる可能性が考えられた。メダカ胚を用いた実験で、過剰なレチノイン酸(RA)は脊椎骨融合を起こし、RA欠乏は脊椎骨の低形成を起こすことが分かったので、RAの脊椎骨発生における役割を解析することを目的として、RA合成酵素raldh2、RA分解酵素qyp26a1、RA受容体rara1、RA応答遺伝子shhの発現をトラフグ仔魚で解析した。raldh2は脊椎骨に隣接する脊髄と腹大動脈で発現し、rara1は脊椎骨を形成する骨芽細胞で発現し、shhは権間靱帯および脊索鞘を挟んで位置する脊索細胞で発現することが分かった。これらの結果から、背骨の発生に必要なRAは脊髄と腹題動脈から供給され、主に椎体を形成する骨芽細胞と椎間板部分で利用されているものと考えられた。

In the past year, FITC identification technology has been developed for oocyte retrieval. Under culture conditions, FITC-Vg can be obtained from oocytes, and oocytes can develop under culture conditions, and nutrients such as vitamin A can be analyzed under culture conditions. FITC-Vg was added to the culture medium to culture oocytes. The oocytes were cultured on the surface of FITC-Vg filter cells. The aim of this study is to analyze the development of a standard toxic compound, namely, DCA, which is an enzyme (cyp1a) and a hydrocarbon receptor ahr. The development of DCA and cyp1a in embryos before hatching is strongly induced in epidermal cells on the body surface, and the development of ahr is strongly induced. The occurrence of cyp1a and the impact of environmental pollutants on the embryo are considered. RA synthase raldh2, RA catabolizing enzyme qyp26a1, RA receptor rara 1, RA receptor shh development, RA synthesis enzyme rdh2, RA catabolizing enzyme qyp26a1, RA synthesis enzyme rara 1, RA synthesis enzyme shh development, RA synthesis enzyme rdh2, RA synthesis enzyme rara 1, RA synthesis enzyme rdh2, RA synthesis enzyme rara1, RA synthesis enzyme rdh2, RA synthesis enzyme Raldh2 is found in the spinal cord and abdominal aorta adjacent to the spine, rara1 is found in bone bud cells that form the spine, and shh is found in notochord cells located between the spinal cord and the notochord sheath. As a result, the development of dorsal bone is necessary for the development of spinal cord, abdominal artery and vertebral body.