軸策損傷神経細胞の生存・軸策再生の分子メカニズムの解明

阐明轴突损伤神经元存活和轴突再生的分子机制

• 批准号: 09280219
• 负责人: 木山 博資
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Asahikawa Medical College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09280219/
• 关键词: 神経損傷; 神経細胞死; 神経再生; 舌下神経; ディファレンシャルディスプレイ法; 抹梢神経; 神経変性

本年度の研究は以下の3点について行った。(1)神経生存・再生因子の探索我々の研究室で既に確立された、ディファレンシャルディスプレイ法により新たな神経再生因子の探索を継続した。その結果得られた候補遺伝子のうち、膜7回貫通型受容体構造を有する新規遺伝子についてcDNA全長をクローニングするとともに、機能解析のために培養細胞での発現実験を行っている。さらにポリクローナル抗体の作成にも成功し、各臓器ごとの発現をウエスタンブロットにて検索した。その結果本蛋白は脳と精巣に豊富な蛋白であり、グリコシレーションがあることが明らかになった。現在脳内での局在を免疫組織化学法にて検討している。(2)神経損傷舌下神経核cDNAライブラリーの作成ラット約1000匹の片側舌下神経を切断し、一定期間後に神経核を取りだし損傷神経特異的なcDNAライブラリーの作成を行った。現在ライブラリーが完成し、それからランダムにいくつかのクローンをクローニングし、in situハイブリダイゼイションにより損傷神経で実際に発現が促進している遺伝子が得られるかどうかを検討した。その結果、本ライブラリを用いてランダムにクローニングするだけで、約25%のクローンが神経損傷後に発現が亢進していることが明らかになった。現在本方法によって得られたクローンのうちいくつかの既知の遺伝子について神経生存・再生における機能に関して解析中である。(3)遺伝子導入系の開発アデノウイルスを用いた遺伝子導入系が完成した。成熟動物の神経系には容易に導入できるが幼若動物の損傷神経系には導入が比較的難しいことが明らかになった。この点の改善が当面の研究課題である。

This year, the <s:1> research focuses on the following <s:1> three points: に, に, て, て, て and った. (1) god 経 survival, regeneration factor の explore I 々 の laboratory で に already established さ れ た, デ ィ フ ァ レ ン シ ャ ル デ ィ ス プ レ イ method に よ り new た な god 経 regeneration factor の explore を 継 続 し た. そ の results have ら れ た alternate heritage 伝 son の う ち, membrane type 7 back through the capacity structure を have す る new rules but 伝 son に つ い て length cDNA を ク ロ ー ニ ン グ す る と と も に, functional analytic の た め に culture cell で の 発 now be 験 を line っ て い る. Youdaoplaceholder0, ロ, さらにポリ, ナ, ナ, <s:1> antibody <e:1> was successfully produced に, <s:1>, and ごと of various organs were found to have をウエスタ, ブロットにて検, ブロットにて検, and た. そ の results this protein は 脳 と fine 巣 に aboundant な protein で あ り, グ リ コ シ レ ー シ ョ ン が あ る こ と が Ming ら か に な っ た. At present, the で bureau in 脳 is in the を immunohistochemistry method にて検 to discuss る て る る る. (2) god 経 damage tongue rather 経 nuclear cDNA ラ イ ブ ラ リ ー の made ラ ッ ト about 1000 horse の piece side tongue rather 経 を cut し, after a certain period に god 経 nuclear を り だ し damage god 経 specific な cDNA ラ イ ブ ラ リ ー の made を line っ た. Now ラ イ ブ ラ リ ー が し, そ れ か ら ラ ン ダ ム に い く つ か の ク ロ ー ン を ク ロ ー ニ ン グ し, the in situ ハ イ ブ リ ダ イ ゼ イ シ ョ ン に よ り damage god 経 で be interstate に 発 が now promote し て い る heritage 伝 sons が may ら れ る か ど う か を beg し 検 た. そ の results, the ラ イ ブ ラ リ を with い て ラ ン ダ ム に ク ロ ー ニ ン グ す る だ け で, about 25% の ク ロ ー ン が 経 injury after god に 発 now が hyperthyroidism し て い る こ と が Ming ら か に な っ た. Now this method に よ っ て have ら れ た ク ロ ー ン の う ち い く つ か の is の but 伝 of children に つ い て god 経 survival, regeneration に お け る function に masato し て in parsing で あ る. (3) The 伝 sub-import system is developed by アデノウ アデノウ スを スを スを and the が た sub-import system is が to complete the た. Mature animal の god 経 department に は に easily import で き る が if animals の damage god 経) department に は import が comparisons difficult し い こ と が Ming ら か に な っ た. <s:1> point <e:1> to improve が the current research topic である.

项目成果

Su QN: "Differential display revealedtranscriptional uprequlation of the motor molecules for both anterograde and retrograde axonal transport during nerve regeneration." J.Neurosci. 9. 1542-1547 (1997)

Su QN：“差异显示揭示了神经再生过程中顺行和逆行轴突运输的运动分子转录上调。”

Yao GL: "Enhancement in expression of cytokine receptor and its intracellular signaling molecules after peripheral nerve injury." Eur.J.Neurosci.9. 1047-1054 (1997)

姚国利：“周围神经损伤后细胞因子受体及其细胞内信号分子表达增强。”

Oshige-Hayashi Y: "Expression of Glycine max(soybeanagglutinin:SBA)binding molecule in injured motoneurons and its specific localization in the extracellular matrix between injured neurons and microglia." Neurosci.Res.27. 271-275 (1997)

Oshige-Hayashi Y：“受损运动神经元中大豆凝集素：SBA 结合分子的表达及其在受损神经元和小胶质细胞之间细胞外基质中的特异性定位。”