新たなプロテアーゼDINEによる神経細胞変性の防御メカニズムの解明

阐明新型蛋白酶 DINE 对抗神经元变性的保护机制

• 批准号: 13210007
• 负责人: 木山 博資
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: Osaka City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13210007/
• 关键词: メタロプロテアーゼ; 神経細胞死; SOD; LIF; LIF受容体; DINE

運動神経が損傷を受けた後、生存・再生する過程で発現する遺伝子群をスクリーニングした結果、我々は多くの興味深い遺伝子を得た。中でもDamage Induced Neuronal Endopeptidase(DINE)と名付けた分子は新たなメタロプロテアーゼであり、中枢神経系のさまざまな障害に応答し、損傷を受けた神経細胞で発現が誘導される。また、培養細胞に発現させると、Mn-SOD,やCu/Zn-SODなどの発現を促進させ、スパーオキサイドによる細胞死の防御に働くことが明らかになった。メタロプロテアーゼであるDINEは、その基質や機能に未だ不明の点が多い。本年度は、DINEの転写制御機構について特に研究の展開がみられた。DINE遺伝子の5'上流領域の解析を進めた結果、5'上流約3kbのなかには、神経細胞特異的発現にかかる領域が存在した。また、この領域を用いてLacZを発現するトランスジェニック動物を作成したところ、神経傷害に応答してLacZの発現が認められた。このことから、この領域には神経傷害特異的発現にかかるプロモーター領域も含まれることが明らかとなった。DINEプロモーターの下流にルシフェラーゼを結合したコンストラクトを用いて、後根神経節細胞やPC12細胞を用いてプロモーター活性を検討した。各種神経栄養因子による発現制御を検討した結果、LIFによる誘導が著しいことが明らかになった。また、gp130の中和抗体やSTAT3のドミナントネガティブ発現によりプロモーター活性を抑制できることから、LIF/LIFR/STAT3を介するシグナルがDINEの発現に重要であると考えられる。また、ラットの軸索損傷モデルにおいて、坐骨神経にLIFを投与することでDINEの発現が後根神経節で誘導されたことから、in vivoでもLIFはDINEの誘導因子であると考えられる。

Sports god 経 を が injury by け た, survival after regeneration す る process で 発 now す る heritage 伝 subgroup を ス ク リ ー ニ ン グ し た results, I 々 は more く の tumblers deep い 伝 を must た son. In で も Damage Induced Neuronal Endopeptidase (DINE) と pay け た molecular は new た な メ タ ロ プ ロ テ ア ー ゼ で あ り, central god 経 の さ ま ざ ま な handicap of に 応 answer し, Damage を け た god 経 cells で 発 now が Induced さ れ る. ま た, culture cell に 発 now さ せ る と, Mn - SOD, や Cu/zinc - SOD な ど の 発 を now promote さ せ, ス パ ー オ キ サ イ ド に よ る cell death の defense に 働 く こ と が Ming ら か に な っ た. Youdaoplaceholder0 メタロプロテア ゼであるDINE だ, そ <s:1> the function of the や matrix is に not だ unknown, there are many が points. This year, <s:1>, DINE 転 転 wrote that the control institution に, に て て て conducted a special に research がみられた and がみられた. DINE posthumous son 伝 の 5 'upstream areas の parsing を into め た results, 5' upstream about 3 KB の な か に は, god 経 cell specific 発 now に か か が る field exist し た. を ま た, こ の field with い て LacZ を 発 now す る ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク animal を made し た と こ ろ, god 経 injury に 応 answer し て LacZ の 発 が now recognize め ら れ た. こ の こ と か ら, こ の field に は gods 経 damage specific 発 に か か る プ ロ モ ー タ も ー field containing ま れ る こ と が Ming ら か と な っ た. DINE プ ロ モ ー タ ー の obscene に ル シ フ ェ ラ ー ゼ を combining し た コ ン ス ト ラ ク ト を with い て, god 経 root ganglion cells after や PC12 cells を using い て プ ロ モ ー タ ー active を beg し 検 た. Various god 経 tech students.their ownship raise factor に よ る 発 now suppression を beg し 検 た results, LIF に よ る induced が the し い こ と が Ming ら か に な っ た. ま た, gp130 の neutralizing antibody や STAT3 の ド ミ ナ ン ト ネ ガ テ ィ ブ 発 now に よ り プ ロ モ ー タ ー inhibition で を き る こ と か ら, LIF/LIFR/STAT3 を interface す る シ グ ナ ル が DINE の 発 に now important で あ る と exam え ら れ る. ま た, ラ ッ ト の axonal injury モ デ ル に お い て, sciatic god 経 に LIF を cast with す る こ と で DINE の 発 が now after induced root section god 経 で さ れ た こ と か ら, the in vivo で も LIF は DINE の factor で あ る と exam え ら れ る.

项目成果

Sasaki M: "A Disintegrin and Metalloprotease with Thrombospondin type1 motifs (ADAMTS-1) and IL-1 Receptor Type 1 mRNAs are simultaneously induced in nerve injured motor neurons"Mol Brain Res. 89. 158-163 (2001)

Sasaki M：“在神经损伤的运动神经元中同时诱导具有 1 型血小板反应蛋白基序 (ADAMTS-1) 和 IL-1 受体 1 型 mRNA 的解整合素和金属蛋白酶”Mol Brain Res。

Abe K: "Inhibition of Ras-Extracellular signal-regulated Kinase (ERK) mediated signaling promotes ciliary neurotrophic factor (CNTF) expression in schwann cells"J. Neurochem. 77(2). 700-703 (2001)

Abe K：“抑制 Ras 细胞外信号调节激酶 (ERK) 介导的信号传导可促进雪旺细胞中睫状神经营养因子 (CNTF) 的表达”J.

Shirotani K: "Neprilysin degrades both amyloid b peptides 1-40 and 1-42 most rapidly and efficiently among thiorphan-and phosphoramidon-sensitive endopeptidases"J.Biol Chem. 276. 21895-21901 (2001)

Shirotani K：“在噻吩和磷酰胺敏感的内肽酶中，中性溶酶最快速、最有效地降解淀粉样蛋白 b 肽 1-40 和 1-42”J.Biol Chem。