肺癌における分子標的治療の感受性試験および効果判定方法についての研究

肺癌分子靶向治疗敏感性试验及疗效评价方法研究

• 批准号: 14571280
• 负责人: 平栗 俊介
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: Tokyo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14571280/
• 关键词: 肺癌; 癌遺伝子; 癌抑制遺伝子; CGH Microarray; N-RAS; CDK6; FHIT; FGFR2

「肺癌における分子標的のCGH (Comparative Genomic Hybridization) Microarray法による解析」【材料と方法】・DNAチップは、約300種類の各種癌遺伝子、癌抑制遺伝子、マーカーのP-1およびBAC-DNAクローンをスライドガラス上に固定したArray300(米国Vysis社)を用いた。・肺癌培養細胞は、理化学研究所から供給された小細胞肺癌:Lu130,Lu134A, Lu135,Lu139,Lu140,Lu165,T3M12,腺癌:RERF LCKJ,PC14扁平上皮癌:SQ5,RERF CL-A1,大細胞癌:IA5、合計12株を用いた。・CGH Microarray : Random Priming法で、各培養細胞から抽出したゲノムDNAをグリーン、対照DNA(正常ヒトリンパ球DNA)をレッドで蛍光標識し、Array300に競合的にハイブリダイズ(37度72時間)し、洗浄、DAPI染色後、分析機器GenoSensorを用いて、各クローンの蛍光色比からDNAコピー数変異を測定した。【結果】1.高頻度にDNAコピー数が増幅していた分子:(1)C84C11/T3(5p telomere):(頻度83.3%)(2)N-RAS(1p13.2)(3)DAB2(5p13)(4)CDK6(7q21-22)(5)HIRA=TUPLE1(22q11.21):(75%)(6)ARSA(22q telomere)(7)D5S2064(5p15.2)(8)H18962(9q telomere)(9)STK6/STK15(20q13.2-13.3):(66.7%)2.高頻度にDNAコピー数が減少・欠失していた分子:(1)FHIT(3q14.2)(2)D10S249/D10S533(10p15):(75%)(3)BIN1(2q14)(4)TBR1(2q23-37)(5)p44S10(3q14.1)(6)ESR1(6q25.1)(7)D8S596(8p telomere)(8)SHGC-44253(10p telomere)、(9)EGR2(10p21.3)(10)FGFR2(10p26)(11)DCC(18q21.3)(12)18QTELL11(18q telomere):(66.7%)【まとめ】下線の遺伝子クローンの変異は、今まで肺癌での報告はなく、新しい知見であった。遺伝子コピー数の減少・欠失していたクローンについては、発現レベルでの解析を計画している。

Lung cancer における molecular target <s:1> CGH (Comparative Genomic Hybridization) Microarray method に よ る parsing "· DNA material と method 】 【 チ ッ プ は, about 300 kinds の various carcinoma survived 伝, inhibition of heritage 伝, マ ー カ ー の P - 1 お よ び BAC - DNA ク ロ ー ン を ス ラ イ ド ガ ラ ス に し fixed on た Array300 Vysis club (the us) を い た. · Lung cancer culture cells ら, RIchemistry institute ら supply された small cell lung cancer :Lu130,Lu134A Lu135, Lu139 Lu140, Lu165 T3M12, adenocarcinoma: RERF LCKJ, PC14 squamous cell carcinoma: SQ5 and RERF CL - A1, large cell carcinoma: IA5, total 12 strains を い た. · CGH Microarray: Random で Priming method, various cultured cells か ら spare し た ゲ ノ ム DNA を グ リ ー ン, polices according to DNA (normal ヒ ト リ ン パ ball DNA) を レ ッ ド で 蛍 identification し, light Array300 に concurrence of に ハ イ ブ リ ダ イ ズ (37 degrees 72 time) し, incorporated, after DAPI staining and analysis machine GenoSensor を use Youdaoplaceholder0 て, color ratio of each ロ ロ <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> 蛍 蛍 蛍 蛍 蛍 <s:1> 蛍 蛍 を measurement of DNAコピ <s:1> number variation を, <s:1> た. 【 Result 】1. High-frequency にDNAコピ が number が increased <s:1> て た た molecules :(1)C84C11/T3(5p Telomere) (frequency) 83.3% (2) N - RAS (1 p13. 2) (3) DAB2 (5 p13) (4) CDK6 (7 q21-22) (5) HIRA = TUPLE1 (22 q11. 21) : (75%), (6) ARSA (22 q (7)D5S2064(5p15.2)(8)H18962(9q telomere)(9)STK6/STK15(20q13.2-13.3):(66.7%)2. High frequency に DNA コ ピ ー が to reduce loss, owe し て い た molecules: (1) the FHIT (3 q14 during April 12-15. 2) and (2) D10S249 / D10S533 p15 (10) : (75%), (3) the BIN1 q14 during April 12-15 (2) and (4) TBR1 (2 q23-37) (5) p44S10 (3 q14 during April 12-15. 1), (6) E SR1(6q25.1)(7)D8S596(8p telomere)(8)SHGC-44253(10p (9)EGR2(10p21.3)(10)FGFR2(10p26)(11)DCC(18q21.3)(12)18QTELL11(18q Telomere) : (66.7%) [ま と め 】 logoff の posthumous son 伝 ク ロ ー ン の - different は, today ま で lung cancer で の report は な く, new し い knowledge で あ っ た. Posthumous son 伝 コ ピ ー number の reduce loss, owe し て い た ク ロ ー ン に つ い て は, 発 now レ ベ ル で の parsing を plan し て い る.