運動失調症ミュ-タントによる障害機構の分子生物学的研究

共济失调突变体损伤机制的分子生物学研究

基本信息

批准号：
01623505
负责人：
御子柴克彦
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

遺伝性運動失調症のモデルとしてミエリン形成不全症マウス(myelin deficient,mld)を選び、分子遺伝学的解析を進めた。mldではMBP遺伝子が重複しており、上流の遺伝子の一部が逆転している。本年度はMBP発現低下の原因、ならびにmld座の形成機構について検討した。その結果、以下のことが明らかとなった。1.MBP発現低下の原因1)mldでは上流のMBP遺伝子の逆転した部分が転写されることによりアンチセンスRNAが生成されること。2)アンチセンスRNAは主に核内に存在し、センスRNAと相補鎖を形成すること。3)上流の遺伝子から下流の遺伝子の転写開始部位に到達する転写産物はごく微量であること。以上のことから、下流の遺伝子の発現抑制のメカニズムとしてはアンチセンスRNAがセンスRNAのプロセッシングまたは細胞質への移行を妨げることが考えられた。2.mld遺伝子座の形成機構1)mld遺伝子座の約110kb、正常マウスMBP遺伝子を含む約85kbの領域がコスミドを用いてクロ-ニングされた。2)mld遺伝子座内には3個のjunction pointが存在し、上流の遺伝子と下流の遺伝子との間には1.4kbの由来不明の繰り返し配列が挿入されていること。3)正常遺伝子における各junction pointの相当部位の間で明らかな相同性は見られないこと。以上のことから、mld遺伝子座は重複、逆位、未知のスペ-サ-配列の挿入を伴う多重組換えの結果生じたものと考えられた。

髓磷脂缺乏，将MLD小鼠选择作为遗传性共济失调的模型，并进行了分子遗传分析。在MLD中，MBP基因重叠，一些上游基因逆转。今年，我们研究了MBP表达降低的原因和MLD基因座形成的机理。结果，以下明确：1。MBP表达降低的原因1）在MLD中，通过转录上游MBP基因的反向部分来产生反义RNA。 2）反义RNA主要存在于细胞核中，并形成带有义RNA的互补链。 3）必须有很少的转录本从下游基因到达上游基因的转录起始位点。从以上，人们认为反义RNA抑制了感官RNA的处理或转移到细胞质的转移，作为抑制下游基因表达的机制。 2。MLD基因座形成的机理1）使用cosmids克隆了约110 kb的MLD基因座和约85 kb的区域。 2）在MLD基因座中必须有三个结点，并且在上游基因和下游基因之间插入了1.4kb的重复序列。 3）正常基因中每个结点的相应位点之间没有明显的同源性。从上面可以看出，MLD基因座是涉及重复，反转和插入未知间隔序列的多个重组的结果。