ミトコンドリアのチトクロムPー450の細胞内局在化機構

线粒体细胞色素P-450的亚细胞定位机制

基本信息

批准号：
02217211
负责人：
伊藤明夫
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

シトクロムPー450およびPー450を含む代謝系の一員であるアドレノドキシンやシトクロムb_5の細胞内局在化過程を解析した。1.ミトコンドリアのシトクロムPー450前駆体のプロセシングに関与するプロテア-ゼ;細胞質で生合成された後、ミトコンドリアに移入されたシトクロムPー450(scc)やアドレノドキシン前駆体の延長ペプチドを切断除去し、それぞれを成熟型にするプロテア-ゼをラットおよびウシ肝臓より精製した。アドレノドキシン前駆体を用いたリガンドブロッティングにより,酵素の2つのサブユニット(55kD、52kD)のうち、52kDサブユニットが基質の認識に与っていることがわかった。さらに、延長ペプチド部に様々の長さの欠失を持ったアドレノドキシン前駆体に対するプロテア-ゼの作用や、アドレノドキシン前駆体のプロセシング体する延長ペプチドの様々な部分に対応する合成ペプチドの影響を調べることから、アドレノドキシン前駆体の延長ペプチドの切断には、切断点から約40個以上のアミノ酸の長さがあって、ー30からー40番目に塩基性アミノ酸に富んでいることが必要であることがわかった。2.小胞体でシトクロムPー450を中心とする電子伝達系に関与しているシトクロムb_5の小胞体局在化胞体に局在化せず、シトゾルに留まった。一方、この10残基を他の蛋白質のカルボキシン末端に結合すると、融合蛋白質は小胞体に局在化し、この10残基の中にシトクロムb_5の小胞体局在化シグナルが存在することがわかった。

分析了包括细胞代谢系统的成员，包括细胞色素P-450和P-450的肾上腺素毒素和细胞色素B_5的亚细胞定位过程。 1。与线粒体细胞色素P-450前体的加工有关的蛋白酶；在细胞质中的生物合成后，将转移到线粒体的细胞色素P-450（SCC）和肾上腺素毒素前体的延伸肽被切割和去除，并从大鼠和牛乳房中净化成熟的细胞形式的蛋白酶。使用肾上腺素毒素前体的配体印迹显示，在酶的两个亚基（55KD，52KD）中，52KD亚基有助于底物识别。此外，通过检查蛋白酶对延长肽部分中各种长度的含量的脂肪毒素前体的影响，以及与肾上腺素前体延伸肽处理的各个部分相对应的合成肽的作用，发现更多的肾上腺素前体的延伸症状是延伸型的延伸症状的，即延伸的延伸症状蛋白质氧化型蛋白质氧化型蛋白质的延伸。裂解点，并在-30至-40高的基本氨基酸中富含碱性氨基酸。 2.细胞色素B_5参与内质网中以细胞色素P-450为中心的电子传输系统，并未定位于内质网局部内质网，但仍留在细胞质中。另一方面，当这10个残基附着在另一种蛋白的羧克蛋白末端时，融合蛋白定位于内质网中，发现内质网定位信号是细胞色素b_5的信号，存在于这10个残基中。