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ミトコンドリアのチトクロムP-450の細胞内局在化機構

线粒体细胞色素P-450的亚细胞定位机制

基本信息

批准号：
63635503
负责人：
伊藤明夫
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

副腎皮質細胞においてステロイドホルモンの生合成に関与しているチトクロムp-450(SCC)およびチトクロムp-450(11β)のミトコンドリアの局在化機構に関して、次の3つの方向から検討した。1.チトクロムp-450(SCC)前駆体分子内に存在するミトコンドリアへの局在化シグナルの解析:チトクロムp-450(SCC)前駆体に対するcDNAを改変して前駆体分子に様々な欠失やアミノ酸置換を行いミトコンドリアへの移入の様子を調べた。局在化シグナルは前駆体延長ペプチドのアミノ末端から19アミノ酸残基の中に含まれていた。次に、延長ペプチドのアミノ末端部に点在している塩基性アミノ酸の役割を調べるため^4Arg→Ser、^9Arg→Ser、^<14>Lys→Thrの置換を行ったところ、塩基性アミノ酸1残基存在すれば前駆体のミトコンドリア表面への結合は起こるが、移入には3残基全て存在することが必要であった。2.チトクロムp-450(SCC)前駆体と結合するミトコンドリア蛋白質の検索:前駆体分子を認識し、ミトコンドリア内に輸送する過程に関与している蛋白質をチトクロムp-450(SCC)前駆体の延長ペプチドのアミノ末端部20残基に相当するペプチドを化学合成し、これと反応する蛋白質として単離することを試みた。化学合成ペプチドが分子量約32KDaの細胞骨格蛋白質と類似した性質を示す蛋白質と特異的に結合することを見つけ、現在これに精製中である。3.延長ペプチドを切断除去するプロテアーゼの精製:ラット肝ミトコンドリアマトリクスよりプロセシングプロテアーゼを均一に精製した。金属プロテアーゼの一種で分子量55KDaおよび52KDaの2つのサブユニットから成り、アドレノドキシン、チトクロムp-450(SCC)、p-450(11β)前駆体の延長ペプチドをエンドプロテアーゼ作用により切断した。現在、本酵素のcDNAクローニングを行っている。

In the second half of the year, the chemical engineering department is responsible for the synthesis of the chemical engine in the direction of the chemical engine and the chemical machine in the direction of the chemical engine and the chemical machine. 1. There is a problem in the molecular structure of the precursor body of SCC (cDNA). The molecular weight of the molecule is not available. This is not true. In the chemical reaction, there is a strong acid residue at the end of the chemical reaction. The key point at the end of the secondary and lengthening cycle is that there is a significant difference between the 4Arg Ser, the 9Arg Ser, the ^ & lt;14>Lys Thr, and the presence of the precursors in the precursors. There is a critical mass on the surface of the precursors. two。 The combination of precursors (SCC) and precursors (SCC) is related to the chemical synthesis of the 20 residues at the end of the chain. Please do not know if you are going to make an attempt. The molecular weight of chemically synthesized osteoblasts is similar to that of cellular osteoblasts, which is similar to that of 32KDa proteins, which is now known to be used in sperm. 3. It is necessary to remove the essence of the liver, the liver and the liver. The metal has different molecular weight (55KDa) and 52KDa (2) molecular weight (MWM). The molecular weight (MWM), the molecular weight (MW), the molecular weight (MW), the molecular weight (MWM), the molecular weight (MW), the molecular weight (MWM), the molecular weight (MWM), the molecular At present, this enzyme is used to treat cDNA.