抗がん性抗生物質によるDNA分子の微細構造の認識と修飾及び活性変動

抗癌抗生素对DNA分子精细结构和活性变化的识别和修饰

• 批准号: 02250219
• 负责人: 駒野 徹
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02250219/
• 关键词: 活性作素; DNA鎖切断; アルカリ不安定部位; 過酸化水素ー鉄イオン; 過酸化水素ー銅イオン; 遷移金属イオンの効果

DNAは部分的に高次構造をとっており、この高次構造部位をある種の抗がん性抗生物質は認識してDNA鎖切断を引き起す。このDNA鎖切断は微量の遷移金属イオン存在下で起ることから活性酸素によることが示唆されていた。そこで本研究では活性酸素生成系の基礎として過酸化水素と各種遷移金属により生成する酸素ラジカルがDNAに対してどのような修飾ないしは切断を与えるかを明らかにした。過酸化水素のDNA損傷作用に及ぼす金属イオンの効果を、超ら線DNAを用いたアガロ-スゲル電気泳動法と未端標識DNA断片を用いたシ-ケンスゲル電気泳動法の2つの方法で検討した。過酸化水素は、鉄あるいは銅イオン存在下で、(1)DNA鎖切断、及び(2)熱ピペリジン処理に不安定(アルカリ不安定)な塩基修飾の、少なくとも2種類のDNA損傷を誘導した。損傷部位を詳細に解析し、損傷を引き起こす酸素ラシカルの種類を、ラジカル捕捉剤で調べたところ、H_2O_2/Fe(II)DNA損傷反応には生成するヒドロキシラジカル(OH^0)が関与していることが明らかとなった。一方H_2O_2/Cu(II)DNA損傷反応には、ヨウ化カリウムによって阻害される反応(タイプI)と、阻害されない反応(タイプII)が存在した。タイプIのDNA損傷反応のDNA塩基特異性は、銅イオン存在下における脂質過酸化物、あるいはアスコルビン酸による塩基損傷の特異性と類似しており、遊離のヒドキシラジカル以外の活性酸素がDNA鎖切断に関与していることが示唆された。一連のDNA鎖切断反応,あるいは修飾反応は0X174RFIDNAを制限酵素で処理し、得られた178塩基対,及び275塩基対の長さのDNA断切の3'ー未端を ^<32>pで標識したもので、この基質はすべて塩基配列が明らかとなっている。

The high-order structure of DNA is recognized as a kind of resistant antibiotic. The DNA lock is broken in the presence of trace amounts of migrating metals. In this study, we found that the basic mechanism of active acid production was to modify the DNA structure of various migrating metals. DNA damage caused by peracidified hormones and the effects of metal ions on DNA, ultra-linear DNA, and terminal-labeled DNA fragments were investigated by electrophoresis and electrophoresis. 2 types of DNA damage were induced in the presence of peracidified water, iron, copper,(1)DNA lock cleavage, and (2) heat treatment. The damage site was analyzed in detail, the damage was induced, the type of DNA was detected, the H_2O_2/Fe(II)DNA damage was detected, and the H_2O_2/Fe(II)DNA damage was detected. H_2O_2/Cu(II)DNA damage reaction was observed in both groups. The specificity of DNA base damage in response to DNA damage is similar to that of lipid peroxidation in the presence of copper and active acids other than copper in the presence of DNA lock cleavage. The DNA sequence is locked and the modified DNA sequence is 0X174 RFIDNA restriction enzyme processed, and the 3'end of the DNA sequence is identified by the 178-base pair and the 275-base pair<32>.

项目成果

So Kobayashi: "Effects of metal ions on the DNA damage induced by hydrogen peroxide" Agric.Biol.Chem.54. 69-76 (1990)

So Kobayashi：“金属离子对过氧化氢诱导的 DNA 损伤的影响”Agric.Biol.Chem.54。