増殖因子受容体とGTP結合蛋白との共役機構の解明

阐明生长因子受体与 GTP 结合蛋白之间的偶联机制

• 批准号: 02262205
• 负责人: 尾形 悦郎
• 金额: $ 6.4万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02262205/
• 关键词: IGFーII受容体; G蛋白; G蛋白活性化配列; 一次構造; G蛋白共役; モチ-フ

前年度までの成果として、我々は、精製IGFーII受容体が精製G蛋白を直接認識し、かつ活性化することを証明したので、本年度は、IGFーII受容体の持つこのG蛋白共役の分子機構の解明を試みた。我々は、独自の方法で、まず、IGFーII受容体の細胞内ドメインに所在する、2410残基から2423残基の領域(ペプチド14領域)に、特異的なG蛋白活性化能が存在することを見いだした。ペプチド14が、G蛋白を活性化する様式は、従来知られている受容体により活性化様式と差がなかった。ペプチド14のG蛋白活性化能は、これにIGFーII受容体の膜貫通領域を結合することで、1000倍に上昇することが出来た。これらのことは、ペプチド14の機能が、IGFーII受容体のG蛋白共役活性の責任を担うことを示唆していたので、我々は、更に、ペプチド14に対する抗体を作成し、その証明を試みた。果たして、IGFーII受容体とG蛋白とから成る再構成系において、この抗体は、IGFーII受容体のG蛋白共役活性を完全に抑制した。以上のことから、ペプチド14配列を用いて、IGFーII受容体がG蛋白を認識し、かつ活性化すると結論することができる。これは、受容体のG蛋白認識機構として明らかにされた初めての分子機構である。更に、我々は、ペプチド14のG蛋白活性化能を担う構造を、各種変異ペプチドを用いて明らかにする実験を行なった。このことから、G蛋白を活性化する一次構造モチ-フが存在すること、それは、G_<iー2>蛋白の場合、N端に塩基性残基を2個持ち、C端にBーBーXーBもしくはBーBーXーXーB(B:塩基性残基,X:非塩基性残基)の構造から成る配列であることを、世界で初めて明らかにした。今後、このモチ-フを用いて、これまで未知とされてきた様々な受容体シグナル伝達機構の解明を計画中である。

In the past year, we have been trying to clarify the molecular mechanism of G protein co-operation in IGF II receptor by refining IGF II receptor and directly recognizing and activating G protein. We have developed our own method to identify the presence of specific G protein activation activity in the region from residue 2410 to residue 2423 (region 14) of the IGF-II receptor. The expression of G protein is different from the expression of G protein. The activity of G protein in IGF II receptor increased by 1000 times. The function of IGF II receptor G protein co-activity is responsible for the production and demonstration of IGF II receptor G protein co-activity. As a result, IGF II receptor and G protein recombination system completely inhibited the G protein co-activity of IGF II receptor. The above results show that IGF II receptor G protein has been recognized and activated. The receptor's G protein recognition mechanism is the first molecular mechanism. In addition, we have a variety of different types of G protein activation structures, such as: In the case of G_(i-2) protein, the N-terminal basic residue has two residues, and the C-terminal basic residue B-B-X-B(B: basic residue, X: non-basic residue) has a structural transition from B-B-X-B(B: basic residue,X: non-basic residue) to B-X-B. In the future, the solution of this problem will be solved in the future.

项目成果

Ikuo Nishimoto et al.: "Transmenbrane Signaling mechanism of IGFーII/mannose 6ーphosphate receptor" Elsevier Press.

Ikuo Nishimoto 等人：“IGF-II/甘露糖 6-磷酸受体的跨膜信号传导机制”Elsevier Press。

Takashi Okamoto et al: "Iusulinーlike Growth Factor II/mannose 6ーPhosphate receptor is incapable of activating GTPーbinding proteins in response to mannose 6ーphosphate,but capable in response to IGFーII." Biochem.Biophys.Res.Commun.168. 1201-1210 (1990)

Takashi Okamoto 等人：“Iusulin 样生长因子 II/6-磷酸甘露糖受体不能响应 6-磷酸甘露糖激活 GTP 结合蛋白，但能够响应 IGF-II。”公报168。1201-1210（1990）

Takashi Okamoto et al: "A simple structure eucodes G proteinーactivating function of the IGFーII/mannose G phosphate receptor" Cell. 62. 709-717 (1990)

Takashi Okamoto 等人：“一种简单的结构编码 IGF-II/甘露糖 G 磷酸受体的 G 蛋白激活功能”Cell。62. 709-717 (1990)

Yoshitake Murayama et al.: "Distinctive regulation of the functional linkage between the human cationーindependent mannose 6ーphosphate receptor and GTPーbinding proteins by IGFーII and Manー6ーP." J.Biol.Chem.262. 17456-17462 (1990)

Yoshitake Murayama 等人：“IGF-II 和 Man-6-P 对人阳离子非依赖性甘露糖 6-磷酸受体和 GTP 结合蛋白之间功能连接的独特调节。”17456。 -17462 (1990)

Takashi Okamota et al.: "Regulation of transmenbrane signal transduction of IGFーII by competence type growth tactors or viral p21" J.Biol.Chem.

Takashi Okamota 等人：“能力型生长因子或病毒 p21 对 IGF-II 跨膜信号转导的调节”J.Biol.Chem。