G蛋白質による増殖制御機構の解明

1.G_<i2>活性化抑制配列の確定:我々は既に、ペプチドのG蛋白質活性化配列モチーフを発表した。これを基にG_<i2>α内のAsp^<338>-Cys^<352>(G_<i2>α-338-352)を合成した。G_<i2>α-338-352はG_<i2>活性型受容体やペプチドによるG_<i2>活性化を容量依存性に抑制し、IC_<50>は約6μMであり、30μMで完全に抑制した。G_<i2>α-338-352はG_<i2>のGDP/GTP交換反応を抑制することによって、G_<i2>活性化を特異的に抑制することを明らかにした。この結果、受容体刺激によるG蛋白質活性化とは、Gαに内在する自己抑制を解除することであると言える。このコンセプトは独創的であり、受容体のG蛋白質活性化機構解明に新たな道を開くものであるといえる。2.G_<i2>αによるc-fos転写制御機構の解明:G_<i2>αはプロトオンコジーン産物であり、活性型変異であるgip2は細胞に形質転換を起こす。我々はc-fosプロモーターがgip2の制御下にあることを見い出した。gip2はc-fosプロモーター内のSREを介してc-fos転写活性を上昇させること、RCE(Rb Control Element)を介してc-fos転写を抑制することを発見した。更にgip2はRb転写活性を促進し、pRbを介してRCEに働いていることを明らかにした。即ち、gip2はc-fosプロモーター内の2つの異なる領域SRE,RCEを介してc-fos転写活性を正負両方向に制御していること、pRbを介するシグナルはc-fos転写活性を抑制することが示された。本研究により、gip2からpRbを介した新たなc-fos転写活性制御機構の存在が明らかとなった。これはgip2の形質転換作用解明に新たな視点を与えるものである。

1.G_<i2>活性化抑制配列の確定:我々は既に、ペプチドのG蛋白質活性化配列モチーフを発表した。これを基にG_<i2>α内のAsp^<338>-Cys^<352>(G_<i2>α-338-352)を合成した。G_<i2>α-338-352はG_<i2>活性型受容体やペプチドによるG_<i2>活性化を容量依存性に抑制し、IC_<50>は約6μMであり、30μMで完全に抑制した。G_<i2>α-338-352はG_<i2>のGDP/GTP交換反応を抑制することによって、G_<i2>活性化を特異的に抑制することを明らかにした。この結果、受容体刺激によるG蛋白質活性化とは、Gαに内在する自己抑制を解除することであると言える。このコンセプトは独創的であり、受容体のG蛋白質活性化機構解明に新たな道を開くものであるといえる。2.G_<i2>αによるc-fos転写制御機構の解明:G_<i2>αはプロトオンコジーン産物であり、活性型変異であるgip2は細胞に形質転換を起こす。我々はc-fosプロモーターがgip2の制御下にあることを見い出した。gip2はc-fosプロモーター内のSREを介してc-fos転写活性を上昇させること、RCE(Rb Control Element)を介してc-fos転写を抑制することを発見した。更にgip2はRb転写活性を促進し、pRbを介してRCEに働いていることを明らかにした。即ち、gip2はc-fosプロモーター内の2つの異なる領域SRE,RCEを介してc-fos転写活性を正負両方向に制御していること、pRbを介するシグナルはc-fos転写活性を抑制することが示された。本研究により、gip2からpRbを介した新たなc-fos転写活性制御機構の存在が明らかとなった。これはgip2の形質転換作用解明に新たな視点を与えるものである。