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後根神経節細胞を分別する抗糖脂質特異抗体の開発とその神経細胞障害性の研究

分离背根神经节细胞的抗糖脂特异性抗体的开发及其神经毒性研究

基本信息

批准号：
03255204
负责人：
楠進
金额：
$ 0.77万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

後根神経節細胞を分別するモノクロ-ナル抗体の作成の目的で、生後1ヶ月のウサギ後根神経節のホモジェネ-トをbalb‐cマウスに免疫した。その結果いくつかのクロ-ン抗体が作成されたが、そのうち抗原特異性が明らかなものとして抗フコシルGM1IgMκ型抗体(CRD73‐6)を得ることができた。同抗体は調べ得た限りではフコシルGM1に特異的であり、GM1やフコシルGA1とも全く交差反応はみられなかった。同抗体培養上清の抗体活性は1024倍まで認められた。CRD73‐6を用いた免疫組織染色ではヒト後退神経節で小型神経細胞を免疫染色し、それをとりまくsatellite cellsも染色した。またウサギで発生学的変化をしらべると胎生14日にはneural crestやneural tubeの染色はみられなかったが、胎生25日には後根神経節の一次知覚ニュ-ロンと遠位側の神経線維がdiffuseに染色され、生後2日では中枢側の神経線維と脊髄背側の広範な染色がそれに加わった。さらに後根神経節内では生後1ヶ月で一部の大型細胞に染色されないものが出現し、adultでは中型から小型神経細胞とその周囲のsatellite cellsに染色性が限られた。以上の結果は抗フルシルGM1ウサギ抗血清を用いて得られた結果を確認するとともにさらに新たな知見が加わったものである。抗フコシルGM1ウサギ抗血清を生直後のウサギに筋注して細胞障害性の検討を現在行っている。CRD73‐6以外のクロ-ンでは後根神経節小型神経細胞のみを認識する抗体やsatellite cellsのみを認識する抗体などが得られたが、それらの抗原物質については現在検索中である。一方抗GD1bモノクロ-ナル抗体(GM1とは反応せず)を用いてヒト後根神経節を免疫染色したが、フォルマリン固定すると後根神経節細胞が染め分けられたが、アセトン処理すると殆ど全ての神経細胞が免疫染色された。自己免疫性末梢神経障害患者血清中にしばしばみられる抗GD1b抗体の病因との関連を考える上で重要な知見であると考えられる。

Posterior root ganglion cells were used to produce antibodies for the purpose of immunization, one month after birth As a result, the anti-IgM kappa antibody (CRD73 ‐6) was produced and the anti-IgM kappa antibody (CRD73 ‐6) was obtained. The same antibody can be used to regulate the immune system. The antibody activity in supernatant of culture with the same antibody was 1024 fold higher than that of control group. CRD73 - 6 was stained with immunostaining for small neurons and satellite cells. On the 14th day after birth, the neural crest and neural tube were stained with a diffuse dye. On the 25th day after birth, the neural crest and neural tube were stained with a diffuse dye. On the 2nd day after birth, the neural crest and dorsal tube were stained with a diffuse dye. The staining of some large cells appeared in the postnatal neurons one month after birth, while the staining of adult small cells was limited. The above results were confirmed by the anti-GM 1 anti-serum. Anti-GM1 anti-serum is produced in the presence of anti-GM1 anti-GM1. CRD73 - 6 is a new type of antigen that can be detected in the brain. One anti-GD1b antibody (GM1) was used to immunostain the posterior ganglion cells and to immobilize the posterior ganglion cells. It is important to know the etiology and relationship of anti-GD 1b antibodies in serum of patients with immune peripheral neuropathy.