血液細胞産生の調節に関する基礎的解析ー幹細胞の濃縮・純化とその機能の解析

血细胞生成调控的基础分析——干细胞的浓缩、纯化及其功能分析

• 批准号: 04247104
• 负责人: 溝口 秀昭
• 金额: $ 19.07万
• 依托单位: Tokyo Women's Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 1992
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04247104/
• 关键词: 血液幹細胞; 受容体型チロシンキナーゼ; stem cell factor; トランスジェニックマウス; P53遺伝子; ストロマ細胞; トランスフェリンレセプター; インターロイキン11

(1)幹細胞の濃縮・純化・増幅:マウスでは前年度の研究で完成した方法で幹細胞を単離し、その幹細胞に発現している10種の受容体型チロシンキナーゼを明らかにした。また、マウス幹細胞はstem cell factor(SCF)とIL-6あるいはIL-11を一緒に加えると数千倍に増幅されるが、γインターフェロンにも同様の作用があることを明らかにした。なお、SCFの活性にAsp^<134>からSer^<142>までの構造が必要であることも明らかにした。ヒト幹細胞では分化系列抗原陰性でCD34^+の細胞を集めると幹細胞が20〜50%に濃縮された。SCFとIL-11を共に加えると、約10倍に増幅されることを明らかにした。(2)多能性幹細胞の細胞周期の調節:映画撮影によってマウス幹細胞の分裂様式を検討し、サイトカイン刺激ではランダムであり、ストロマ細胞存在下では規則正しく起こることを明らかにした。(3)増殖関連遺伝子を挿入したトランスジェニックマウスにおける造血幹細胞の挙動:p53遺伝子欠損マウスを相同組換えにより作成し、各組織の線維芽細胞が培養すると高い増殖能を維持し続け、造血系では幹細胞およびBリンパ系細胞が同様であり、生後3〜6ヶ月のマウスで多クローン性のT細胞の腫癌を形成し、p53遺伝子の造血における機能を明らかにした。4.顆粒球マクロファージ系細胞の分化:顆粒球マクロファージの分化に関わる造血因子およびレセプターは既に明らかにされており、本年度はその方面の研究はなされなかった。(5)リンパ球の初期分化と幹細胞:骨髄中の幹細胞に発現しているトランスフェリンレセプターがT細胞への分化に必須であることを明らかにした。その他、LFA-1およびPgp-1は幹細胞からT細胞への分化には必須であるが、胸腺中の前駆細胞からT細胞への分化には必要ないことも明らかにした。(6)巨核球・血小板産生:IL-11のオートクリン機構が巨核芽球性白血病細胞株にあることを明らかにし、その結果は巨核球の増殖分化機序に示唆を与えるものである。

(1)Stem cell concentration, purification and expansion: the method of stem cell isolation was completed last year, and 10 kinds of receptor types were developed. Stem cell factor(SCF) and IL-6 are the same factors that increase IL-11 by thousands of times. The structure of SCF <134><142>is necessary. Stem cells are concentrated by 20 ~ 50% for CD34^+ cells that are negative for differentiation series antigens. SCF-11 increased by about 10 times. (2)Regulation of the cell cycle of pluripotent stem cells: image capture, stimulation, and regulation in the presence of stem cells (3)Hematopoietic stem cell proliferation:p53 gene deficiency in the same composition, maintenance of high proliferation ability in line with tissue culture, hematopoietic stem cell proliferation, tumor formation in line with p53 gene in 3 to 6 months after birth. 4. Differentiation of granulocyte lineage cells: The relationship between differentiation of granulocyte lineage cells and hematopoietic factors is discussed. (5)Early differentiation of T cells and stem cells: stem cells in bone marrow develop rapidly and rapidly. Pgp-1 and LFA-1 are essential for stem cell differentiation and T cell differentiation in thymus. (6)Megakaryocyte and Platelet Production:IL-11 and Its Mechanism in Megakaryoblastic Leukemia Cell Lines

项目成果

Kobayashi S,Mizoguchi H,et al: "Interleukin-11 acts as an autocrine growth factor for for human megakaryoblastic cell lines." Blood. 81. 889-893 (1993)

Kobayashi S、Mizoguchi H 等人：“Interleukin-11 作为人类巨核细胞系的自分泌生长因子。”

Watanabe Y,Katsura Y,et al: "A murine thymic stromal cell line which may support the differentiation of CD4 8 thymocytes into CD4 8 αβ T cell receptor positive cells." Cellular Immunol. 142. 385-397 (1992)

Watanabe Y、Katsura Y 等人：“一种可支持 CD4 8 胸腺细胞分化为 CD4 8 αβ T 细胞受体阳性细胞的鼠胸腺基质细胞系。” 细胞免疫学 142. 385-397 (1992)

Okada S,Suda T,et al: "In vivo and invitro stem cell function of c-kit and Sca-1-positive hemopoietic cells." Blood. 80. 3044-3050 (1992)

Okada S、Suda T 等人：“c-kit 和 Sca-1 阳性造血细胞的体内和体外干细胞功能。”

Nishikawa M,Asano S,et al: "Changes in hematopoiesis-supporting ability of C3H10T1/2 mouse embryo fibroblasts during differentiation." Blood.

Nishikawa M、Asano S 等人：“C3H10T1/2 小鼠胚胎成纤维细胞分化过程中造血支持能力的变化”。

Tanaka R,Nakahata T,et al: "Stem cell factor enhances proliferation,but not maturation,of murine megakaryocytic progenitors in serum-free culture." Blood. 80. 1743-1749 (1992)

Tanaka R、Nakahata T 等人：“干细胞因子在无血清培养物中增强小鼠巨核细胞祖细胞的增殖，但不促进成熟。”