細胞極性に関わるGタンパク質カスケードによる選別輸送機構の解析

参与细胞极性的G蛋白级联分选运输机制分析

• 批准号: 06248205
• 负责人: 松井 泰
• 金额: $ 0.83万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06248205/
• 关键词: 低分子量GTP結合蛋白質; SH3ドメイン; SH3結合蛋白質; 細胞極性; 出芽酵母; 分泌小胞; 細胞膜伸長

増殖時の出芽酵母における分泌は、芽の形成に必要な材料供給のため、芽の部分に限定して起こっている。この極性分泌のために細胞極性の確立維持とそれにしたがった細胞骨格系の形成が、芽の形成過程には必須である。低分子量GTP結合タンパク質Rho3pが欠失すると細胞極性の維持不能となり、芽の成長ができなくなる。細胞極性による極性分泌の機構を解析するために遺伝学的手法を用いてRHO3の解析を行った。多コピーでrho3欠損を相補する遺伝子SRO1-SRO9を単離した。SRO6は、分泌小胞と細胞膜の融合過程に必須なSEC4と同一であった。RHO3に種々の点変異を導入し、優性活性型変異をもつRHO3を作成した。この変異を持つRHO3は、GAL7プロモーターにより発現させると低温感受性を示し、細胞は、通常の成長部位である芽の先端以外で膜の伸長が起こり、細胞がいびつに伸びた形態で、伸長部位には、アクチンフィラメントの形成が観察された。また、この低温感受性と異常に伸長した細胞形態は、sec4-8変異により抑圧された。これらのことよりRHO3機能は、細胞極性の維持を介して、アクチン系の細胞骨格系の形成と分泌小胞と膜の融合系の局在を、膜の伸長部位に限定させるために働いていると考えられる。SRO1は、SH3をもつタンパク質をコードし、細胞極性の確立に関与しているBEM1と同一である。このBEM1タンパク質のSH3と結合するBOI2タンパク質を同定できた。BOI機能の欠損は、Rho3p活性の上昇により抑圧された。したがって、Rho3pによる分泌の極性化に、BEM1タンパク質とBOIタンパク質が関与していると考えられ、これらのタンパク質の機能を解析することで分泌の極性化機構が明らかになると考えている。

During germination, budding yeast secretes the necessary materials for bud formation, and bud formation is limited. The establishment and maintenance of cell polarity in the process of cell skeleton formation and bud formation are essential. Low molecular weight GTP binding protein Rho3p is not enough to maintain cell polarity and bud growth. The mechanism of cell polarity secretion is analyzed. The method of genetic analysis is used to analyze RHO3. Rho3 is a complement to SRO1-SRO9. SRO6, secretory vesicle and cell membrane fusion process must be SEC4, the same. RHO 3 is a new type of protein. The difference between RHO3 and GAL7 is that the cell is normally grown at the tip of the bud, and the membrane is elongated at the tip of the bud. The cell is elongated at the tip of the bud. The cell morphology of the hypothermia sensitivity and abnormal elongation was different from that of the control group (sec4-8). RHO3 functions as a mediator for cell polarity maintenance, a mediator for cell skeleton formation, a mediator for secretory vesicles, and a mediator for membrane elongation. SRO1 and SH3 are the same as BEM1. BEM1 and BEM 2 are identical. Loss of BOI function and increase of Rho 3p activity are suppressed. The polarization mechanism of secretion of BEM1 is related to the analysis of the function of secretion of BEM1 and Rho3.