HIVのTリンパ球への結合と膜融合に関与するT細胞内プロテアーゼの作用機序

T细胞蛋白酶参与HIV与T淋巴细胞结合和膜融合的作用机制

• 批准号: 06255209
• 负责人: 木戸 博
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06255209/
• 关键词: エイズウイルス; CD4; プロテアーゼ; gp120; gp160; 感染機構; 膜融合

エイズウイルス(HIV-1)がヒト由来のCD4陽性細胞に感染して増殖するさいに少なくとも二種類の細胞内プロテアーゼが重要な役割を果している。その1つは感染細胞膜上の蛋白質、トリプターゼTL_2(TL_2)でプロテアーゼ活性を持ちgp120のV3領域と特異的に結合する。両者の結合の見かけ上の解離定数は3.8×10^<-8>MでCD4と比較するとgp120との結合力は弱く、従ってCD4と結合した後にTL_2と結合することが考えられた。また感染細胞膜上のTL_2はいずれもCD4の近傍で、しかもgp120の結合部位の近くに位置していることが判明した。これはCD4に対する抗体の中で、gp120の結合部位をエピトープとする抗体によって細胞膜上のTL_2とその抗体との結合が特異的に阻害されることによる。さらにTL_2と結合したV3ループはウイルスの感染にとって重要と推定される中央部の-GPGARF-モチーフを保存したまま、その近傍の疎水性アミノ酸か塩基性アミノ酸部位で解裂することが明らかになった。第2のプロテアーゼされる過程で、gp160をgp120とgp41へ変換するプロテアーゼである。このプロセシングはウイルスが感染性を示すために必須の過程である。我々はこのプロセシングプロテアーゼ(Viral envelops protein maturase,VEM)が、感染細胞のERとゴルジ膜分画に局在する分子量26±2kDaのCa^<++>非要求性セリン性プロテアーゼであることを明らかにした。さらに本研究でVEMの精製に成功しインヒビター特異性を明らかにした。その結果、VEMは活性中心にSerとその近傍にCysを持つ酵素と推定され、その阻害剤は感染を阻止することが示された。

HIV-1 infection in CD4-positive cells from which HIV-1 is derived is a rare and important consequence of two types of intracellular infection. 1. Protein binding on infected cell membrane, TL_2(TL_2), TL_2 activity, and V3 domain specific binding to gp120. The <-8>binding force of CD4 is weak, and the binding force of CD4 is weak, and the binding force of CD4 is weak. TL_2 on the membrane of infected cells was found near CD4 and near the binding site of gp120. The binding sites of CD4-related antibodies to TL_2 and gp120 are located on the cell membrane. The binding sites of CD4-related antibodies to TL_2 and gp120 are located on the cell membrane. TL_2 and V3 are important for infection, and the central part of GPGARF is presumed to be preserved, and the adjacent part of GARF is acidic. The second part of the process, gp160 gp120 gp41 The process of infection The molecular weight of Ca^&lt;++&gt; in the ER and membrane of infected cells was 26± 2 kDa, which was not required for Viral envelope protein maturase (VEM). In this study, VEM was refined successfully and the specificity of VEM was clarified. As a result, VEM has been shown to be able to prevent infection by inhibiting the activity of Cys in the vicinity of Ser.

项目成果

H.Kido: "Intracellular Protein Catabolism" Plenum Publising Corporation,New York(in press), (1995)

H.Kido：“细胞内蛋白质分解代谢”Plenum 出版公司，纽约（印刷中），（1995 年）

H.Kido: "Proteolysis and Protein Turnover" Portland Press,London, 7 (1993)

H.Kido：“蛋白水解和蛋白质周转”波特兰出版社，伦敦，7 (1993)

M.Inoue: "Close co-lccalization of CD4 and a serine esterase tryptase TL2 on the cell-surface of human monocytoidand CD4 lymphoid cells" Biochem,Biopys.Res.Commun.201. 1390-1395 (1994)

M.Inoue：“CD4 和丝氨酸酯酶类胰蛋白酶 TL2 在人单核细胞和 CD4 淋巴细胞的细胞表面上的紧密共定位”Biochem，Biopys.Res.Commun.201。

N.Shimizu: "Detection of tryptase TL2 and CD26 antigen in brain-derived cells non-permissive to T-cell-line tropic human immunodeficiency virus" FEBS Lett.(in press). (1995)

N.Shimizu：“在不允许 T 细胞系热带人类免疫缺陷病毒的脑源性细胞中检测类胰蛋白酶 TL2 和 CD26 抗原”FEBS Lett.（出版中）。