胸腺内でのT細胞分化制御機構の分子化学的解析

胸腺内控制 T 细胞分化机制的分子化学分析

基本信息

  • 批准号:
    06265206
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.69万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    1994
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1994 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

我々は早期活性化マーカー分子CD69を用いてポジティブセレクションの起こりつつある細胞群を同定した。ポジティブセレクションが起こる際とネガティブセレクションが起こる際に誘起されるシグナル伝達を次のような方法で解析しポジティブセレクションに特有のシグナル伝達機構の解明を目的とする。(1)細胞表面のTCRやCD69の量をフローサイトメトリーで、(2)チロシンキナーゼの活性化を抗チロシンリン酸抗体を使ったイムノブロッィング法で、(3)〔Ca^<2+>〕iの変化をコンピュータ画像解析装置(国立予防衛生研究所の鈴木和男博士の装置を利用)を用いて、(4)RAG-1、RAG-2といったT細胞のセレクションとともに発現の変化する分子のmRNAをノザンブロッティング法で解析した。免疫抑制剤であるFK506やサイクロスポリンAを用いてポジティブセレクションやネガティブセレクションのシグナル伝達系を解析したところ、胸腺内でのアポトーシスを伴うネガティブセレクションにはカルシニューリンの活性化は必要ないことがわかった。さらに、ポジティブセレクションついては、そのステップの最初の段階でカルシニューリンの活性化が必須であることがわかった。さらには、末梢の成熟T細胞に誘導されるアポトーシスはFK506やサイクロスポリンAで完全に抑制されるため胸腺細胞でのアポトーシスと成熟T細胞でのアポトーシスは違ったメカニズムで起こっていることがわかった。
I 々 は early activeness マ ー カ ー molecules CD69 を with い て ポ ジ テ ィ ブ セ レ ク シ ョ ン の up こ り つ つ あ を る cell populations with fixed し た. ポ ジ テ ィ ブ セ レ ク シ ョ ン が up こ る interstate と ネ ガ テ ィ ブ セ レ ク シ ョ ン が up こ る interstate に induced さ れ る シ グ ナ ル 伝 を times の よ う な method で parsing し ポ ジ テ ィ ブ セ レ ク シ ョ ン に の unique シ グ ナ ル 伝 of institutions の interpret を purpose と す る. (1) cell surface の TCR や CD69 の quantity を フ ロ ー サ イ ト メ ト リ ー で, (2) チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ の resistance activeness を チ ロ シ ン リ ン acid antibody を っ た イ ム ノ ブ ロ ッ ィ ン で グ method, (3) [Ca ^ 2 + > <) I の variations change を コ ン ピ ュ ー タ portrait parsing device (national institute of to prevent health の の Dr Suzuki and male Device を use) を い て, (4) RAG - 1, RAG - 2 と い っ た t-cell の セ レ ク シ ョ ン と と も に 発 の now - the す る molecular の mRNA を ノ ザ ン ブ ロ ッ テ ィ ン グ method で し た. Immunosuppression tonic で あ る FK506 や サ イ ク ロ ス ポ リ ン A を use い て ポ ジ テ ィ ブ セ レ ク シ ョ ン や ネ ガ テ ィ ブ セ レ ク シ ョ ン の シ グ ナ ル 伝 da system analytical し を た と こ ろ, thymus で の ア ポ ト ー シ ス を with う ネ ガ テ ィ ブ セ レ ク シ ョ ン に は カ ル シ ニ ュ ー リ ン の activeness は necessary な い こ と が わ か っ た. さ ら に, ポ ジ テ ィ ブ セ レ ク シ ョ ン つ い て は, そ の ス テ ッ プ の initially の Duan Jie で カ ル シ ニ ュ ー リ ン の activeness が must で あ る こ と が わ か っ た. さ ら に は, induced peripheral の mature T cells に さ れ る ア ポ ト ー シ ス は FK506 や サ イ ク ロ ス ポ リ ン A で に completely inhibit さ れ る た め thymocyte で の ア ポ ト ー シ ス と mature T cells で の ア ポ ト ー シ ス は violations っ た メ カ ニ ズ ム で up こ っ て い る こ と が わ か っ た.

项目成果

期刊论文数量(7)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Kubo,S.: "A novel form of self tolerance dictated in the thymus of transgenic mice with autoreactive T cell receptor α and β dhain genes." International Immunology. 6. 593-602 (1994)
Kubo, S.:“具有自身反应性 T 细胞受体 α 和 β dhain 基因的转基因小鼠的胸腺中存在一种新型的自我耐受性。”《国际免疫学》6. 593-602 (1994)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
V.Reeders: "T cell development in the thymus.Handbook of Experimental Immunology.(5th ed.)" Blackwell Scientific Publications, (1994)
V.Reeders:“胸腺中的 T 细胞发育。实验免疫学手册。(第 5 版)”Blackwell Scientific Publications,(1994)
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Benvniste,P.: "Engagement of the external domalns of CD45 throsine phosphatase can regulate the differentiation of immature CD4+CD8+ thymocytes into mature T cells." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 91. 6933-6937 (1994)
Benvniste,P.:“CD45 苏氨酸磷酸酶外部域的参与可以调节未成熟 CD4 CD8 胸腺细胞向成熟 T 细胞的分化。”
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Kearse,K.P.: "Developmentalrequlation of αβ T cell antigen receptor expression results form differentialstability of nascent TCRα proteihs within the endoplasmicreticulum of immature and mature T cells." EMBO Journal. 13. 4504-4514 (1994)
Kearse, K.P.:“αβ T 细胞抗原受体表达的发育调节导致未成熟和成熟 T 细胞内质网中新生 TCRα 蛋白的稳定性差异。” 13. 4504-4514 (1994)。
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  • 发表时间:
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    0
  • 作者:
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    $ 2.69万
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