MHCクラスII分子変異細胞株を用いた自己抗原処理・提供機構の解析
利用MHC II类分子突变细胞系分析自身抗原加工和传递机制
基本信息
- 批准号:06265225
- 负责人:
- 金额:$ 1.6万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
- 财政年份:1994
- 资助国家:日本
- 起止时间:1994 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
平成5年度の研究にて確立した変異APC株樹立方法の効率を検討した.得られた変異APC株のうち約43%がT細胞刺激能を消失しており,効率良くAPC変異株が得られることがわかった.種々のAPC変異株のうち、本年度はとくにAβz/AαdクラスII分子発現は正常であるがB/WF1マウス由来病原性自己反応性T細胞クローンに対する刺激能力を消失した変異株に焦点を当てて解析した.APC変異株2A11は病原性自己反応性T細胞クローンに対してはいかなる細胞数においても刺激能を消失していたが、KLH反応性T細胞クローンに対しては野生株(TAβz)と同程度の強いAPC活性を有してした.従って,この変異株はT細胞刺激に必要なアクセサリー分子には異常がなく、自己抗原ペプチドそのものの変異かあるいはそれがAβz/AαdクラスII分子に結合していないと考えられた.この変異株のクラスII遺伝子の塩基配列を解析すると、Aαd鎖の69番目のアラニンに対応する塩基配列(GCA)がスレオニンに対応する塩基配列(ACA)に変異していた.他のクラスII分子のアミノ酸変異は認められなかった.この結果から2A11変異APC株は,この部位のアミノ酸に変異が誘導されたために自己反応性T細胞クローンの標的抗原である自己ペプチドが結合できなくなった可能性が考えられる.次に野生株(TAβz)と変異株(2A11)の結合ペプチドの解析比較を試みた.野生株のクラスII分子結合ペプチドをアフィニティカラムで精製し逆相HPLカラムで分離した3個のピークについてアミノ酸シークエンスを行なった。一つはL-plastin589-601(XMARKIGARVYALP)に相当するシークエンスで、他の二つ(XATYXEQFTLFXYATE,XIMRXKIAHVVY)は相当するシークエンスがデータベースに見当たらなかった.また,微量であるが有意と思われるピークをプールしてアミノ酸シークエンスを行なった.その結果,相対的な位置として1番目にI or F,6番目にM or Yという主要結合ペプチドモチーフが推定された.現在,変異APC株2A11のクラスII分子結合ペプチドを解析中である.
The research of Heisei 5 years established the efficiency of different APC plant establishment methods. About 43% of APC strains were found to have T cell stimulatory ability disappeared, and the rate of APC strains was good. APC variant 2A11 has been analyzed for its ability to stimulate pathogenic self-reactive T cells, and its ability to stimulate pathogenic self-reactive T cells has disappeared. KLH anti-T cell anti-T cell anti-T cell Aβz/Aαd is a molecule that binds to T cells and is essential for T cell stimulation. The base alignment of the variant II gene was analyzed. The base alignment (GCA) of the 69-point sequence of the Aαd lock was analyzed. He is a member of the I.D.C., a member of the I.D.C. As a result, 2A11 variant APC strains were induced by different acids in the same sites, and the target antigens of their own anti-T cells were tested for the possibility of binding. The analysis and comparison of the combination between the wild strain (TAβz) and the mutant strain (2A11) were carried out. Wild strains of HPL II molecules bind to each other and are separated from each other in reverse phase. One block L-plastin589-601(XMARKIGARVYALP) is corresponding to the other block (XATYXEQFTLFXYATE,XIMRXKIAHVVY) is corresponding to the other block. A small amount of time, a small amount of time. As a result, the corresponding positions are I or F in the first place, M or Y in the sixth place, and are mainly combined with the positions of the first place and the second place. Now, different APC strain 2A11 is in the process of molecular binding analysis.
项目成果
期刊论文数量(8)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Kensuke Miyake: "Murine B cell proliferation andprotection from apoptosis with an antibody against a 105 kDa molecule:Unresponsiveness of X-linked immunodeficientB cells." J.Exp.Med.180. 1217-1224 (1994)
Kensuke Miyake:“针对 105 kDa 分子的抗体可促进小鼠 B 细胞增殖并防止细胞凋亡:X 连锁免疫缺陷 B 细胞无反应。”
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Kensuke Miyake:“RP105 是一种与 B 细胞激活有关的新型 B 细胞表面分子,是富含亮氨酸的重复蛋白家族的成员。”
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