MHCクラスII分子変異細胞株を用いた自己抗原処理・提供機構の解析

利用MHC II类分子突变细胞系分析自身抗原加工和传递机制

• 批准号: 06265225
• 负责人: 木本 雅夫
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: 佐賀医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06265225/
• 关键词: APC変異株; Aβz; AαdクラスII分子; B; WF1マウス; 病原性自己反応性T細胞クローン; 自己ペプチド; 結合ペプチドモチーフ; アミノ酸シークエンス

平成5年度の研究にて確立した変異APC株樹立方法の効率を検討した.得られた変異APC株のうち約43%がT細胞刺激能を消失しており,効率良くAPC変異株が得られることがわかった.種々のAPC変異株のうち、本年度はとくにAβz/AαdクラスII分子発現は正常であるがB/WF1マウス由来病原性自己反応性T細胞クローンに対する刺激能力を消失した変異株に焦点を当てて解析した.APC変異株2A11は病原性自己反応性T細胞クローンに対してはいかなる細胞数においても刺激能を消失していたが、KLH反応性T細胞クローンに対しては野生株(TAβz)と同程度の強いAPC活性を有してした.従って,この変異株はT細胞刺激に必要なアクセサリー分子には異常がなく、自己抗原ペプチドそのものの変異かあるいはそれがAβz/AαdクラスII分子に結合していないと考えられた.この変異株のクラスII遺伝子の塩基配列を解析すると、Aαd鎖の69番目のアラニンに対応する塩基配列(GCA)がスレオニンに対応する塩基配列(ACA)に変異していた.他のクラスII分子のアミノ酸変異は認められなかった.この結果から2A11変異APC株は,この部位のアミノ酸に変異が誘導されたために自己反応性T細胞クローンの標的抗原である自己ペプチドが結合できなくなった可能性が考えられる.次に野生株(TAβz)と変異株(2A11)の結合ペプチドの解析比較を試みた.野生株のクラスII分子結合ペプチドをアフィニティカラムで精製し逆相HPLカラムで分離した3個のピークについてアミノ酸シークエンスを行なった。一つはL-plastin589-601(XMARKIGARVYALP)に相当するシークエンスで、他の二つ(XATYXEQFTLFXYATE,XIMRXKIAHVVY)は相当するシークエンスがデータベースに見当たらなかった.また,微量であるが有意と思われるピークをプールしてアミノ酸シークエンスを行なった.その結果,相対的な位置として1番目にI or F,6番目にM or Yという主要結合ペプチドモチーフが推定された.現在,変異APC株2A11のクラスII分子結合ペプチドを解析中である.

In the fifth year of Pingcheng, the rate of establishment of APC strains was confirmed by the study. The results showed that about 43% T cell stimulation of APC strain could disappear, and the rate of good APC strain could be reduced. A variety of APC strains, This year, the pathogenicity of A β

项目成果

Kensuke Miyake: "Murine B cell proliferation andprotection from apoptosis with an antibody against a 105 kDa molecule:Unresponsiveness of X-linked immunodeficientB cells." J.Exp.Med.180. 1217-1224 (1994)

Kensuke Miyake：“针对 105 kDa 分子的抗体可促进小鼠 B 细胞增殖并防止细胞凋亡：X 连锁免疫缺陷 B 细胞无反应。”

Kensuke Miyake: "RP105,a novel B cell surface molecule implicated in B cell activationis a member of the leucine-rich repeat protein family." J.Immunology. (in press).

Kensuke Miyake：“RP105 是一种与 B 细胞激活有关的新型 B 细胞表面分子，是富含亮氨酸的重复蛋白家族的成员。”