クラスII遺伝子導入トランスジェニックマウスの免疫学的解析

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1.Eαd遺伝子導入トランスジェニックマウスの系統化。昨年度に引き続き、B6Eαdマウスの継代、維持を行なった。Eαd遺伝子の発現を蛍光抗体法およびT細胞クロ-ンを用いた機能的解析法により調べたところ、安定して子孫に伝達されていることが確認された。2.Ed遺伝子の他のハプロタイプのマウスへの導入。様々なH-2ハプロタイプのマウスとB6Eαdマウスを交配させて作ったF1マウスのEαd遺伝子の発現を同様の方法により調べたが、いずれのマウスにおいてもその発現が確認された。3.B6Eαdマウスに発現される新たなクラスII特異性の解析。アロ抗原反応性T細胞クロ-ンおよび抗原特異T細胞クロ-ンを作製し、B6Eαdおよ(BALB/c×B6Eαd)F1マウスのクラスII特異性を機能的に解析すると、これらのトランスジェニックマウスに特異的に発現しているクラスII分子の存在が示された。モノクロ-ナル抗体を用いた阻止実験ならびに色々なマウスを用いた実験からそれがアイソタイプ混合AβEα分子であることが確認された。また、このアイソタイプ混合クラスII分子に反応する特異抗体を作製した。これを用いた実験から、正常マウスの卑細胞をIL-4で刺激するとアイソタイプ混合クラスII分子の発現が誘導されることが明らかにされた。4.Aβd遺伝子を導入したトランスジェニックマウスを山村研一(熊本大学)から入手し、継代、維持している。導入Aβd遺伝子の伝達ならびに発現は安定していることが確かめられている。B6EαdマウスとのF1を作り、Aβd遺伝子の発現を調べると、AβdAαb以外にAβdEαdアイソタイプ混合クラスII分子の発現も認められた。現在この分子の機能的解析を行なっている。