心臓由来株化細胞におけるイオンチャネル発現に関する研究

心脏来源细胞系离子通道表达的研究

• 批准号: 06274227
• 负责人: 大地 陸男
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06274227/
• 关键词: 株化筋細胞; 培養心筋; カルシウムチャネル; カリウムチャネル; ジヒドロピリジン

ラット胚心臓由来の株化筋細胞H9c2は培養によって単核筋芽細胞から多核の筋管細胞に分化する。細胞の分化に伴うイオンチャネルの発現をL型Caチャネルおよび外向きKチャネルに関してパッチクランプ法により検討した。またL型Caチャネルの発現を特異抗体を用いた生化学的方法で検討した。1.L型Caチャネル(1)増殖中の筋芽細胞から活性化・不活性化が速くCaよりBaに高い透過性を示す心筋型の特徴を持つジヒドロピリジン感受性のCa電流が記録された。(2)筋芽細胞のホールセル記録では骨格筋型のL型Ca電流が心筋型のより優位に記録された。しかし、単一電流記録を行うと、20pSの心筋型も12pSの骨格筋型と併存していた。(3)心筋型L型Caチャネルのα_1サブユニットに対する抗体を用いたウェスタンブロットでは、単核および多核いずれの細胞でも230kDおよび190kDのチャンル蛋白が発現していた。(4)骨格筋型L型Caチャネルα_1サブユニットに特異的な抗体を用いたウェスタンブロットによると筋芽細胞においてのみ165kDの骨格筋型L型チャネルの発現が認められた。2.Kチャネルホールセル電流記録によって電位依存性Kチャネル(IKv)とCa依存性Kチャネル(IKCa)の発現が確認された。IKCaはcharydotoxin感受性成分とapamin感受性成分に分けられた。IKvは細胞の分化の全期にあり、一方IKCaは筋芽細胞にはなく筋管細胞に分化した後に発現した。

Youdaoplaceholder0 Embryonic cardiogenic specimen strain of fascia cell H9c2 ら culture によって単 nuclear fascia bud cell ら multinucleated specimen fascia tube cell に differentiation する. Cells の に with う イ オ ン チ ャ ネ ル の 発 を now L Ca チ ャ ネ ル お よ び outgoing き K チ ャ ネ ル に masato し て パ ッ チ ク ラ ン プ method に よ り beg し 検 た. Youdaoplaceholder0 L-type Caチャネ チャネ を を を specific antibody を the で検 is obtained by で検 た biochemical method で検 to attack た. 1. L-type Ca チ ャ ネ ル の jin bud cells (1) raised colonization か ら activeness, no activation が speed く Ca よ り Ba に い high permeability を す in heart muscle type の, 徴 を hold つ ジ ヒ ド ロ ピ リ ジ ン susceptibility の Ca current が record さ れ た. (2) Fascia bud cells ホ ホ <s:1> セ セ セ で record で bone grid fascia type <s:1> L-type Ca current が heart fascia type <s:1> よ <s:1> superior position に record された. <s:1> と, 単 - current recording を line うと, 20pS pass cardiotendon type <s:1> 12pS pass bone grid tendon type と coexisting, て て た た. (3) the heart muscle type L type Ca チ ャ ネ ル の alpha _1 サ ブ ユ ニ ッ ト に す seaborne を る antibody with い た ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ ト で は, 単 お よ び multi-core い ず れ の cells で も 230 kd お よ び 190 kd の チ ャ ン ル protein が 発 now し て い た. (4) skeletal muscle type L type Ca チ ャ ネ ル alpha _1 サ ブ ユ ニ ッ ト に specific antibody を な with い た ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ ト に よ る と reinforcement bud cells に お い て の み 165 kd の skeletal muscle type L チ ャ ネ ル の 発 が now recognize め ら れ た. 2. K チ ャ ネ ル ホ ー ル セ ル current record に よ っ て potential dependency K チ ャ ネ ル (IKv) と Ca dependency K チ ャ ネ ル (IKCa) の 発 が now confirm さ れ た. IKCa charydotoxin sensitive component とapamin sensitive component に score けられた. During the entire period of <s:1> differentiation <e:1> of IKv <s:1> cells, にあ, and after the に differentiation of the same IKCa <s:1> spore-forming cells に なく なく and the に of the fascia canal cells た, に occurs た.