フリーラジカル損傷DNAの修復に関与する酵素の研究

参与修复自由基损伤 DNA 的酶的研究

• 批准号: 06280219
• 负责人: 関 周司
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06280219/
• 关键词: DNA修復酵素; APエンドヌクレアーゼ; DNA3′修復ジエステラーゼ; APEXヌクレアーゼ; dRpase様タンパク質; フリーラジカルDNA損傷; ferric nitrilotriacetate; ヒドロキシラジカル

細胞のDNAは、毎日多数損傷されており、その修復異常が突然変異、ひいては発がんにつながることが知られている。本研究は、損傷要因の主要なものの一つであるフリーラジカルで損傷されたDNAの修復に関与する酵素の研究を目的とした。ラジカル損傷DNAは、超らせんpUC18DNAをferric nitrilotriacetate(Fe^<3+>-NTA)-過酸化水素(H_2O_2)で処理して作成した。ラジカル消去剤を用いた実験で、このDNA損傷にはヒドロキシラジカルが関与していることを示唆した。測定可能で主要なDNA損傷として、3′block一本鎖切断と塩基欠落部位(APサイト)が誘導されたが、修復系をさらに単純化するためAPサイトの修復研究には酸で脱プリンしたAP-DNAを用いた。これら損傷DNAを、APEXヌクレアーゼ、DNAポリメラーゼβ、45kDa(または47kDa)タンパク質、DNAリガーゼ、4NTPs、ATP等とインキュベーションすることにより、Fe^<3+>-NTA-H_2O_2誘導一本鎖切断DNAの50%以上、AP-DNA上のAPサイトの殆ど全てが修復された。この修復系を解析した結果、APEXヌクレアーゼは3′blockを除きまたは5′APendonucleaseとしてプライミング作用を示し、45kDa(または47kDa)タンパク質は5′blockを除くことにより修復を可能にすることが示唆された。さらに、APEXヌクレアーゼと類似の性状を持つAP endonucleaseとして、別に30kDa酵素を同定し、部分アミノ酸配列を決定した。47kDa(dRpase様タンパク質)については部分アミノ酸配列を決め、当該cDNAのクローニングを試みている。この様に、フリーラジカル損傷DNAの修復に関与する酵素として、APEXヌクレアーゼ、30kDa酵素、dRpase様酵素(45kDaおよび47kDa)を同定して、さらに研究を進めている。

Every day, most of the time, the DNA, the day, the day and the day. In this study, the main reasons for the study are as follows: the purpose of the study is to improve the activity of enzymes in this study. Use DNA, supercritical pUC18DNA ferric nitrilotriacetate (Fe ^ & lt;3+>-NTA)-acidified water (H_2O_2) to make the product. Please tell me that you can tell me that you are instigated by using the following words: "DNA" and "instigation". It is possible to determine the main DNA, 3'block, cut off the missing parts of the base (AP), repair the system, modify the AP, study the acid, remove the acid, and use the AP-DNA. Please contact DNA, APEX, DNA, 45kDa (47kDa), DNA, 4NTPs, ATP, etc. A copy of the DNA is cut off more than 50%, and the AP is completely damaged on the AP-DNA. The correction is based on the analysis of the results, the APEX analysis, the 3'block analysis, the removal of the data from the 5 'APendonucleus 47kDa, the deletion of the 47kDa, the reduction of the error, the reduction of the error, and the possibility that the changes may be reported. The characters of "APEX" and "AP endonuclease" are similar to those of other 30kDa enzymes, and some of them are determined by acid alignment. 47kDa (dRpase equipment). In this section, the acid configuration is determined, and when the cDNA is configured, please do not know what to do. The determination of DNA enzyme, APEX enzyme enzyme, 30kDa enzyme and dRpase enzyme (45kDa enzyme enzyme 47kDa) was carried out in this paper.

项目成果

Akiyama,K.,他5名: "Cloning,sequence analysis and chromosomal assignment of the mouse Apex gene." GENOMICS. (in press). (1995)

Akiyama, K. 和其他 5 人：“小鼠 Apex 基因的克隆、序列分析和染色体分配”（正在出版）。

Hongo,A.,他3名: "A comparison of in vitro platinum-DNA adduct formation between carboplatin and cisplatin." Int.J.Biochem.26. 1009-1016 (1994)

Hongo, A. 和其他 3 人：“卡铂和顺铂之间体外铂-DNA 加合物形成的比较。Int.J.Biochem.26 (1994)。

Ono,Y.,他4名: "Stable expression in rat glioma cells of sense and antisense nucleic acids to a human multifunctional DNA repair enzyme,APEX nuclease." Mutation Research,DNA repair. 315. 55-63 (1994)

Ono, Y. 和其他 4 人：“人类多功能 DNA 修复酶 APEX 核酸酶的正义和反义核酸在大鼠神经胶质瘤细胞中的稳定表达。突变研究，DNA 修复”。

Akiyama,K.,他3名: "Structure,promoter analysis and chromosomal assignment of the human APEX gene." Biochim.Biophys.Acta. 1219. 15-25 (1994)

Akiyama, K. 和其他 3 人：“人类 APEX 基因的结构、启动子分析和染色体分配。”1219. 15-25 (1994)

Ono,Y.,他6名: "Developmental expression of APEX nuclease,a multifunctional DNA repair enzyme,in mouse brains." Developmental Brain Res.(in press). (1995)

Ono, Y. 和其他 6 人：“APEX 核酸酶（一种多功能 DNA 修复酶）在小鼠大脑中的发育表达”（发育大脑研究）（1995 年）。