P-糖蛋白質の関与しない多剤耐性の機構と、その克服方法の開発

不涉及P-糖蛋白的多药耐药机制的发展及其克服方法

• 批准号: 06282249
• 负责人: 秋山 伸一
• 金额: $ 2.62万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06282249/
• 关键词: 多剤耐性; MRP; トポイソメラーゼII; P-糖蛋白質

多くの抗癌剤に同時に耐性になった多剤耐性(MDR)癌細胞で過剰に発現するP-糖蛋白質が、エネルギー依存性の薬剤排出ポンプであることが明らかにされ、臨床での治療抵抗性腫瘍との関連性が報告されている。しかしながら、臨床でのMDRはP-糖蛋白質のみでは説明できないことが益々明瞭になってきた。さらに、P-糖蛋白質の発現が見られないにもかかわらずMDRの形質を獲得したヒト白血病細胞株(HL60/Adr)、肺小細胞癌株(H69AR)が分離されている。トポイソメラーゼIIの量的、質的変化によってMDR形質を獲得したatypical MDR細胞とは異なる交差耐性パターンを示す(ビンカアルカロイド系抗癌剤にも耐性である)これらの多剤耐性細胞はnon-P-glycoproteinmediated MDRと呼ばれ、その耐性機構の解明が競って行なわれはじめたところである。我々はP-糖蛋白質の関与しないMDRの機構を解明するために、ヒト癌KB細胞よりMDR克服薬剤であるセファランチン存在下に段階的に培地中のアドリアマイシンの濃度を上昇させ、アドリアマイシン耐性株(C-A90、C-A120、C-A500、CA-1)を分離した。さらにC-A500細胞より完全復帰変異株(CA-R)も分離した。C-A500はMDR形質を示したが、P-糖蛋白質は発現しておらず、200kDaの膜蛋白質の発現が増加していた。また、MDR-associated protein(MRP)遺伝子のmRNAが増加しており、MRP遺伝子の増幅が認められた。復帰変異株では200kDa蛋白質、MRPmRNAの発現、MRP遺伝子の増幅はともに認められなかった(Somat.Cell.Mol.Genet.,20,423-435,1994)。最近、JedlitschkyらはMRPが〔^3H〕ロイコトリエンC4(LTC4)でフォトラベルされることを見出した。我々もC-A120細胞から調整したmembrane vesicleが、KB-3-1細胞由来のmembrane vesicleより15倍も多くの〔^3H〕LTC4を取り込むことを確認し、この取り込みのほとんどがATP依存性の輸送によるものであることを明らかにした。

More く の anti-cancer tonic に に patience at the same time に な っ た tonic patience (MDR) cancer cells で so turning に 発 now す る P - sugar protein が, エ ネ ル ギ ー dependency の 薬 tonic discharge ポ ン プ で あ る こ と が Ming ら か に さ れ, clinical で の treatment resistance is swollen sores と の masato even sex が report さ れ て い る. し か し な が ら, clinical で の MDR は P - sugar protein の み で は illustrate で き な い こ と が yi 々 clear に な っ て き た. さ ら に, P - sugar protein の 発 が now see ら れ な い に も か か わ ら ず MDR の character を get し た ヒ ト leukemia cell line HL60 / Adr, small cell lung cancer (H69AR) strains が separation さ れ て い る. Youdaoplaceholder0 ソメラ ソメラ ゼ ゼII a quantitative and qualitative change によってMDR shape and quality を obtain た たatypical MDR cell と は different な る job patience パ タ ー ン を shown す (ビ ン カ ア ル カ ロ イ ド department anti-cancer tonic に も patience で あ る) こ れ ら の tonic は patience cells more non - P - glycoproteinmediated MDR と shout ば れ, そ の patience institutions の interpret が race っ て line な わ れ は じ め た と こ ろ で あ る. I 々 は P - sugar protein の masato and し な い MDR の institutions を interpret す る た め に, ヒ ト carcinoma KB cells よ り MDR overcome 薬 tonic で あ る セ フ ァ ラ ン チ ン presence に Duan Jie に training in の ア ド リ ア マ イ シ ン の concentration rising を さ せ, ア ド リ ア マ イ シ ン patience strains (C - A90, C - A120, C - A500 featured, CA - 1)を separate た. Youdaoplaceholder0 C-A500 cells よ よ complete 帰 variant strain (CA-R) よ isolation た た. C - A500 featured は MDR character を shown し た が, P - sugar protein は 発 now し て お ら ず, 200 kda の membrane protein の 発 now が raised し て い た. Youdaoplaceholder0, the が increase of 伝 mRNA of MDR-associated protein(MRP) が, the <s:1> increase of <s:1>, and the が increase of 伝 mrna of MRP が. After 帰 - different strains で は 200 kda protein, MRPmRNA の 発 now, MRP but 伝 の rights of は と も に recognize め ら れ な か っ た (Somat. Cell. Mol. Genet., 4), 20423-435199. Recently, Jedlitschky ら は MRP が [^ 3 h] ロ イ コ ト リ エ ン C4 (LTC4) で フ ォ ト ラ ベ ル さ れ る こ と を shows し た. I 々 た C-A120 cells ら ら adjust the <s:1> たmembrane vesicleが KB-3-1 cells origin the membrane Vesicle よ り 15 times more than も く の [^ 3 h] LTC4 を take り 込 む こ と を confirm し, こ の take り 込 み の ほ と ん ど が ATP dependency の conveying に よ る も の で あ る こ と を Ming ら か に し た.

项目成果

Fujii,R: "Adenosine triphosphate-dependent transport of leukotriene C4 by membrane vesicles prepared from cisplatin-resistant human epidermoid carcinoma tumor cells" J.Natl.Cancer Inst.86. 1781-1784 (1994)

Fujii,R：“由顺铂耐药的人表皮样癌肿瘤细胞制备的膜囊泡对白三烯 C4 的三磷酸腺苷依赖性转运”J.Natl.Cancer Inst.86。

Sumizawa,T.: "Non-P-glycoprotein-mediated multidrug resistant human KB cells selected in medium containing adriamycin,cepharanthine,and mezerein." Somat.Cell Mol.Genet.20. 423-435 (1994)

Sumizawa,T.：“在含有阿霉素、千金藤素和 mezerein 的培养基中选择的非 P-糖蛋白介导的多重耐药人 KB 细胞。”

Matsumoto,T.: "Effect of newly synthesized indole derivatives on multidrug resistance in human cancer cells." Anti-Cancer Drug Design. 9. 251-261 (1994)

Matsumoto,T.：“新合成的吲哚衍生物对人类癌细胞多药耐药性的影响。”

Saito,T.: "Cytotoxicity of recombinant Fab and Fv immunotoxins on adult T-cell leukemia lymph-node and blood cells in the presence of soluble interleukin-2 receptor." Cancer Res.54. 1059-1064 (1994)

Saito,T.：“在可溶性白细胞介素 2 受体存在的情况下，重组 Fab 和 Fv 免疫毒素对成人 T 细胞白血病淋巴结和血细胞的细胞毒性。”

Fujii,R: "An active efflux system for cisplatin in cisplatin-resistant human KB cells." Jpn.J.Cancer Res.85. 426-433 (1994)

Fujii,R：“顺铂耐药人 KB 细胞中顺铂的主动外排系统。”