DNA複製、修復系を標的とした治療法の開発

开发针对 DNA 复制和修复系统的治疗方法

• 批准号: 06283230
• 负责人: 花岡 文雄
• 金额: $ 16万
• 依托单位: Osaka University (1995)The Institute of Physical and Chemical Research (1994)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06283230/
• 关键词: DNA複製; DNA修復; 無細胞系; 阻害剤; 抗がん剤; サポニン; フォスファターゼ; スクリーニング

研究代表者と研究分担者は、DNA複製系及び修復系をターゲットとした新規抗がん剤の開発を目指して、以下に述べる研究を行なった。(1)前年度に引き続いて、既に確立されているSV40DNAの無細胞複製系、及び紫外線照射したSV40ミニ染色体を鋳型とする無細胞DNA修復系を用いて、100種ほどの放線菌培養上清から新たなDNA複製、及び修復阻害剤のスクリーニングを行なった。その結果、有意な阻害効果を示すサンプルを複数個、得ることが出来た。その中でDNA修復に阻害を示す4サンプルについて、DNAの損傷部位の上流および下流側に一本鎖切断を入れる反応を調べたところ、いずれもこの切断反応を阻害し、これらのサンプルがヌクレオチド除去修復反応の初期段階を阻害する活性を有していることが判明した。このステップの阻害剤は、これまで全く報告がなく、新規阻害剤の分離が期待される。(2)前年度までにDNA複製を強く阻害するものとして精製を行なっていたRK606については、構造決定の結果、大豆サポニンの一種、soyasaponin IIであることが判明した。類縁化合物のDNA複製阻害活性を比較したところ、アグリコン部分の他に、糖鎖の部分の構造も重要であること、また糖が3つ、分岐しない形で存在していると阻害活性が高いことが示された。DNA複製を阻害する化合物と、ワクシニアウイルスのdual-specific phosphatase,VH1フォスファターゼのヒトホモローグであるVHRフォスファターゼの阻害を示す化合物とが類似のスペクトルを示すことから、RK606の標的分子がフォスファターゼである可能性が示唆された。

Research representatives and research collaborators are responsible for the development of new DNA replication and repair systems. (1)In the past year, we have established a cell-free DNA repair system for SV40 DNA, and a cell-free DNA repair system for SV40 chromosomes under ultraviolet irradiation. We have also established a new DNA replication and repair inhibitor system for 100 strains of irradiated bacteria. The result is that there are several ways to prevent damage. In addition, it was found that the inhibition activity of DNA repair at the initial stage of DNA repair was affected by DNA damage at the upstream and downstream sides of DNA damage site, and the inhibition activity of DNA repair at the upstream and downstream sides of DNA damage site was affected by DNA damage site. This is the first time that a person has been subjected to such a procedure. (2)In the past year, DNA replication was strongly inhibited, and the purification process was carried out. RK606 was determined. The results of structure determination were identified. Soybean was identified as one kind of soybean. The DNA replication inhibition activity of these compounds was compared with that of other compounds, and the structure of sugar chains was important. DNA replication inhibition compounds, such as dual-specific phosphatase, VH1, VH2, VH3, VH4, VH5, VH6, VH7, VH8, VH9, VH9, V

项目成果

H.Kamiya: "8-Hydroxyadenine(7.8-dihydro-8-oxoadenine)induces misincorporation in in vitro DNA synthesis and mutation in NIH 3T3 cells" Nucl.Acods Res.23. 2893-2899 (1995)

H.Kamiya：“8-羟基腺嘌呤（7.8-二氢-8-氧化腺嘌呤）在 NIH 3T3 细胞的体外 DNA 合成和突变中诱导错误掺入”Nucl.Acods Res.23。

T.Shimamoto: "Expression and functional analysis of Dxpa sene the Drosophila homolog of human excision repair gene XPA" J.Biol.Chem.270. 22452-22459 (1995)

T.Shimamoto：“人切除修复基因 XPA 的果蝇同源物 Dxpa 的表达和功能分析”J.Biol.Chem.270。

Matsuda,T.et al.: "DNA repair protein XPA binds replication protein A" J.Biol.Chem.270. in press (1995)

Matsuda,T.et al.：“DNA 修复蛋白 XPA 结合复制蛋白 A”J.Biol.Chem.270。

Sugawara,K.et al.: "Human nucleotide excision repair protein complementing xeroderma pigmentosum group C" RIKEN rev.6. 47-48 (1994)

Sukawara,K.et al.：“补充着色性干皮病 C 组的人类核苷酸切除修复蛋白”RIKEN rev.6。

T.Eki: "Efficient replication of polyomavirus DNA in a cell-free system supplemented witl Escherichia coli singlo-stranaed DNA binding psotein which exhibits species-specificity in the rezuirement for DNA polymeined0primane" J.Biochem.118. 435-441 (1995)

T.Eki：“在补充了大肠杆菌单链 DNA 结合蛋白的无细胞系统中多瘤病毒 DNA 的高效复制，该蛋白在 DNA 多聚原烷的需求中表现出物种特异性”J.Biochem.118。