脂質部分の修飾糖脂質の発現とその意義の解明に関する研究

脂质部分中改性糖脂表达的研究及其意义的阐明

• 批准号: 07259213
• 负责人: 賀佐 伸省
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07259213/
• 关键词: グリオーマ; 糖脂質; ガングリオシド; NMR; アセチル化; セラミド; リポソーム

特定の糖脂質糖鎖を認識する抗腫瘍モノクローン抗体は正常細胞では染色能が低下するが、その原因の直接的な解明はなされていない。申請者らの研究では、ラットグリオーマ(RG-2)組織からCerのC-3水酸基がO-Ac化されたGM3(O-AcGM3)が全GM3量に対して35%の比率で検出されたことより、O-AcCerを持つ糖脂質の癌における発現の機序や免疫化学的性状を明らかにして、本糖脂質が上記現象をもたらす因子たることを証明することを目的とした。O-AcGM3構造は分解法による方法では解析不能であり、精製の初期から1D-NMRを用いてその検出を行い、完全解析は1D-,2D-NMRとFAB-MSおよびGC-MSによった。O-AcCerを持つ複合脂質はO-AcGM3以外本組織から検出されず、O-AcGM3はメラノーマ細胞では検出されなかったが、ヒトグリオーマ細胞では検出された。これらのことはCerのO-Ac化がグリオーマおよびGM3に特異的な修飾であることを伺わせるが、他の癌組織を更に精査する必要があろう。O-AcGM3の糖鎖抗体に対する免疫学的な反応性は、ELISA系や薄層クロマト上の免疫染色法では非修飾GM3と変わりはなかったが、O-AcGM3/GM3が35:65(本組織における組成とほぼ一致)の組成比を含むリポゾームに対する糖鎖抗体-補体のLysis系では、O-AcGM3やGM3単体を含むそれらより有為に抗体との反応性が亢進していた。この亢進は、膜中にあって糖鎖を担うAc化Cer分子がGM3and/or O-AcGM3分子のクラスター形成能の亢進等の免疫応答性を高める何らかの役割を担っている可能性を強く示唆する。G3CerのAc化物が酵素学的な産物の可能性をグリオーマ及び正常ラット脳でGM3に至る生合成中間体を受容体として検討した結果、H2Cerのみがグリオーマで酵素的にAc化を受けた。このことおよび本組織ではGM3以上の長鎖ガングリオ系糖脂質は検出されないことから、グリオーマで発現するO-AcGM3は直接GM3分子がAc化されるのではなく、その生合成中間体の上流側で既にAc化されたものが代謝されてGM3分子に蓄積した可能性が高い。

Anti-tumor antibodies to specific glycopolipid glycopolock proteins can directly explain the causes of decreased staining in normal cells. The applicant's research aimed to identify and demonstrate the mechanism of development of glycolipid cancer and immunochemical properties by determining the ratio of O-Acylation of Cer C-3 to GM3 (O-AcGM3) to total GM3 at 35%. O-AcGM3 structure decomposition method is used to analyze 1D-,2D-NMR, FAB-MS and GC-MS in the initial stage of purification. O-AcCer complex lipids are found in tissues other than O-AcGM3, and O-AcGM3 complex lipids are found in cells. The O-Ac of Cer is a special modification of GM3. It is necessary to examine other cancer tissues carefully. O-AcGM3 glycan lock antibody to the immune system, ELISA system, thin layer immunostaining method, non-modified GM3, O-AcGM3/GM3 = 35:65(the same tissue composition), composition ratio, glycan lock antibody-complement Lysis system, O-AcGM3 and GM3 units, hyperactive antibody and anti-GM3. The immune response of GM3 and/or O-AcGM3 molecules to hyperactivity, membrane glycogen lock, and other hyperactivity is high, and the possibility of enzyme binding is strong. The possibility of G3Cer's acylation is discussed in detail. The possibility of direct acylation of GM3 molecules by O-AcGM3 in the upstream side of synthetic intermediates is high.

项目成果

T.Kobayashi,K.Honke,S.Gasa,Y.Sagaet al.: "Enzymatic sulfation of gangliotriaosylceramide in human renal cancer cells." J.Biochem.117. 987-992 (1995)

T.Kobayashi、K.Honke、S.Gasa、Y.Sagaet al.：“人肾癌细胞中神经节三酰神经酰胺的酶促硫酸化。”

Y.Yachida,K.Tsuchihashi,S.Gasa: "Characterization of novel mono-O-acetylated GM3s containing 9-O-acetyl sialic acid and 6-O-acetyl galactose in equine eryt" Glycoconj.J.13. 1-9 (1996)

Y.Yachida，K.Tsuchihashi，S.Gasa：“马埃特中含有 9-O-乙酰基唾液酸和 6-O-乙酰基半乳糖的新型单-O-乙酰化 GM3 的表征”Glycoconj.J.13。

K.Suetake,K.Tsuchihashi,K.Inaba,M.Chiba et al: "Novel modification of ceramide:rat glioma ganglioside GM3 having 3-O-acetylated sphingenine." FEBS Letters. 361. 201-205 (1995)

K.Suetake、K.Tsuchihashi、K.Inaba、M.Chiba 等人：“神经酰胺的新型修饰：具有 3-O-乙酰化鞘氨醇的大鼠神经胶质瘤神经节苷脂 GM3”。

B.O.Choi,T.Yamaki,Y.Ibayashi,Y.Maeda,et al: "Interleukin 4 enhances ganglioside GD3 expression on the human fibroblast cell line WI-38." J.Biochem. 117. 315-320 (1995)

B.O.Choi、T.Yamaki、Y.Ibayashi、Y.Maeda 等人：“白细胞介素 4 增强人成纤维细胞系 WI-38 上的神经节苷脂 GD3 表达。”