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心筋細胞間の機能結合形成にいたる分子機構の発現過程にかんする研究

心肌细胞间功能连接形成分子机制表达过程研究

基本信息

批准号：
07266219
负责人：
柴田洋三郎
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

心臓の細胞間刺激伝導通路を構成するギャップ結合は、connexin蛋白六量体が細胞間隔で対合し親水性チャネルを形成する。構成蛋白Cxファミリーは心筋ではCx43、Cx40、Cx45が検出され、これらはそれぞれ45pS,170pS,25pSほどのunitary conductanceをしめす。本研究計画ではこれら各種Cxに対する特異的抗体およびcDNA probeを用いて、ラット心筋における分布と生後発達の経過を追跡した。成熟心筋における分布特異性:昨年の発表後さらに検索を進め、ラットでの分布をほぼ確定した。即ち洞房結節(SA node)では、Cx45が弱く発現し、心房筋ではCx43が主でCx45を伴う。房室結節AV nodeでは再びCx45のみで占められる。ヒス束(His bundle)は起始がCx45で、次第にCx40の標識が強まる。分枝(Bundle branch)はCx40が強く、Cx45とCx43も共存し、左右差はない。プルキンエ線維Purkinje fiberはCx40が主体でCx43も混在する。心室筋ではCx43が主体でCx40が混在する。心筋組織のRT-PCRではCx45、Cx40、Cx43のほか、血管内皮由来と思われるCx37が検出された。未知の新しいCxはこれまで検出できていない。生後変動:出生直後は、Cx40が心内膜側に強く、心外膜にむかうにつれて弱くなる傾向があった。Cx45も弱いながら同様の傾向を示した。一方Cx43は全層にほぼ均等な弱い点状の分布を示した。Western BlotでもCx40は強く広いbandを示した。Cx43は新生児では1本、成獣では2本のbandを泳動mobilityの異なる位置にみとめ、リン酸化状態が異なることを示唆する。Cx45は成獣・新生児ともに同様な標識をしめした。Northern Blotでは出生直後ではCx40が検出され、Cx43は1週間後から発現が強くなった。以上の結果から、出生直後のラット心筋では、Cx40がdominantなconnexinとなってギャップ結合が構成されていると推測された。

The cellular stimulatory pathway of the heart is composed of a connexin protein and a hydrophilic protein. Cx43, Cx40 and Cx45 are the core components of the Cx43, Cx43 and Cx45, respectively, and the unit conductivity is 45pS,170pS and 25pS. This study aims to track the distribution of Cx specific antibodies and cDNA probes. Distribution Specificity of Mature Tendons: The Distribution of Mature Tendons is Determined after the Development of Yesterday That is, SA node, Cx45 weak, atrial tendon, Cx43 main, Cx45. AV node His bundle starts with Cx45 and ends with Cx40. Bundle branch: Cx40, Cx45 Cx43,. Purkinje fiber is Cx40 and Cx43. Cx40 is mixed with Cx43. RT-PCR of cardiac muscle tissue detected Cx45, Cx40, Cx43 and Cx37. Unknown and new Cx is not available. Postnatal changes: Right after birth, Cx40 is strong on the endocardial side, and the epicardial side is weak. Cx45 is weak and tends to be the same. A square Cx43 is evenly distributed in the whole layer. Western Blot Cx43 is a new generation, and a new generation. Cx45 is a new generation. Northern Blot The above results show that Cx40 is the dominant connexin after birth.