心筋細胞間の結合形成にいたる分子機構の発現過程にかんする研究

心肌细胞间连接形成分子机制表达过程研究

• 批准号: 06274222
• 负责人: 柴田 洋三郎
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06274222/
• 关键词: 心筋; ギャップ結合; コネキシン; 介在板; プルキンエ線維; 洞房結節; 免疫標識; コンダクタンス

ギャップ結合の構成分子はコネキシン(Cx)と呼ばれ、一群のCx蛋白ファミリーが存在する。哺乳類心筋ではCx43が主体で、Northern blotではCx40、Cx45なども検出されている。本研究ではこれら異種ギャップ結合蛋白の心筋各種細胞での発現様態を解析するために、特異的な抗体を作成してその分布局在を調べた。◎方法:cDNAより得られたアミノ酸配列から、Cx43、Cx40、Cx45、の各々に特異的なペプチド配列(Cx43:107-119、Cx40:333-345、Cx45:385-396)にたいするウサギ抗血清を作成し、ラットとモルモット成獣の心臓凍結切片の免疫蛍光染色と免疫ブロット・RNAブロットなどによって発現を解析した。◎結果:心筋全体でCx43が免疫染色・免疫ブロットともに強く発現しており、とくに作業心筋の介在板部に特徴的に分布していた。しかしCx40やCx45も弱いながら作業筋でもCx43と重なって発現し、介在板でこれら3種のコネキシンが混在してギャップ結合を構成することが判明した。一方、房室束やブルキンエ線維などの刺激伝導系では、Cx43よりもむしろCx40が強く認められた。またラット・モルモットとも心房の洞房結節領域に、3種抗体のいずれによっても標識されない部分が認められ、その周辺域にはCx45の介在を認めた。◎結語:免疫標識により、作業心筋では3種のコネキシン蛋白が介在板で混在し、また特殊心筋ではギャップ結合の蛋白構成比が異なることが判明した。コンダクタンスはCx43:40-50pS、Cx40:160-195pS、Cx45:20-35pSであり、また電位依存特性も大きく異なっている。今後、これら各種のコネキシン分布の心筋機能に於ける意義、および発生分化過程における発現調節機構を明らかにするとともに、洞房結節に分布するコネキシンの同定をすすめていきたい。

Youdaoplaceholder0 binds to the <s:1> constituent molecule コネキシ コネキシ コネキシ (Cx)と hu ばれ, and a group of <s:1> Cx proteins ファ リ リ が が exist in する. Mammalian cardiac tendons で る Cx43が main body で, Northern blotで <e:1> Cx40, Cx45な <s:1> 検 検 検 検 されて る. This study で は こ れ ら heterogeneous ギ ャ ッ プ binding protein の heart muscle various cell で の 発 presently others state を parsing す る た め に, specific antibody を な し て そ の distribution bureau in を adjustable べ た. Does methods: cDNA よ り must ら れ た ア ミ ノ acid with column か ら, Cx43, Cx40 and Cx45, の 々 に specific な ペ プ チ ド match column (Cx43:107-119, Cx40:333-345, Cx45:385-396) に た い す る ウ サ ギ antiserum を し, consummate ラ ッ ト と モ ル モ ッ ト into 獣 の Cardiac frozen section immunoassay 蛍 photostaining と immunoassay ブロット · RNAブロットな によって によって occurrence を analysis た When results: heart muscle all で Cx43 が immune dyeing, ブ ロ ッ ト と も に strong く 発 now し て お り, と く に homework heart muscle の interface in the plate department に に distribution of 徴 し て い た. し か し Cx40 や Cx45 も weak い な が ら homework reinforcement で も Cx43 と heavy な っ て 発 し, lie in the plate で こ れ ら three の コ ネ キ シ ン が mixed し て ギ ャ ッ プ combining を constitute す る こ と が.at し た. Party, atrioventricular bundle や ブ ル キ ン エ line d な ど の stimulus 伝 guide system で は, Cx43 よ り も む し ろ Cx40 が strong く recognize め ら れ た. ま た ラ ッ ト · モ ル モ ッ ト と も atrial の に bridal chamber nodules field, three kinds of antibody の い ず れ に よ っ て も logo さ れ な い part が recognize め ら れ, そ の weeks 辺 domain に は Cx45 の interface at を め た. When conclusion: immune identification に よ り, homework heart muscle で は three の コ ネ キ シ ン protein が interface in plate で mix in し, ま た special heart muscle で は ギ ャ ッ プ combining の protein composition than が different な る こ と が.at し た. コ ン ダ ク タ ン ス は Cx43:40-50 ps, Cx40:160-195 ps, Cx45:20-35 ps で あ り, ま た potential dependent features large も き く different な っ て い る. In the future, こ れ ら various の コ ネ キ シ の ン distribution function of heart muscle に in け る significance, お よ び 発 raw differentiation に お け る 発 now adjusting mechanism を Ming ら か に す る と と も に, bridal chamber nodules に す る コ ネ キ シ ン の with fixed を す す め て い き た い.

项目成果

Kuraoka,A: "Characterization of isolated guinea pig liver gap junction." Prog-Cell Res.4. 111-114 (1994)

Kuraoka，A：“离体豚鼠肝脏间隙连接的表征。”