嗅覚記憶を制御する遺伝子のクローニングと機能解析

点击翻译按钮获取中文摘要

マウスの鋤鼻器-副嗅球系で成立するフェロモンに対する記憶の系は、記憶を担っている部位がはっきりしていること、個体レベルで解析を行なうことができることから記憶のメカニズムの探索に優れた系である。フェロモンの記憶は、30-50日間保持され、記憶の誘導には新規のタンパク合成が必要である。従って、本研究において我々はフェロモン記憶の誘導時に副嗅球において、シナプスの可塑的変化の維持に関与する遺伝子の同定を試みた。雌マウスをmatingさせたあと、フェロモン刺激として雄マウスの尿の匂いをかがせ、雌マウスにフェロモンの記憶を誘導する。その後、30分-6時間の適当な時間に副嗅球を取り出し、RNAを抽出しcDNAを合成して、フェロモンに暴露しないコントロールの雌マウスから取り出した副嗅球のRNAとサブトラクションを行ない、フェロモンの記憶を誘導することによって増加する遺伝子、又は減少する遺伝子を同定する。同定したcDNAの遺伝子産物の機能を、阻害剤、中和抗体、アンチセンスオリゴヌクレオチドなどを副嗅球に直接注入することで抑制し、個体レベルで遺伝子産物がフェロモンの記憶に対してどのような影響を及ぼすかを解析する。このような手法で同定した遺伝子がシナプスの可塑的変化を制御し、記憶を制御することを示す計画である。現在、サブトラクション法で複数の候補のクローニングに成功しており、それらを解析中である。