血球幹細胞の増殖・分化における転写因子PEBP2の機能

转录因子PEBP2在血细胞干细胞增殖分化中的作用

• 批准号: 08261201
• 负责人: 佐竹 正延
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08261201/
• 关键词: 急性骨髄性白血病; プロトオンコロジー; PEBP2β; 転写因子; 造血幹細胞; ジーン・ターゲティング

我々はこれまでに、DNA結合能を有するαサブユニット、及びαとヘテロダイマーを形成しそのDNA結合能を促進するβサブユニットの、2つのサブユニットから成る新しい転写因子PEBP2について、それらをコードするマウス遺伝子を単離し、その構造・機能を解析してきた。一方ヒト急性骨髄性白血病(AML)のM4型でみられる、inv16 (p13q22)の転座点には、キメラ遺伝子PEBP2β/SMMHCが形成されることから、PEBP2β遺伝子がAMLのプロトオンコジンであるとの性格づけがなされた。本研究はPEBP2β遺伝子の機能を破壊した。ターゲティング・マウスの表現型を解析することにより、血球幹細胞の増殖・分化におけるPEBP2転写因子の機能を明らかにする目的で行われた。先ずPEBP2β蛋白の翻訳開始Metコドンを含む、第1エクソンを欠失させた相同組換えES細胞クローンを得た。ES細胞をマウス初期胚に戻しキメラ・マウスを、さらにPEBP2β(+/-)のヘテロマウスを得る事ができた。ヘテロマウスは特に異常なく発生し成長した。一方PEBP2β(-/-)のホモ個体は脳室内への出血を伴い、12.5日令で胎生致死となる。またプリミティブな赤血球は認められるが、肝におけるデフイニテイブな造血像は殆ど認められない。肝造血の欠如は、肝組織切片のHE染色標本・肝組織スタンプ・スミアのMG染色標本で何れの系統の血球をも認めないことから明らかである。また12.5日令のPEBP2β(-/-)肝より細胞を採取し、デフイニテイブな造血を促す栄養条件下でin vitroのコロニー形成法を行っても、赤血球系・骨髄球系・混合型の何れのコロニーをも検出できなかった。以上の観察はPEBP2β遺伝子が、おそらくは造血幹細胞のレベルで、その発生・増殖・分化に必須の遺伝子として働いていることを示唆している。PEBP2転写因子のαサブユニットをコードするAML1遺伝子欠損個体もまた、類似の表現型を示すことが報告されている。デフイニテイブな造血の発生において、PEBP2転写因子のα・βサブユニットは必須かつ等価の機能を果たしていると考えられる。

I 々 は こ れ ま で に, DNA binding energy を have す る alpha サ ブ ユ ニ ッ ト and び alpha と ヘ テ ロ ダ イ マ ー を form し そ の DNA binding energy を promote す る beta サ ブ ユ ニ ッ ト の, 2 つ の サ ブ ユ ニ ッ ト か ら into new し る い planning write factor PEBP2 に つ い て, そ れ ら を コ ー ド す る マ ウ ス heritage 伝 son を 単 し, そ の construction machine Be able to を parse て た た た. Party ヒ ト acute bone marrow leukemia (AML) の the M4 で み ら れ る, inv16 (p13q22) の planning mount points に は, キ メ ラ heritage 伝 son PEBP2 beta/SMMHC が form さ れ る こ と か ら, PEBP2 beta but 伝 が AML の プ ロ ト オ ン コ ジ ン で あ る と の character づ け が な さ れ た. In this study, the function of the 伝 offspring of <s:1> PEBP2β is を disrupted by 壊 <s:1> た. タ ー ゲ テ ィ ン グ · マ ウ ス の phenotype を parsing す る こ と に よ り の raised colonization, blood stem cells, differentiation に お け る PEBP2 planning write function of factor の を Ming ら か に す る purpose line で わ れ た. First ず PEBP2 beta protein の 訳 start Met コ ド ン を む, 1 エ ク ソ ン を owe lost さ せ た in same group え ES cells ク ロ ー ン を た. ES cells を マ ウ ス early embryo に 戻 し キ メ ラ · マ ウ ス を, さ ら に PEBP2 beta (+ / -) の ヘ テ ロ マ ウ ス を る is が で き た. Youdaoplaceholder0, ウス, ウス, に, abnormal なく, occurrence, growth, <s:1>, た. An individual with PEBP2β(-/-) ホモ has 脳 脳 intravenical へ hemorrhage を accompanied by ホモ, which causes で fetal death となる on 12.5 days. Youdaoplaceholder0 またプリ ティブな red blood cells <s:1> recognize められるが, liver におけるデフ ニテ ブな ブな ブな hematopoietic image almost <e:1> recognize められな められな. Liver hematopoietic の owe such as は, liver biopsy の HE stained specimens, liver tissue ス タ ン プ · ス ミ ア の MG stained specimens で what れ の system の blood を も recognize め な い こ と か ら Ming ら か で あ る. ま た 12.5 days for の PEBP2 beta (- / -) liver よ り cells を し, デ フ イ ニ テ イ ブ な hematopoietic を promote す tech students.their ownship raise で under the condition of in vitro の コ ロ ニ ー forming method of line を っ て も, red blood cell, bone marrow ball series, hybrid の what れ の コ ロ ニ ー を も 検 out で き な か っ た. Above の 観 examine は PEBP2 beta heritage 伝 が, お そ ら く は hematopoietic stem cells の レ ベ ル で, そ の 発 born, raised colonization, differentiation に must の heritage 伝 son と し て 働 い て い る こ と を in stopping し て い る. の PEBP2 planning write factor alpha サ ブ ユ ニ ッ ト を コ ー ド す る traces of AML1 伝 son owe damage of individual も ま た, similar phenotypes の を shown す こ と が report さ れ て い る. デ フ イ ニ テ イ ブ な hematopoietic の 発 raw に お い て, PEBP2 の planning write factor alpha, beta, サ ブ ユ ニ ッ ト は must か つ etc 価 の function を fruit た し て い る と exam え ら れ る.

项目成果

Chiba, N.: "Differentiation dependent expression and distinct subcellular localization of the protooncogene product, PEBP2β/CBFβ, in muscle development." Onocogene. in press.

Chiba, N.：“原癌基因产物 PEBP2β/CBFβ 在肌肉发育中的分化依赖性表达和独特的亚细胞定位”。

Fujioka, M.: "Runt domain partner proteins enhance DNA binding and transcriptional repression in cultured Drosophila cells." Genes to Cells. 1 (8). 741-754 (1996)

Fujioka, M.：“Runt 结构域伴侣蛋白增强了培养的果蝇细胞中的 DNA 结合和转录抑制。”

Niki, M.: "Hematopoiesis in the fetal liver is impaired by targeted mutagenesis of a gene encoding a non-DNA binding subunit of the transcription factor, PEBP2/CBF." Proc. Natl. Acad. Sci. USA. in press.

Niki, M.：“编码转录因子 PEBP2/CBF 的非 DNA 结合亚基的基因的定向诱变会损害胎儿肝脏的造血功能。”