血球幹細胞の増殖・分化における転写因子PEBP2の機能

转录因子PEBP2在血细胞干细胞增殖分化中的作用

• 批准号: 08261201
• 负责人: 佐竹 正延
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08261201/
• 关键词: 急性骨髄性白血病; プロトオンコロジー; PEBP2β; 転写因子; 造血幹細胞; ジーン・ターゲティング

我々はこれまでに、DNA結合能を有するαサブユニット、及びαとヘテロダイマーを形成しそのDNA結合能を促進するβサブユニットの、2つのサブユニットから成る新しい転写因子PEBP2について、それらをコードするマウス遺伝子を単離し、その構造・機能を解析してきた。一方ヒト急性骨髄性白血病(AML)のM4型でみられる、inv16 (p13q22)の転座点には、キメラ遺伝子PEBP2β/SMMHCが形成されることから、PEBP2β遺伝子がAMLのプロトオンコジンであるとの性格づけがなされた。本研究はPEBP2β遺伝子の機能を破壊した。ターゲティング・マウスの表現型を解析することにより、血球幹細胞の増殖・分化におけるPEBP2転写因子の機能を明らかにする目的で行われた。先ずPEBP2β蛋白の翻訳開始Metコドンを含む、第1エクソンを欠失させた相同組換えES細胞クローンを得た。ES細胞をマウス初期胚に戻しキメラ・マウスを、さらにPEBP2β(+/-)のヘテロマウスを得る事ができた。ヘテロマウスは特に異常なく発生し成長した。一方PEBP2β(-/-)のホモ個体は脳室内への出血を伴い、12.5日令で胎生致死となる。またプリミティブな赤血球は認められるが、肝におけるデフイニテイブな造血像は殆ど認められない。肝造血の欠如は、肝組織切片のHE染色標本・肝組織スタンプ・スミアのMG染色標本で何れの系統の血球をも認めないことから明らかである。また12.5日令のPEBP2β(-/-)肝より細胞を採取し、デフイニテイブな造血を促す栄養条件下でin vitroのコロニー形成法を行っても、赤血球系・骨髄球系・混合型の何れのコロニーをも検出できなかった。以上の観察はPEBP2β遺伝子が、おそらくは造血幹細胞のレベルで、その発生・増殖・分化に必須の遺伝子として働いていることを示唆している。PEBP2転写因子のαサブユニットをコードするAML1遺伝子欠損個体もまた、類似の表現型を示すことが報告されている。デフイニテイブな造血の発生において、PEBP2転写因子のα・βサブユニットは必須かつ等価の機能を果たしていると考えられる。

々はこれまでに、DNA binding energyするαサブユニット、和びαとヘテロダイマーを Formation しそのDNA binding energy を Promotion するβサブユニットの, 2つのサブユニットから成る新しい転WRITE FACTOR PEBP2について、それらをコードするマウス伝子を単利し、そのstructure・FUNCTIONをANALYSISしてきた. Acute osteomyelotic leukemia (AML) type M4, inv16 (p13q22)の転点には、キメラ缝子PEBP2β/SMMHCが成されることから、PEBP2β伝子がAMLのプロトオンコジンであるとのcharacter づけがなされた. In this study, the functional properties of PEBP2β were determined. Analysis of phenotype of ターゲティング・マウスのをすることにより, proliferation of blood cell stem cells・The function of the differentiation factor PEBP2 is the same as the purpose of the differentiation. First, the PEBP2β protein was translated into Met cells, and then the same group was converted into ES cells. ES cells are used for early stage embryos, such as PEBP2β(+/-) and PEBP2β(+/-).ヘテロマウスは特に abnormal なく発生しgrowth した. One of the PEBP2β(-/-) individuals suffered from indoor bleeding and fetal death on 12.5 days.またプリミティブなerythroblast は cognize められるが, liver におけるデフイニテイブなhematopoietic image はど cognize められない. HE staining of liver hematopoiesis, liver tissue sections, HE staining specimens, liver tissue staining specimens, and MG staining specimens. PEBP2β(-/-) liver cells were harvested on 12.5th day of the month, and the hematopoiesis-promoting conditions were maintained in In vitro のコロニーformation method を行ても, red blood cell system, bone ball system, mixed type のれのコロニーをも検出できなかった. The above observation shows that PEBP2β is a genetic material that contains hematopoietic stem cells. It is necessary for growth, reproduction, and differentiation to be carried out. PEBP2 転WRITE FACTOR のα サブユニットをコードするAML1 伝子杝子杝子综合 もまた、similar phenotypic をshow すことがreport されている.デフイニテイブなHematopoietic の発生において, PEBP2転WRriting factor のα・βサブユニットはmustかつequivalent価のfunctionをfruitたしていると考えられる.

项目成果

Chiba, N.: "Differentiation dependent expression and distinct subcellular localization of the protooncogene product, PEBP2β/CBFβ, in muscle development." Onocogene. in press.

Chiba, N.：“原癌基因产物 PEBP2β/CBFβ 在肌肉发育中的分化依赖性表达和独特的亚细胞定位”。

Fujioka, M.: "Runt domain partner proteins enhance DNA binding and transcriptional repression in cultured Drosophila cells." Genes to Cells. 1 (8). 741-754 (1996)

Fujioka, M.：“Runt 结构域伴侣蛋白增强了培养的果蝇细胞中的 DNA 结合和转录抑制。”

Niki, M.: "Hematopoiesis in the fetal liver is impaired by targeted mutagenesis of a gene encoding a non-DNA binding subunit of the transcription factor, PEBP2/CBF." Proc. Natl. Acad. Sci. USA. in press.

Niki, M.：“编码转录因子 PEBP2/CBF 的非 DNA 结合亚基的基因的定向诱变会损害胎儿肝脏的造血功能。”