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シナプス形成・制御分子の解析

突触形成/调节分子分析

基本信息

批准号：
08271222
负责人：
葛西道生
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

神経軸索の伸長とシナプス形成は神経回路網形成の最も重要な過程であり、我々はこの発生過程の現象とシナプスの可塑的変化の間に共通のメカニズムがあるものと考えている。本研究では、シナプス形成過程の解析からこの仮説と支持する結果を得、シナプス可塑性を制御する分子の存在を明らかにした。我々の開発した培養系においては、胚令等価日数13〜17の間にシナプス形成が完了し、シナプス入力・頻度が上昇する。この過程の制御機構を解明するため、異胚令培養系を用い、このシナプス形成のシンプス後細胞依存性を解析した。その結果、シナプス形成には後細胞の何らかの成熟が必要であることが明らかになった。さらに個々のシナプス電流の波形を詳細に検討した結果、この培養系で観察されるシナプスはA/K型グルタミン酸受容体とNMDA型グルタミン酸受容体の両者を含むデュアルコンポーネントシナプスであることが分かった。さらに微小シナプス後電流の波形解析から、個々のシナプス部位に両受容体を含むことも明らかになった。この両受容体の発生過程での挙動を解析すると、興味深いことに、A/K型グルタミン酸受容体が組み込まれる前の胚令等価日数11においてもNMDA型グルタミン酸受容体がシナプス部位に組み込まれ適当な入力があれば機能しうることを発見した。昨年報告した新しい神経突起伸長活性を有する蛋白質は培養系に添加して神経細胞に作用するため、細胞の外側から作用する因子である。しかし、この遺伝子の全長をクローニングしてもシグナル配列は認められなかった。そこで我々はCOS細胞の形質転換を行いこの遺伝子を導入した。1日培養後の培養液を解析すると、この遺伝子産物が培養液中に放出されており、この因子が細胞外で作用できることを抗体を用いて確認した。

The elongation of the axons is the most important process in the formation of the neural network. This study provides insight into the molecular mechanisms underlying the formation and control of plasticity. The number of days between 13 and 17 for the development of the culture system was increased. The control mechanism of this process is explained, and the cell dependence of the culture system is analyzed. The result is that the cells are mature and mature. The waveform of each cell current was analyzed in detail. The results showed that the culture system was characterized by A/K-type cell acid receptor and NMDA-type cell acid receptor, and the results showed that the A/K-type cell acid receptor and NMDA-type cell acid receptor were different. The waveform analysis of the current after the minute drop includes the following: A/K type acid receptor is composed of 11 different parts of NMDA type acid receptor. A new study was conducted last year to investigate the effects of protein on cell growth in cultured cells. The whole length of the seed is divided into two parts. The cell quality of COS cells was changed during the process of gene transfer. 1 day after culture, the culture medium was analyzed, the gene products were released into the culture medium, and the extracellular effects of the factors were confirmed by antibodies.