大脳体性感覚野において触覚刺激に依存した発現をするプロテオグリカンの構造と機能

蛋白多糖的结构和功能，其表达依赖于大脑体感皮层的触觉刺激

基本信息

批准号：
08271248
负责人：
大平敦彦
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Institute for Developmental Research, Aichi Human Service Center
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ニューログリカンC(NGC)は、私達が神経回路網形成期のラット脳において発見した新奇な膜貫通型コンドロイチン硫酸プロテオグリカンである。大脳体性感覚野に存在するバレル構造の形成過程において、視床皮質線維からの入力が開始する時期に一致して、NGCがバレルの内腔から消失していくことから、NGCの発現は神経活動に依存していると考えられる。本研究の目的は、NGCの構造と機能を解明することにより、神経回路形成の分子機構の一断面を明らかにすることである。本年度の成果は、次の通りである。1.抗ラットNGCポリクローナル抗体の作製:ラットNGCコア蛋白の細胞外コンドロイチン硫酸結合領域と細胞内領域を、それぞれ大腸菌に合成させ、それをウサギに免疫した。Western blot分析により、いずれの抗血清も、ラット以外に、ニワトリ、マウス、ネコ、サルおよびヒトの脳ホモジェネート中のNGC相当分子を認識した。2.NGCコア蛋白のリン酸化:リコンビナントNGCコア蛋白の細胞内領域は、ラット脳由来のCキナーゼ(Boehringer)により効率よくリン酸化されたが、カゼインキナーゼII(Boehringer)ではリン酸化されなかった。逆に、コンドロイチン硫酸結合領域は、カゼインキナーゼIIによりリン酸化された。3.ヒトNGC遺伝子のクローニングと染色体座の決定:ヒトNGCは、塩基配列とアミノ酸配列のいずれにおいても、ラットNGCと約83%の相同性を示した。また、NGCの特徴的な構造は両者で完全に保存されていたことから、NGCは発達期の脳における基本的な機能に関わっていると考えられる。なお、NGCの染色体座は、FISH法により3p21.3と決定された。

Neuroglycan C（NGC）是一种新型的跨膜型软骨素硫酸软骨素蛋白聚糖，我们在神经网络形成的大脑中发现。在形成脑体感应区域中存在的枪管结构的过程中，NGC在枪管腔中消失了，与丘脑皮质纤维的输入开始时，NGC的表达依赖于神经活性。这项研究的目的是通过阐明NGC的结构和功能来阐明神经回路形成的分子机制的横截面。今年的结果如下：1。抗RAT NGC多克隆抗体的制备：在大肠杆菌中合成大鼠NGC核心蛋白的细胞外软骨素硫酸盐结合区域和大鼠NGC核心蛋白的细胞内区域，兔子被免疫。蛋白质印迹分析表明，两种抗血清都识别鸡，小鼠，猫，猴子和人类，甜菜，甜菜，甜菜，猴子和人类的脑匀浆中NGC等效分子。 2。NGC核心蛋白的磷酸化：重组NGC核心蛋白的细胞内区域通过大鼠脑的C激酶（Boehringer）有效地磷酸化，而不是通过酪蛋白激酶II（Boehringer）磷酸化。相反，酪蛋白激酶II磷酸化硫酸软骨素的结合区域。 3。人NGC基因的克隆并确定染色体基因座：人NGC在碱基和氨基酸序列中均与大鼠NGC同源约83％。此外，由于NGC的独特结构在两者中都是完全保守的，因此人们认为NGC在发育过程中参与了大脑的基本功能。 NGC的染色体基因座通过鱼方法确定为3p21.3。