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脳由来コンドロイチン硫酸プロテオグリカンによる神経突起形成の制御

脑源性硫酸软骨素蛋白聚糖控制神经突形成

基本信息

批准号：
02220223
负责人：
大平敦彦
金额：
$ 0.83万
依托单位：
Institute for Developmental Research, Aichi Human Service Center
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

脳の発達過程において、神経芽細胞が神経突起を伸長し、神経回路網を形成する段階は極めて重要である。分化途上の脳の細胞間隙に存在するコンドロイチン硫酸プロテオグリカン(CSPG)群は、この突起伸展を制御している分子のひとつと考えられる。生後10日のラット脳には、リン酸緩衝塩溶液により可溶化される、少なくとも5種類のCSPGsが存在する。このうち、分子量250kDaのコア蛋白質を持つCSPG(CSPGー250)は、生後のラット脳に、常に一定量存在することが分かった。CSPGー220は、出生直後の脳のCSPGの主成分であるが、発達に伴い急速に減少し、生後30日には検出できなくなった。逆に、CSPGー150は、出生直後から10日にかけて、急激に増加し、成獣脳の主なCSPGとなった。可溶性CSPGsが神経突起の伸長に及ぼす効果を調べるため、培養皿の表面をいろいろな濃度のCSPG溶液で処理し、その上で、胎生16日のラット脳から調製した神経芽細胞を培養した。CSPGsは、濃度依存性に神経突起伸長を促進した。この突起伸展を促進する活性は、おもにコア蛋白質側にあることも明らかとなった。どのCSPG分子種が、突起伸展を促進する活性を持つのかを調べるためには、個々のCSPGを単離する必要がある。そこで、CSPG混合物を抗原として、個々のCSPGコア蛋白質に特異性を持つモノクロ-ナル抗体を作製し、それを利用して、CSPGの単離を行うことにした。これまでに作製したモノクロ-ナル抗体のなかに、CSPGー220とCSPGー150とを認識するものがあった。脳の発達過程において、全く逆の発現様式を示すCSPGー220とCSPGー150が、同一の抗体で認識されることは、興味深い。現在、これらの抗体を産生するハイブリド-マを用いて、腹水からの抗体の調製を計画している。そして、免疫アフィニティ-法により、個々のCSPGを単離する予定である。

The stages of neurogenesis, and neurogenesis are extremely important. The molecular structure of CSPG (CSPG) group, which controls the extension of CSPG, is studied in the study of the existence of CSPG in the intercellular space during differentiation. 5 kinds of CSPGs were found in the 10 th day after birth. CSPG(CSPG-250) is a protein with a molecular weight of 250kDa that is present in a certain amount after birth. CSPG-220 is the main component of CSPG after birth. It decreases rapidly after birth. It appears after 30 days. Reverse, CSPG-150, birth straight after 10 days, emergency increase, into the main CSPG Soluble CSPGs were cultured in vitro at different concentrations on the surface of culture dishes. CSPGs are concentration-dependent and promote neurite elongation. The protein side of the protein is stimulated by the extension of the protein. It is necessary to maintain and regulate the activity of CSPG molecules and promote the extension of protrusions, but also to separate individual CSPGs. Now, CSPG mixtures are used as antigens, and specific antibodies to individual CSPG proteins are made and utilized, and CSPG is isolated. This is the first time that we've seen the difference between CSPG 220 and CSPG 150. CSPG-220 and CSPG-150 are the same antibodies. Now, the antibody production process, the antibody modulation process, the ascites modulation process. CSPG is a pre-determined method of immunity.