アルツハイマー病「プロテオグリカン仮説」の検証:老化脳のプロテオグリカン

验证阿尔茨海默病的“蛋白多糖假说”：衰老大脑中的蛋白多糖

基本信息

批准号：
04268221
负责人：
大平敦彦
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Institute for Developmental Research, Aichi Human Service Center
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の目的は、脳に存在するプロテオグリカン(PG)やその多糖側鎖であるグリコサミノグリカン(GAG)が、アルツハイマー病の脳内蓄積物質の形成に、どのような役割を果たしているのかを調べることである。アルツハイマー脳においては、PG/GAGの構造および組成における加齢変化に異常が起きていることが予想される。そこで、まず、生後1週より2年までのラット脳を用い、正常加齢に伴う脳内GAG組成の変化を調べた。いずれの年齢においても、脳にはコンドロイチン硫酸(CS)、ヘパラン硫酸(HS)、ヒアルロン酸(HA)が存在することが分かった。3者の相対量には、著変はみられなかった。アルツハイマー脳2例と対照脳3例について、GAGの量と組成を調べた。GAGの総量は、アルツハイマー脳でわずかに高い傾向が得られた。ヒト老化脳には、ラットでみられた3つのGAG以外に、微量のデルマタン硫酸が検出される試料があったが、アルツハイマー脳特有の現象ではなかった。また、アルツハイマー脳では、ヘパラン硫酸の総量が減少している傾向が認められた。現在、CSおよびHSの繰返2糖組成を、HPLCにより測定している。ラット脳における可溶性PG組成の加齢変化を調べたところ、幼若脳の主成分であった220kDaのコア蛋白を持つコンドロイチン硫酸プロテオグリカン(CSPG-220)が成熟脳では消失していること、かわってCSPG-93が増加していることなどがわかった。これらのPG/GAGを認識するモノクローナル抗体の作製を行っているが、対応するヒトの脳のPG/GAGを認識する抗体は有用である。2H6と名づけた抗体は、成獣ラット脳およびヒト対照脳の一部の領域に存在するCSを認識することが明らかとなった。今後、この抗体が認識するCSのアルツハイマー脳における量や存在について調べる予定である。

这项研究的目的是研究脑中存在的蛋白聚糖（PG）（PG）和糖胺聚糖（GAGS），它们是它们的多糖侧链，在阿尔茨海默氏病中形成大脑积累物质中。可以预期，在阿尔茨海默氏症的大脑中，PG/GAG结构和组成的年龄相关变化异常。因此，我们首先使用大鼠大脑在1周至2岁之间，以正常衰老的形式检查脑堵嘴组成的变化。在所有年龄段的人中，都发现大脑中存在硫酸软骨（CS），硫酸乙酰肝素（HS）和透明质酸（HA）。这三个的相对量没有显着变化。在两个阿尔茨海默氏症的大脑病例和三个对照脑病例中检查了插科打术的数量和组成。在阿尔茨海默氏症的大脑中，插科打的总量往往略高。在人类衰老的大脑中，有一些样品，除了在大鼠中看到的三个插口外，还检测到痕量的硫酸皮肤硫酸盐，但这并不是阿尔茨海默氏症大脑所特有的现象。此外，硫酸乙酰肝素的总量趋于减少阿尔茨海默氏症的大脑。当前，通过HPLC测量CS和HS的重复二糖组成。当我们研究大鼠大脑中与年龄相关的可溶性PG组成的变化时，我们发现硫酸软骨素蛋白聚糖（CSPG-220）具有220 kDa的幼年大脑的核心蛋白，在成熟的大脑中消失了，而CSPG-93则消失了。尽管我们一直在制造识别这些PG/gags的单克隆抗体，但识别人脑的相应PG/GAG的抗体很有用。发现该抗体称为2H6，可以识别出在成年大鼠大脑和人类对照大脑的某些区域中存在的CS。将来，我们将研究这种抗体在阿尔茨海默氏症大脑中识别的CS的数量和存在。