血球幹細胞の増殖・分化における転写因子PEBP2の機能

转录因子PEBP2在血细胞干细胞增殖分化中的作用

• 批准号: 08261201
• 负责人: 佐竹 正延
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08261201/
• 关键词: 急性骨髄性白血病; プロトオンコロジー; PEBP2β; 転写因子; 造血幹細胞; ジーン・ターゲティング

我々はこれまでに、DNA結合能を有するαサブユニット、及びαとヘテロダイマーを形成しそのDNA結合能を促進するβサブユニットの、2つのサブユニットから成る新しい転写因子PEBP2について、それらをコードするマウス遺伝子を単離し、その構造・機能を解析してきた。一方ヒト急性骨髄性白血病(AML)のM4型でみられる、inv16 (p13q22)の転座点には、キメラ遺伝子PEBP2β/SMMHCが形成されることから、PEBP2β遺伝子がAMLのプロトオンコジンであるとの性格づけがなされた。本研究はPEBP2β遺伝子の機能を破壊した。ターゲティング・マウスの表現型を解析することにより、血球幹細胞の増殖・分化におけるPEBP2転写因子の機能を明らかにする目的で行われた。先ずPEBP2β蛋白の翻訳開始Metコドンを含む、第1エクソンを欠失させた相同組換えES細胞クローンを得た。ES細胞をマウス初期胚に戻しキメラ・マウスを、さらにPEBP2β(+/-)のヘテロマウスを得る事ができた。ヘテロマウスは特に異常なく発生し成長した。一方PEBP2β(-/-)のホモ個体は脳室内への出血を伴い、12.5日令で胎生致死となる。またプリミティブな赤血球は認められるが、肝におけるデフイニテイブな造血像は殆ど認められない。肝造血の欠如は、肝組織切片のHE染色標本・肝組織スタンプ・スミアのMG染色標本で何れの系統の血球をも認めないことから明らかである。また12.5日令のPEBP2β(-/-)肝より細胞を採取し、デフイニテイブな造血を促す栄養条件下でin vitroのコロニー形成法を行っても、赤血球系・骨髄球系・混合型の何れのコロニーをも検出できなかった。以上の観察はPEBP2β遺伝子が、おそらくは造血幹細胞のレベルで、その発生・増殖・分化に必須の遺伝子として働いていることを示唆している。PEBP2転写因子のαサブユニットをコードするAML1遺伝子欠損個体もまた、類似の表現型を示すことが報告されている。デフイニテイブな造血の発生において、PEBP2転写因子のα・βサブユニットは必須かつ等価の機能を果たしていると考えられる。

The DNA binding energy is promoted by α-protein and α-protein formation. The new DNA binding energy is PEBP2, which is a new factor in DNA binding. A group of patients with acute osteoblastic leukemia (AML) type M4 have been diagnosed as AML type M4, and the locus of inv16 (p13q22) has been identified as the locus of AML type M4, and the locus of AML type M4, inv16 (p13q22), and av16 (p13q22). This study demonstrated the function of PEBP2 β gene. The expression of PEBP2 in human stem cells was analyzed. First, PEBP2 β protein was transformed into Met protein, and the first group of ES cells was transformed into ES cells. ES cells are in the early stages of development. It's a very unusual development. PEBP2β(-/-) was found to be associated with hemorrhage in the interior of the body, and the fetus was killed in 12.5 days. The red blood cells are not recognized, the liver is not recognized, and the hematopoietic cells are not recognized Hematopoiesis in liver tissue sections HE staining Liver tissue sections MG staining Hematopoiesis in liver tissue PEBP2β(-/-) liver cells were cultured in vitro under hematopoietic stimulation conditions on 12.5 days. The above observations indicate that PEBP2 β gene is essential for hematopoietic stem cell development, proliferation and differentiation. PEBP2 gene expression factor α is reported in AML1 gene deficient individuals, and similar phenotypes are reported. The function of PEBP2 gene is to produce blood cells.

项目成果

Chiba, N.: "Differentiation dependent expression and distinct subcellular localization of the protooncogene product, PEBP2β/CBFβ, in muscle development." Onocogene. in press.

Chiba, N.：“原癌基因产物 PEBP2β/CBFβ 在肌肉发育中的分化依赖性表达和独特的亚细胞定位”。

Fujioka, M.: "Runt domain partner proteins enhance DNA binding and transcriptional repression in cultured Drosophila cells." Genes to Cells. 1 (8). 741-754 (1996)

Fujioka, M.：“Runt 结构域伴侣蛋白增强了培养的果蝇细胞中的 DNA 结合和转录抑制。”

Niki, M.: "Hematopoiesis in the fetal liver is impaired by targeted mutagenesis of a gene encoding a non-DNA binding subunit of the transcription factor, PEBP2/CBF." Proc. Natl. Acad. Sci. USA. in press.

Niki, M.：“编码转录因子 PEBP2/CBF 的非 DNA 结合亚基的基因的定向诱变会损害胎儿肝脏的造血功能。”