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卵成熟における減数分裂再開の分子機構

卵母细胞成熟过程中减数分裂恢复的分子机制

基本信息

批准号：
08275202
负责人：
山下正兼
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08275202/
关键词：
卵成熟魚類両生類 mRNA MPF cdc2 サイクリンB 単クローン抗体

项目摘要

卵成熟における減数分裂再開の分子機構を明らかにすることを目的に、以下の2点について調べた。1)キンギョサイクリンBmRNAの翻訳開始機構ポリA鎖の伸長を阻害するコルジセピンが、ホルモン刺激によるキンギョ卵成熟を阻害することを発見した。このことはポリA鎖伸長がサイクリンBmRNAの翻訳開始に関わることを示唆する。ポリA鎖伸長の調節機構を探るため、キンギョのcytoplasmic polyadenylation element binding protein (CPEB)、ポリAポリメラーゼ、ポリA結合蛋白質のcDNAクローニングを行い、大腸菌で作製したそれぞれのリコンビナント蛋白質に対する単クローン抗体を作製した。現在、これら抗体を用いた解析を進めている。2)アカガエル卵成熟過程における卵成熟促進因子(MPF)の形成.活性化機構アカガエルサイクリンB1とB2の全長cDNAをクローニングし、リコンビナント蛋白質に対する抗体を作製し、サイクリンB1、B2蛋白質の卵成熟過程での変化を追った。両者ともに未成熟卵には存在せず、卵成熟過程で出現し、cdc2と結合してMPFになることが示され、pre-MPFの不在が確認された。バナデ-トがアカガエルMPFの活性化を阻害することからcdc25の関与が示唆されていたが、バナデ-ト存在下でcdc2のチロシンリン酸化は認められず、スレオニンリン酸化が阻害された。すなわち、バナデ-トによるMPFの活性化阻害はcdc25を介したものではなく、cdk7/サイクリンHを介したものと推定された。以上のことから、アカガエル卵成熟におけるMPFの形成.活性化機構はキンギョのそれとほぼ同様と結論される。

The molecular mechanism of meiosis reopening during egg maturation is described in the following two points: 1) The initiation mechanism of gene expression of BmRNA is to inhibit the elongation of A-locks, and to inhibit the maturation of eggs. This is the first time that A gene has been detected. Detection of regulatory mechanisms for polyadenylation of polyadenylation protein (CPEB), polyadenylation of polyadenylation protein (CPEB), cDNA sequencing of polyadenylation protein (CPEB), and production of antibodies against polyadenylation protein (CPEB) in Escherichia coli. Now, the antibody is used in the analysis. 2) Formation of egg maturation promoting factor (MPF). The activation mechanism of the full-length cDNA of B1 and B2 proteins is to control the antibody production and the protein evolution of B1 and B2 proteins during egg maturation. The presence of immature eggs, the presence of mature eggs, the presence of cdc2, the presence of pre-MPF, and the absence of pre-MPF are all confirmed. The activation of cdc25 is blocked by the activation of cdc25 in the presence of cdc25 and cdc25 in the presence of cdc 25. MPFs are activated by cdc25 and cdk7/cdc7. The formation of MPF during egg maturation. The activation mechanism is the same as the conclusion.