卵成熟促進因子の形成・活性化機構

卵母细胞成熟促进因子的形成及激活机制

基本信息

批准号：
07680792
负责人：
山下正兼
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07680792/
关键词：
cdc2 サイクリンB MPF 魚類両生類卵成熟 mRNA結合タンパク質減数分裂

项目摘要

1卵成熟誘起ホルモン刺激によるサイクリンB合成開始の分子機構キンギョ卵成熟誘起に必須のサイクリンBmRNA翻訳開始機構を探る第一歩として、インビトロで作製したキンギョサイクリンBmRNA、cdc2mRNA、アクチンmRNAをプローブに、ノースウエスタン法、UVクロスリンク法、ビオチン標識RNAアフィニティー法により、サイクリンBmRNAに特異的に結合するタンパク質の検索を行った。その結果、サイクリンBmRNAに特異的に結合するタンパク質は発見できなかったが、約90、50、35kDaのRNA結合タンパク質が発見された。今後、これらを精製し、そのアミノ酸配列の一部を決定し、cDNAクローニングを行う計画である。2ツメガエル以外の両生類における卵成熟促進因子(MPF)の形成・活性化機構アカガエルサイクリンB1、B2に対する抗体を作製し、卵成熟過程におけるこれらタンパク質の挙動を調べた。その結果、サイクリンB1は未成熟卵に存在せず、サイクリンB2は存在したが、cdc2と複合体を形成していなかった。つまり、キンギョと同様、アカガエル未成熟卵にはpre-MPFは存在せず、ホルモン刺激後cdc2とサイクリンBの複合体(MPF)が形成された。しかし、キンギョと異なり、ツメガエルと同様、MPFの活性化はバナデ-トや抗cdc25抗体で阻害された。これらのことは、アカガエルはキンギョとツメガエルの中間的なMPF形成・活性化機構を採用していることを示す。

1。通过刺激激素诱导卵成熟的激素作为探索Cyclin BMRNA翻译启动机制的第一步，我们搜索了蛋白质，我们搜索了使用Cyclin bmRNA诱导蛋白，该蛋白质是诱导蛋白质bmRNA的，这对于诱导骨髓卵的成熟至关重要，这是探索Cyclin bmRNA翻译启动机制的第一步，这是探索蛋白BMRNA翻译启动机制的第一步，这是一个。 mRNA。结果，没有发现特异性与细胞周期蛋白B mRNA的蛋白质，但发现大约90、50和35 kDa RNA结合蛋白。将来将纯化它们，确定部分氨基酸序列，并进行cDNA克隆。除武士以外的两栖动物中，卵成熟启动子（MPF）的形成和激活机制我们产生了针对红色青蛙细胞周期蛋白B1和B2的抗体，并研究了这些蛋白质在鸡蛋成熟过程中的行为。结果，在未成熟的卵中不存在细胞周期蛋白B1，并且存在细胞周期蛋白B2，但没有与Cdc2形成复合物。换句话说，像棉花糖一样，未成熟的红蛙卵中不存在前MPF，在激素刺激后，形成了Cdc2和Cyclin B（MPF）的复合物。然而，与金鱼（如爪蟾）不同，MPF激活受到巴替酸盐和抗CDC25抗体的抑制。这些表明，红蛙采用了MPF形成和激活机制，该机制介于Snapdragon和xenopus之间。