MPF活性化に関るキナーゼカスケード

激酶级联参与MPF激活

• 批准号: 06262201
• 负责人: 山下 正兼
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06262201/
• 关键词: MPF; 卵成熟; cdc2; サイクリンB; MO15; キナーゼカスケード; キンギョ; 細胞分裂周期

卵成熟におけるcdc2の活性化に関わるキナーゼカスケードを明らかにするため、以下の2点を調べた。1.cdc2活性化キナーゼMO15の卵成熟過程での挙動キンギョMO15cDNAを大腸菌で発現させ、抗体を作製し、cdc2活性化酵素(T161リン酸化酵素)としてのMO15の機能を調べた。キンギョ未成熟卵抽出液には不活性型cdc2は存在するが、サイクリンBはない。これに大腸菌で作製したサイクリンBを入れると、cdc2のT161がリン酸化され、活性化した。この時、あらかじめ抗体でMO15を抽出液から除いておくと、サイクリンBを入れても、cdc2は活性化しなかった。しかし、ウサギ網状赤血球ライセ-トで作製したMO15を加えると、cdc2の活性化が回復した。キンギョcdk2を基質にした実験より、MO15は未成熟卵ですでに活性化状態にあることがわかった。また、そのタンパク量は卵成熟過程でほとんど変化しなかった。従って、キンギョ卵成熟誘起の最終的引き金になっているのはMO15の活性化ではなく、卵成熟過程でのサイクリンB合成開始であると結論できる。2.cdc2の活性化に関わるMO15以外のキナーゼの発見とその化学的同定キンギョとツメガエル卵成熟過程でMPFの活性化に関わるキナーゼ活性を47種の外来基質を用いて検索した。その結果、(1)MPF活性に先立ち上昇するエラスターゼをリン酸化する活性、(2)第1減数分裂と第2減数分裂の間で一時的に活性の上昇するフォスフォクレアチンをリン酸化する活性を発見した。(1)の活性はMPFの活性化に関わる可能性が、(2)については第1減数分裂と第2減数分裂の移行に関わる可能性があり、いずれの活性もこれまでに報告のないもので、その化学的実体の解明が急がれる。

The egg matured, the cdc2 became active, the egg matured, the egg, the egg and the egg. During the process of egg maturation, 1.cdc2-activated MO15 eggs were activated, MO15cDNA strains were detected, antibodies were used as antibodies, and cdc2-activated enzymes (T161-activated acidified enzymes) were detected in MO15. In the extract of immature eggs and inactive cdc2, there were two kinds of virus in the extract of immature eggs. The fungus was used to treat the bacteria, such as cdc2, T161, acidizing and activating. At the same time, the extraction solution of antibody MO15 was used to remove the enzyme, the enzyme B was injected into the enzyme, and the cdc2 was activated. Reticular red blood cells (RBC) MO15 and cdc2 are active and sensitive. The cdk2 gene was isolated, the immature egg was activated and the MO15 was activated. In the process of egg maturation, the process of egg maturation is very important. The most popular inducer for egg maturation is the activation of MO15, and the process of egg maturation begins with the beginning of synthesis. In addition to the activation of 2.cdc2 MO15, we can see the same level of chemistry in chemistry. The process of maturation of eggs by MPF activation is sensitive to the activity of 47 foreign genes. The results were as follows: (1) the activity of MPF was detected first, and (2) the activity of the first mitosis, the second cycle of mitosis, and the activity of the first mitosis, the second mitosis, the first mitosis and the second mitosis. (1) active MPF, activation probability, (2) mitosis 1, mitosis 2, mitosis 2,

项目成果

Masakane Yamashita: "Molecular mechanisms of the activation of maturation-promoting factor during goldfish oocyte maturation." Developmental Biology. 168(印刷中). (1995)

Masakane Yamashita：“金鱼卵母细胞成熟过程中成熟促进因子激活的分子机制”，《发育生物学》（1995 年）。