卵成熟における減数分裂再開の分子機構

卵母细胞成熟过程中减数分裂恢复的分子机制

• 批准号: 09264201
• 负责人: 山下 正兼
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09264201/
• 关键词: 卵成熟; 魚類; 両生類; mRNA; MPF; cdc2; サイクリンB

本研究は卵成熟における減数分裂再開の分子機構の解明を目的とし、以下の2点について調べた。1)卵成熟促進因子(MPF)の形成、活性化機構魚類やアフリカツメガエル以外の動物におけるMPFの形成・活性化には、サイクリンBmRNAのマスキングとその解除が直接関わる。これらに関与すると考えられるYボックス蛋白質、Nanos、PumilioのcDNAクローニングを行い、抗体を作製した。現在、これら抗体を用いた解析を進めている。また、ホルモン刺激のmRNA翻訳への影響を調べる目的で、ホルモン刺激したゼブラフィッシュ未成熟卵にサイクリンBmRNAを注射する実験を行った。その結果、サイクリンBmRNAの注射に対して、ホルモン刺激を受けた卵母細胞の方が未刺激のものより早く成熟することがわかった。このことはホルモン刺激によりサイクリンBmRNAの翻訳効率が高まることを示唆する。この分子機構の解析に着手した。2)MPFの作用機構MPFの下流で作用し、染色体凝縮に関与すると考えられるMAPキナーゼ様蛋白質の分子同定のため、ゼブラフィシュMAPキナーゼcDNAを単離し、抗体を作製した。現在、この抗体を用い、MAPキナーゼ様蛋白質がMAPキナーゼそのものかどうかを調べている。また、アカガエル未成熟卵にpre-MPFがないことを利用して、サイクリンB1とB2の機能分担を解析した。その結果、アカガエル卵成熟過程でのサイクリンBサブタイプの機能は、少なくともGVBDの誘起については重複していることが示された。

The purpose of this study is to clarify the molecular mechanism of meiosis reopening during egg maturation. The following two points are discussed. 1)The formation and activation of egg maturation promoting factor (MPF) in animals other than fish are directly related to the formation and activation of MPF in fish. The protein, Nanos, Pumilio and cDNA sequences are produced in the presence of antibodies. Now, the antibody is used in the analysis. The effect of mRNA transcription on the development of immature eggs was investigated. The results showed that the injection of BmRNA stimulated the oocyte to mature early. The expression of mRNA was higher than that of the control group. The molecular mechanism analysis of this kind of molecular mechanism is carried out. 2) MPF-related mechanisms MPF-related downstream functions, chromosome condensation, molecular identity of proteins, MAP, cDNA, antibody control. Now, this antibody is used, MAP is used, protein is used Analysis of the function sharing between pre-MPF and B1 and B2 As a result, the egg matures, and the function of GVBD is repeated.

项目成果

Shimizu Yohei: "Spermiogenesis without preceding meiosis in the hybrid medaka between Oryzias Iatipes and O.curvinotus." Journal of Experimental Zoology. 279. 102-112 (1997)

Shimizu Yohei：“Oryzias Iatipes 和 O.curvinotus 之间的杂交青鳉的精子发生没有事先减数分裂。”

Katsu Yoshinao: "Isolation and characterization of goldfish Y box protein,a germ cell-specific RNA-binding protein." European Journal of Biochemistry. 249. 854-861 (1997)

Katsu Yoshinao：“金鱼 Y 盒蛋白（一种生殖细胞特异性 RNA 结合蛋白）的分离和表征。”

山下正兼: "魚類生殖細胞の形成と成熟の制御機構" 生化学. 69. 1246-1260 (1997)

Masakane Yamashita：“鱼类生殖细胞形成和成熟的控制机制”生物化学69。1246-1260（1997）。

Tokumoto Mika: "Involvement of 26S proteasome in oocyte maturation of goldfish Carassius auratus." Zoological Science. 14. 347-351 (1997)

Tokumoto Mika：“26S 蛋白酶体参与金鱼卵母细胞成熟。”

Kondo Tomoko: "Introduction of cyclin B induces activation of the maturation-promoting factor and breakdown of germinal vesicle in growing zebrafish oocytes unresponsive to the maturation-inducing hormone." Developmental Biology. 190. 142-152 (1997)

Kondo Tomoko：“在对成熟诱导激素无反应的斑马鱼卵母细胞中，引入细胞周期蛋白 B 可诱导成熟促进因子的激活和生发囊泡的分解。”