卵成熟における減数分裂再開の分子機構

卵母细胞成熟过程中减数分裂恢复的分子机制

基本信息

批准号：
09264201
负责人：
山下正兼
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09264201/
关键词：
卵成熟魚類両生類 mRNA MPF cdc2 サイクリンB

项目摘要

本研究は卵成熟における減数分裂再開の分子機構の解明を目的とし、以下の2点について調べた。1)卵成熟促進因子(MPF)の形成、活性化機構魚類やアフリカツメガエル以外の動物におけるMPFの形成・活性化には、サイクリンBmRNAのマスキングとその解除が直接関わる。これらに関与すると考えられるYボックス蛋白質、Nanos、PumilioのcDNAクローニングを行い、抗体を作製した。現在、これら抗体を用いた解析を進めている。また、ホルモン刺激のmRNA翻訳への影響を調べる目的で、ホルモン刺激したゼブラフィッシュ未成熟卵にサイクリンBmRNAを注射する実験を行った。その結果、サイクリンBmRNAの注射に対して、ホルモン刺激を受けた卵母細胞の方が未刺激のものより早く成熟することがわかった。このことはホルモン刺激によりサイクリンBmRNAの翻訳効率が高まることを示唆する。この分子機構の解析に着手した。2)MPFの作用機構MPFの下流で作用し、染色体凝縮に関与すると考えられるMAPキナーゼ様蛋白質の分子同定のため、ゼブラフィシュMAPキナーゼcDNAを単離し、抗体を作製した。現在、この抗体を用い、MAPキナーゼ様蛋白質がMAPキナーゼそのものかどうかを調べている。また、アカガエル未成熟卵にpre-MPFがないことを利用して、サイクリンB1とB2の機能分担を解析した。その結果、アカガエル卵成熟過程でのサイクリンBサブタイプの機能は、少なくともGVBDの誘起については重複していることが示された。

这项研究旨在阐明卵成熟过程中减数分裂的分子机制，并研究了以下两个点：1）鸡蛋成熟促进因子（MPF）形成和激活机制在鱼类和Xenopus frogs以外的动物中形成和激活MPF的形成和激活直接涉及掩盖和脱离cyclin cyclin cyclin cyclin cyclin bmrna。 Y-box蛋白，纳米和pumilio的cDNA克隆被认为与这些抗体有关，以产生抗体。当前，正在进行使用这些抗体的分析。此外，为了研究激素刺激的刺激mRNA翻译的作用，我们进行了一个实验，将细胞周期蛋白BMRNA注射到已被激素刺激的未成熟斑马鱼卵中。结果表明，荷尔蒙刺激的卵母细胞比未刺激的细胞周期蛋白BMRNA进样更快。这表明激素刺激提高了细胞周期蛋白BMRNA的翻译效率。我们已经开始分析这种分子机制。 2）MPF鉴定MAP激酶样蛋白的分子的机制，该蛋白在MPF的下游作用，被认为与染色体凝结有关，斑马鱼MAP激酶cDNA被分离并制备抗体。目前，该抗体用于研究MAP激酶样蛋白是否是MAP激酶本身。此外，我们通过利用不成熟的红蛙卵中缺乏前MPF来分析细胞周期蛋白B1和B2的功能分裂。结果表明，在诱导GVBD时，在红蛙卵成熟过程中，细胞周期蛋白B亚型的功能至少重叠。