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卵成熟におけるコード領域及び微小繊維依存性サイクリンB1翻訳制御の分子機構解析

卵母细胞成熟过程中编码区和原纤维依赖性细胞周期蛋白B1翻译控制的分子机制分析

基本信息

批准号：
23370027
负责人：
山下正兼
金额：
$ 11.73万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2011
资助国家：
日本
起止时间：
2011-04-01 至 2014-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では翻訳の部位と時期をリアルタイムで検出できるトランスジェニックゼブラフィッシュを用い、卵成熟過程におけるサイクリンB1 mRNAの部位及び時期特異的翻訳制御機構を解析した。1、部位及び時期特異的翻訳に関わる新規蛋白質の同定: サイクリンB1 mRNA凝集体に存在するIMP3、DDX6、ELAV-like 1、Zar1及び抗Pumilio抗体免疫共沈降に存在するHSP90βとPiwi-like 1のcDNAをクローニングし、サイクリンB1 mRNAとの結合をUVクロスリンク法で調べた。その結果、IMP3、ELAV-like 1、Zar1が結合することが判り、これらがサイクリンB1 mRNAの翻訳制御に関わる分子であることが示唆された。2、翻訳制御に関わるORFのシス配列とトランス因子の同定: 前年度の研究で、ORFの524から736番目の塩基中にmRNAの局在及び翻訳制御を担う配列が存在する事を示す結果が得られた。本年度はシス配列の同定を進め、9塩基からなる配列の同定に成功した。この配列に変異を持つレポーターmRNAは凝集体を形成して動物極に局在ず、ホルモン処理後の翻訳開始時期も早くなった。さらに、この配列が特定のタンパク質と相互作用して働く事が明らかになり、このシス配列を認識するトランス因子の同定への手がかりを得た。3、部位及び時期特異的翻訳制御における微小繊維の機能: 微小繊維に結合するモエシンタンパク質のC末端部とGFPの融合蛋白質を発現するトランスジェニックゼブラフィッシュの作出に成功した。これを用い、卵成熟過程における微小繊維の変化をリアルタイムで観察することにも成功した。この系は、微小繊維依存性のサイクリンB1 mRNA翻訳制御の詳細を明らかにするための強力な武器となり得ると期待される。

In this study, during the period of reversion, the results showed that there was no significant difference between the two parts of the egg maturation process and B1 mRNA in the process of egg maturation. in this study, during the period of egg maturation, there was no significant difference between the two parts. The main results are as follows: 1. The location and time-specific antigens were the same: there were IMP3, DDX6, ELAV-like-1, Zar1 and anti-Pumilio antibody co-precipitation of IMP3, DDX6, ELAV-like-1, Zar1 and anti-Pumilio antibodies in the coagulum of HSP90 β-Piwi-like-1, cDNA-β-mRNA and UV-β-mRNA, respectively. The results, IMP3, ELAV-like 1, and Zar1 were combined to determine the accuracy of the test, and to determine the accuracy of the system. The results of the results, IMP3, ELAV-like 1, and Zar1 were used to determine the accuracy of the results. 2. To determine the same factors as the previous year's study, ORF 524, ORF 524 and ORF 524 in the previous year, there is an indication of the existence of information on the existence of information on the basis of the research of the previous year. This year, the same level of progress will be assigned to the current year, and the same level of success will be assigned to the basic level of 9 years. The equipment is required to make sure that the mRNA condensate is used to form an early warning in the opening period after the operation of the equipment management bureau. They are assigned to each other in the same way that the factors are the same as those in the same order. 3. The location and timing characteristics of the reversal system: the combination of the microphone and the GFP fusion protein at the end of the C terminal has been successfully performed. In the process of egg maturation, the process of egg maturation is very simple, and the success rate is very high. The system, the micro-system, the dependence, the B1 mRNA, the control system, the power weapon, the weapon, the weapon.

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

卵成熟過程でのゼブラフィッシュ cyclin B1 mRNA翻訳制御に関する新規シス配列の同定

鉴定参与卵母细胞成熟过程中斑马鱼细胞周期蛋白 B1 mRNA 翻译调节的新型顺式序列

DOI：
发表时间：
2012
期刊：
影响因子：
0
作者：
Ota;R.;Kotani;T.;Masakane;Y.;Lars Hesselholt;Kyota Yasuda;Lars Hesselholt;Tomoya Kotani;Lars Hesselholt;安田恭大
通讯作者：
安田恭大

ニホンメダカ(Oryzias latipes)精原幹細胞マーカーの探索

寻找日本青鳉（Oryzias latipes）的精原干细胞标记物

DOI：
发表时间：
2011
期刊：
影响因子：
0
作者：
Ota;R.;Kotani;T.;Masakane;Y.;Lars Hesselholt;Kyota Yasuda;Lars Hesselholt;Tomoya Kotani;Lars Hesselholt;安田恭大;佐藤竜一
通讯作者：
佐藤竜一

Biochemical Characterization of Pumilio1 and Pumilio2 in Xenopus Oocytes