分裂酵母における減数分裂特異的転写カスケードの分子遺伝学的解析

裂殖酵母减数分裂特异性转录级联的分子遗传学分析

• 批准号: 08275218
• 负责人: 野島 博
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08275218/
• 关键词: cDNAライブラリー; サブトラクション; ノーザンブロット; 窒素枯渇; 減数分裂; 転写誘導; 分裂酵母; 遺伝子破壊

昨年に引き続き、窒素枯渇条件により減数分裂を誘導する転写カスケードに載っている遺伝子(meu)の包括的クローニングを継続し、最終的に高品質の差分化cDNAライブラリーを作製することに成功した。その品質は180万クローンの独立クローンから成るcDNAライブラリー(平均鎖長1.5-kb)をスタートとして、1万2千クローンから成る1次差分化cDNAライブラリー(平均鎖長1.4-kb)を作製できた。このうちランダムに選んだ64クローンについてノーザンブロットを行い、減数分裂特異的な転写誘導を検定したところ、53クローンが転写誘導を受けていたことが分かった。それらを以下の3種類に分類した。(1)Type I:Ohr(減数分裂誘導前)では全く発現されていないもので真に減数分裂特異的発現がなされるも(9クローン)。(2)Type II:Ohrでも少しではあるが発現がみられるもの。減数分裂以外でも何らかの役割を果たしている可能性がある(37クローン)。(3)Type III:ノーザンブロットにおいて二本以上のバンドが見られ、そのうち一つのみがmeu遺伝子としての挙動を示すもの(7クローン)。これらクローンの塩基配列を決定したところ数個の既知遺伝子が同定された以外は殆どが新規遺伝子であった。一方、これらの転写誘導が既知の転写因子であるStell,Mei4の支配下にあるかどうかを調べるため、stell,mei4破壊株においてノーザンブロットを行ったところ、すべてのType I meuでstell破壊株において転写誘導が消滅し、そのうち4つのmeuではmei4破壊株においても転写誘導が消滅していた。また残りのType I meuではmei4破壊株において転写誘導が数時間も後方にずれていた。現在残りのmeuについて大がかりな解析を開始している。

Last year, the introduction and asphyxiation conditions caused by mitosis led to the writing of meu, which included the highest quality, poor differentiation, poor differentiation, poor differentiation and success. The average length of cDNA (average length 1. 5-kb) was significantly higher than that of cDNA (average length 1. 4-kb). In the first place, you know, you don't know what to do, and you don't know what to do. The following categories are classified into different categories. (1) Type I:Ohr (prior to mitosis) has a full view of the number of real mitotic signals (9%). (2) the Type II:Ohr system will not cause any serious problems. In addition to meiosis, how to cut the fruit in order to determine the possibility (37%). (3) Type III: the number of students in ordinary universities and universities is higher than that of ordinary universities. (3) Type III: the number of students of ordinary universities or above is higher than that of ordinary universities. (3) Type III: the number of students of ordinary universities or above is higher than that of ordinary universities, and that of ordinary universities or above. It is decided that several of the known subsystems will be completely different from the new specifications. On the one hand, the command is under the control of the write factor (Stell,Mei4). It is known that the data is broken, the stell,mei4 is broken, the stell is broken, the stell is broken, and the mei4 is broken. It is necessary to write the command, the meu, the mei4, the user, the user, and the user. After the number of days after which the disabled Type I meu mei4 has been broken for a few days, you will not be able to do so. At present, the analysis of the general information of the disabled meu program has begun.

项目成果

Endo,Y.,et al.: "Structure and chromosomal assignment of the human cyclin G gene" Genomics. 38. 92-95 (1996)

Endo,Y.,et al.：“人类细胞周期蛋白 G 基因的结构和染色体分配”基因组学。

Tanaka,S.,et al.: "a Niml-like protein kinase of S.cerevisiae interacts with the Cdc28 complex and regulates cell cycle progression" Genes to Cells. 1. 905-921 (1996)

Tanaka,S.,et al.：“酿酒酵母的 Niml 样蛋白激酶与 Cdc28 复合物相互作用并调节细胞周期进程”基因到细胞。

Kanaoka, Y., et al.: "GAK : a cyclin G associatde kinase contains a tensin/auxilin-like domain." FEBS Lett.402. 73-80 (1997)

Kanaoka, Y., et al.：“GAK：一种细胞周期蛋白 G 相关激酶，包含张力蛋白/辅助蛋白样结构域。”

Sasaguri,T.,et al.: "Phorbol ester inhibits the phosphorylation of the retimoblastoma protein without supressing cyclin D-associated kinase in vasucular smooth muscle cells" J.Biol.Chem.271. 8351-8354 (1996)

Sasaguri,T.,et al.：“佛波酯抑制视网膜母细胞瘤蛋白的磷酸化，而不抑制血管平滑肌细胞中的细胞周期蛋白 D 相关激酶”J.Biol.Chem.271。