ユビキチン・プロテアソーム系による酵母細胞機能制御の解析

泛素-蛋白酶体系统对酵母细胞功能调节的分析

• 批准号: 08278206
• 负责人: 東江 昭夫
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08278206/
• 关键词: プロテアソーム; 出芽酵母; 細胞周期; 温度感受性

今年度の研究により、我々は出芽酵母のSUN1遺伝子が、マルチユビキチン鎖認識蛋白質をコードする26Sプアロテアソームのサブユニットであることを明らかにした。さらに、SUN1遺伝子を餌にした2-hybrid法により新規遺伝子SOI1を得た。DNA塩基配列から推定したアミノ酸配列と相同性を示す蛋白質は線虫のゲノム中に見い出されたが、機能については不明である。以下、SOI1遺伝子の解析結果を述べる。soi1破壊株は温度感受性増殖を示す。許容温度から制限温度にシフト後4時間目に細胞の形態を観察したところ、約80%の細胞がダンベル型で、核は一つで母細胞と娘細胞の境界近くに位置していた。これは典型的なG2/Mアレストの性質である。核中のDNA含量が1NであることはFACSによって確認した。同調培養を用いた実験によっても、SOI1破壊株は制限温度でG2アレストを引き起こすことが示された。SOI1がプロテアソーム機能に関連するかどうかを調べるために、温度シフト後にSOI1破壊株がポリユビキチン蛋白質を蓄積するかどうかを調べた。その結果、SOI1破壊株は制限温度下で多量のポリユビキチン化蛋白質を蓄積し、Soi1蛋白質はプロテアソーム機能に必要な蛋白質であることが分かった。これまでにプロテアソーム異常によりG2/Mアレストが引き起こされることが知られていたが、SOI1破壊株が示すG2アレストの高い同調性は他のプロテアソーム変異株には見られない。SOI1遺伝子をGAL1プロモーター下に繋げ誘導すると、細胞はやはり温度感受性の増殖を示す。このときの増殖停止はG2アレストではなかった。また、ポリユビキチン化蛋白質の蓄積もなかった。SOI1遺伝子の機能欠損と機能昂進がいずれも温度感受性を示すことは興味深く、SOI1遺伝子の機能を考える上で重要なヒントを与えているものと考えられる。

This year's research shows that the SUN1 gene of budding yeast can recognize the protein of 26S protein. Sun1 is a 2-hybrid approach to new SOI1. DNA base alignment is presumed to be identical to that of DNA base alignment, and the identity of DNA base alignment is demonstrated by the presence and function of DNA base alignment. The analysis results of SOI1 are described below. Soi1 shows the temperature sensitivity of the plant. About 80% of the cells were observed at the end of 4 hours after the temperature limit, and the cell morphology was observed at the end of 4 hours. This is a typical G2/M property. DNA content in the nucleus is 1N. The isochronous culture is used to control the temperature of the SOI1 strain. SOI1 is a functional unit, and its temperature is regulated by SOI1. As a result, SOI1 strains have a large amount of protein accumulation at limited temperatures, and Soi1 proteins have a large amount of protein accumulation at limited temperatures. The G2/M interface is the only one that has the highest coherence. The SOI interface is the only one that has the highest coherence. SOI1 gene GAL1 gene expression under induction, cell response to temperature sensitivity This is the first time I've ever seen you. The accumulation of protein in the body is very important. SOI1 chip function loss, function enhancement, temperature sensitivity, interest, SOI1 chip function evaluation, important evaluation

项目成果

Tsurumi,C.,et al.: "cDNA clcning and functimol anolyis of the p97 subumit of the 265 moteasunl,a folypepliole idenfical to the type I TNF seccptor bindiny protein TRAB-2/SS-11" Eur,J,Biochem.239. 912-921 (1996)

Tsurumi,C.,et al.：“265 moteasunl 的 p97 亚基的 cDNA 克隆和功能分析，a folypepliole 与 I 型 TNF 结合蛋白 TRAB-2/SS-11 相同”Eur,J,Biochem.239

Kominami.K.,et al.: "Yeast counterparts of subunits S5a and p58 (S3) of the hurman 265 pooteosome aue encoded by too multicopy supprescrs of nin 1-1" Mol.Biol.Cell. 8(in press). (1997)

Kominami.K. 等人：“由 nin 1-1 的多拷贝抑制因子编码的 hurman 265 pooteosome aue 的亚基 S5a 和 p58 (S3) 的酵母对应物”Mol.Biol.Cell。

Yokota,K.,et al.: "cDNA cloning of p112,the lorgest iegulteny subunit of the human 265 protesome,and functional analysis of its yeast homolog,Sen3p" Mol.Biol.Cell. 7. 853-870 (1996)

Yokota, K., et al.：“p112（人类 265 蛋白酶体的最大即量亚基）的 cDNA 克隆及其酵母同源物 Sen3p 的功能分析”Mol.Biol.Cell。

Yashiroda,M.,Oguchi,T.,Yasuda,Y.,Tohe,A.Kikuchi,Y: "Buld,a new binding proitein of the Rsp5-ubiyonitin logose in Saccharsmyces ceievisial" Mol.Cell.Biol.16. 3255-3263 (1996)

Yashiroda，M.，Oguchi，T.，Yasuda，Y.，Tohe，A.Kikuchi，Y：“Buld，酿酒酵母中 Rsp5-ubiyonitin 标志糖的新结合蛋白”Mol.Cell.Biol.16。

Kawamura,M.,Kominami,K.,Talceuchi,J.,Toh-e,A.: "A multicogy suppressor of nin1-1 of the yeast Salchasomyces ceuvisice is a counterpant of the Drosovlinla uaelamogaryen divlsuol oxidoss A2heue,Dox A2" Mol.Gen.Genet.251. 146-152 (1996)

Kawamura,M.,Kominami,K.,Talceuchi,J.,Toh-e,A.：“酵母 Salchasomyces ceuvisice 的 nin1-1 的多重抑制因子是 Drosovlinla uaelamogaryen dilsuol oxydoss A2heue,Dox A2 的对应物”Mol