マウスRad51およびDmc1遺伝子による組換え修復機構の研究

小鼠Rad51和Dmc1基因重组修复机制研究

• 批准号: 08280217
• 负责人: 森田 隆
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08280217/
• 关键词: 相同組換え; Rad51遺伝子; Dmc1遺伝子; DNA修復; 減数分裂; 遺伝子ターゲッティング; RecA様遺伝子; 細胞周期

遺伝子相同組換えは、有糸分裂においては遺伝情報の正確な伝達、また減数分裂においては遺伝的に多様な配偶子を生みだすという生物にとって、重要な機能を担っていると考えられる。我々は、大腸菌および酵母においてDNA修復、相同組換えに関与するRecAおよびRad51遺伝子のホモローグをヒトおよびマウスからクローニングした。この遺伝子のコードするタンパクは、(1)精原細胞や精原細胞、(2)卵胞上皮および成熟前の卵母細胞、(3)胸腺未分化T化細胞、(4)脾臓胚中心、(5)小腸陰窩、(6)子宮内膜上皮のような細胞分裂の盛んな細胞で発現していることが明らかとなった。さらに、細胞周期での発現を検討した結果、G1後期から転写上昇がみられ、S,G2期でも存在した。また、九大の續らとの共同研究により、マウス相同組換え遺伝子Rad51をターゲットした結果、ホモ(Rad51^<-1->)のノックアウトマウスは初期発生の段階で致死となることが明らかとなった。酵母においてはRAD51遺伝子は増殖に必須でないことから、哺乳動物では、Rad51遺伝子が組換え修復の他に細胞増殖にとって重要な機能を担っていると考えられる。さらに、我々は相同組換え頻度が高い減数分裂期に特異的に発現するRecA様遺伝子、マウスDmc1遺伝子を単離した。現在、マウスDmc1遺伝子のノックアウトを行っており、germ line chimeraからヘテロマウス、さらにヘテロマウス同士の交配により、ホモマウスを作製中である。このようなマウスにおける、組換えと減数分裂の進行、染色体の異常、遺伝的組換えの有無などを解析し、相同組換え遺伝子の役割を明らかにする予定である。

Heritage 伝 son in the same group え は, si split に お い て は heritage 伝 intelligence の right な 伝, ま た meiosis に お い て は but 伝 に others more な spouse child born を み だ す と い う biological に と っ て, the important function of な を bear っ て い る と exam え ら れ る. I 々 は, coliform お よ び yeast に お い て DNA repair, the same group in え に masato and す る rec a お よ び Rad51 heritage 伝 son の ホ モ ロ ー グ を ヒ ト お よ び マ ウ ス か ら ク ロ ー ニ ン グ し た. こ の posthumous son 伝 の コ ー ド す る タ ン パ ク は, (1) SSCS や spermatagonial cells, (2) the follicle epithelial お よ び の before mature oocytes, thymus T undifferentiated cells, (3) (4) splenic germinal center, (5) the intestinal Yin nest, (6) endometrial epithelial の よ う な cell division の sheng ん な cells で 発 now し て い る こ と が Ming ら か と な っ た. Youdaoplaceholder0, で in the cell cycle, を検 shows た results, ら転 in the later stage of G1 shows an increase in がみられ, and で in the S and G2 phases exists in た. Renew ま た, nine の ら と の joint research に よ り, マ ウ ス traces of the same group in え 伝 son Rad51 を タ ー ゲ ッ ト し た results, ホ モ (Rad51 ^ < - - > 1) の ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス は 発 born early の Duan Jie で death と な る こ と が Ming ら か と な っ た. Yeast に お い て は RAD51 posthumous son 伝 は raised colonization に must で な い こ と か ら, mammals で は, RAD51 but 伝 が group in え repair の he に cells raised colonization に と っ て important function of な を bear っ て い る と exam え ら れ る. さ ら に, I 々 は in same group え high frequency が い meiosis に specific に 発 now す る rec a others heritage 伝, マ ウ ス Dmc1 posthumous son 伝 を 単 from し た. Now, マ ウ ス Dmc1 posthumous son 伝 の ノ ッ ク ア ウ ト を line っ て お り, germ line chimera か ら ヘ テ ロ マ ウ ス, さ ら に ヘ テ ロ マ ウ ス mating with James の に よ り, ホ モ マ ウ ス を cropping in で あ る. こ の よ う な マ ウ ス に お け る, group in え の と meiosis and abnormal chromosome の, but 伝 group in え の presence of な ど を analytical し, traces of the same group in え 伝 child cut を の service Ming ら か に す る designated で あ る.

项目成果

Yamamoto A.et al: "Cell cycle-dependent expression of the mouse Rad51 gene in proliferating cells." Mol.Gen.Genet.251. 1-12 (1996)

Yamamoto A.et al：“增殖细胞中小鼠 Rad51 基因的细胞周期依赖性表达。”

森田 隆: "蛋白質 核酸 酵素" 共立出版, 7 (1996)

森田隆：“蛋白质、核酸、酶”Kyoritsu Shuppan，7 (1996)

Tsuzuki T.et al: "Targeted disruption of the Rad51 gene leads to lethality in embryonic mice." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 93. 6236-6240 (1996)

Tsuzuki T.等人：“Rad51 基因的靶向破坏会导致胚胎小鼠死亡。”

Taki T.et al: "Antisense inhibition of the RAD51 enhances radiosensitivity." Biochem.Biophys.Res.Commun.223. 434-438 (1996)

Taki T.等人：“RAD51 的反义抑制可增强放射敏感性。”

Habu T.et al: "The mouse and human homologues of DMC1,the yeast meiosis-specific homologous recombination gene,have a common unique form of exon-skipped transcript in meiosis." Nucleic Acids Res.24. 470-477 (1996)

Habu T.等人：“DMC1（酵母减数分裂特异性同源重组基因）的小鼠和人类同源物，在减数分裂中具有共同的、独特的外显子跳跃转录本形式。”