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分泌蛋白質特異的Secチャネル複合体の構造・機能

分泌蛋白特异性Sec通道复合物的结构和功能

基本信息

批准号：
09257212
负责人：
徳田元
金额：
$ 1.34万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09257212/
关键词：
SecA SecY SecE チャネル分泌蛋白質

项目摘要

大腸菌における分泌蛋白質輸送装置は、SecYとSecEが形成するチャネルに、SecAが挿入・脱離を繰り返して進行する。この時SecGは、その膜内配向性の反転と復帰を繰り返すことによりSecAの挿入・脱離を促進する。SecAやSecGの構造変化の詳細と、因子間の相互作用を明らかにするため、SecG分子内の様々な位置にシスライン残基を一個導入した変異体を多数作製した。これらの変異体SecGはすべて機能を持っており、SecG遺伝子破壊株で発現させると低温での生育が回復した。そこで、変異体を発現した大腸菌から、反転膜小胞を調製し、SH基特異的化学修飾試薬や化学架橋試薬を用いてSecGの膜内での存在様式、他因子との相互作用様式を調べ、以下の成果を得た。1.SecGの膜内配向性は、これまで提唱してきたモデルが基本的に正しく、N末端、C末端をいずれもペリプラズム側に露出し膜を2回貫通し、膜貫通領域の間の領域は細胞質側に露出している。2.SecAと相互作用する領域は細胞質側に露出した領域である。3.チャネル構成蛋白質SecYとは、細胞質側に露出した領域から、2番目の膜貫通領域である。

E. coli secretes protein delivery devices, SecY and SecE form, SecA enters and leaves, and returns. In this case, SecG is the opposite of the film alignment, and it is the opposite of SecA. The structure of SecA and SecG is described in detail, and the interaction between factors is clearly defined. The position of SecG in the molecule is determined by a single introduction and a single variant. The function of the different SecG is maintained, and the SecG gene is recovered at low temperatures. The following results were obtained: 1. The expression of E. coli, the modulation of reverse membrane cells, the use of SH group-specific chemical modification assays, the existence of chemical bridging agents, and the interaction of other factors in the membrane of SecG. 1. The intramembranous orientation of SecG is enhanced by the presence of the basic N-terminal, N-terminal and C-terminal regions, which are exposed on the cytoplasmic side of the membrane and are penetrated twice through the membrane. 2. SecA interaction field is exposed on the cytoplasmic side. 3. The structure of protein in the cytoplasm is exposed to the outside, 2. The membrane is penetrated into the outside.