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ヒトデ卵母細胞の1-メチルアデニン情報伝達系

海星卵母细胞中的 1-甲基腺嘌呤信号系统

基本信息

批准号：
09264208
负责人：
千葉和義
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Ochanomizu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09264208/
关键词：
ヒトデ GTP結合蛋白質レセプター卵母細胞卵成熟 MPF リン酸化

项目摘要

【目的】ヒトデ卵母細胞は、ホルモンである1-メチルアデニン(1-MA)によって、減数分裂を再開する。われわれはこれまでに、三量体GTP結合蛋白質(G)が1-MAの情報伝達系に関与することを明らかにしてきた。すなわち、1-MAは卵表のレセプターに結合し、その情報はGのαサブユニット(Gα)に伝達される。その結果、Gαから解離したGβγが最終的にはMPFの形成に働き、減数分裂が再開されると考えられる。本研究では、GβγからMPF形成までの情報伝達系を明らかにすることを目的とする。【経過】昨年度に開発した、ヒトデ卵cell free系では、in vitroで核分裂(GVBD)と染色体の凝集を引き起こした。これらの現象はin vivoを忠実に再現するものであり、cell free系の有用性が強く期待された。本年度は、Gβγの標的分子を明らかにするために、本cell free系を活用した。【本年度成果】ヒトデ未成熟卵に放射性のATPをマイクロインジェクションし、1-MAで処理したところ、62kDaの蛋白質が4分以内にリン酸化されることが明らかになった。このin vivoにおけるリン酸化は、in vitroにおいても再現された。すなわち、未成熟卵を用いて作成したcell free系に1-MAを添加したところ、62kDaの蛋白質はリン酸化された。さらに1-MAの代わりにGβγをcell free系に添加した場合にも、濃度依存的に62kDaの蛋白質がリン酸化された。リン酸アミノ酸分析の結果、62kDa蛋白質のセリン残基がリン酸化されていることが示された。したがって1-MA情報伝達系には、Gβγによって活性化されるセリンキナーゼが関与することが明らかになった。Gβγとセリンキナーゼの間に介在する分子を明らかにするために、各種阻害剤による62kDa蛋白質リン酸化の影響を検討した。PI3キナーゼの特異的な阻害剤であるワ-トマニンをcell free系に添加したところ、Gβγによる62kDa蛋白質リン酸化が阻害された。in vivoにおていも、ワ-トマニンは1-MA依存的なGVBDを阻害したことから、GβγはPI3キナーゼを活性化すると考えられた。現在I3キナーゼによって活性化されるセリンキナーゼの同定を試みている。

[Objective] The oocyte is divided into two groups: one is the first group, the other is the second group, the other is the third group. The protein (G) is a 3-mer GTP binding protein (GTP). 1-MA is a combination of Gα and Gα. The result is that Gα is dissociated from Gβγ, and the final stage is the formation of MPF, and meiosis is reopened. The purpose of this study is to understand the information transmission system of MPF formation. The cell free system was developed in vitro and chromosome aggregation was initiated. This phenomenon is expected to be reproduced in vivo and useful in cell free systems. This year, the target molecule of Gβγ is clearly used. [Results of this year] The immature eggs were treated with ATP, 1-MA and 62kDa protein within 4 minutes. This is in vivo and in vitro. 1-MA is added to the immature egg and the 62kDa protein is acidified. 1-MA and Gβ-cell free are added to the protein and the 62kDa protein is acidified. The results of acid analysis of 62kDa protein showed that the amino acid residues of 62kDa protein were changed. 1-MA information transfer system, G β γ transfer system, Gβγ transfer system, G β transfer system, G β transfer system, G Gβγ is the intermediate molecule in the protein chain, and the 62kDa protein chain is the inhibitor. The specific inhibitor of PI3 In vivo, the GVBD is blocked by 1-MA, and the Gβγ is activated. Now, I3, the activation of the system, the synchronization of the system, and the test of the system.