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分裂酵母における減数分裂特異的転写カスケードの分子遺伝学的解析

裂殖酵母减数分裂特异性转录级联的分子遗传学分析

基本信息

批准号：
09264213
负责人：
野島博
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は分裂酵母の系で減数分裂を誘導する転写カスケードに載っている遺伝子(meu)をさらに多数クローニングするとともに、それらの減数分裂における機能解析を始めた。meu遺伝子の塩基配列を決定した結果、そのほとんどは従来報告されていない新規遺伝子であった。興味深いことにそのうちの80%はすでに全ゲノムの塩基配列が決定された出芽酵母には存在しない遺伝子であった。このことは減数分裂による配偶子形成という種の保存に必須な過程は種に特異的な遺伝子によって制御されている事を示し、これは進化論的に重要な示唆に富む事実である。各々のmeu遺伝子の破壊株を作製したり過剰発現系を構築したりして調べた結果、いずれのmeu遺伝子も減数分裂に多彩な形で影響を与えることが明らかになった。しかも、いずれも減数分裂を完全には阻止しない、すなわち遺伝子欠損に由来する減数分裂不全の表現型による選択を指標にした突然変異株樹立による手法では原理的に単離できないタイプの制御遺伝子がmeu遺伝子の中に数多く含まれることを示唆する。一方、同様な手法を用いてマウスの精子に特異的に転写誘導される遺伝子群(TAU:Transcription in Adult testis Up-regulated)を包括的に単離できる差分化cDNAライブラリーを作製した。そのために成体マウス(35日齢)の精巣由来のcDNAライブラリーを作製し単鎖化した。この単鎖DNAに、精子を生み出せない子供マウス(16日齢)の精巣から抽出したmRNAをビオチン化してハイブリダイズさせ、アビジンで除去して精子特異的差分化cDNAライブラリーを作製した。重差分化法を適用し、段階的に差分化を3次差分まで繰り返して構成するcDNAを解析し、これまでに77種類のTAU遺伝子を同定したが、塩基配列決定の結果やはり大半は新規遺伝子であった。

This year, the meiotic induction of yeast lines was initiated by the functional analysis of most meiotic genes. Meu 80% of the time, the yeast is present. The process of mate formation and species preservation is essential for species-specific genetic control, and for evolutionary control. The results of meiosis are different from the results of meiosis. The results of meiosis are different from those of meiosis. In addition, the expression of meiosis is not complete, and the number of meiosis is not complete. In addition, the expression of meiosis is incomplete. The same method is used to induce sperm specific transcription in adult testis Up-regulated (TAU), including Transcription in Adult testis Up-regulated. The origin of the cDNA sequence of the adult (35 days old) cDNA sequence was determined by PCR. The gene expression of DNA in sperm cells was determined by PCR. The gene expression of DNA in sperm cells was determined by PCR. The differential analysis method was applied to the analysis of cDNA, and the sequence of TAU genes was determined based on the sequence analysis of cDNA.