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神経軸索誘導に関与する分子の探索と機能解析

神经轴突引导分子的搜索和功能分析

基本信息

批准号：
12053214
负责人：
能瀬聡直
金额：
$ 34.24万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

ショウジョウバエ胚の神経筋結合系において、標的認識の際、標的である筋肉細胞がアクチン性の突起(myopodia)を出していることが報告されている。myopodiaは成長円錐との相互作用によりシナプス部に動的に凝集することから、標的認識において重要な構造である可能性が報告されている。しかしながら、その標的認識過程における役割は必ずしも明確ではなかった。そこで本研究においては、標的認識分子カプリシャスの局在とmyopodiaとの関連を解析した。蛍光蛋白質GFPとの融合蛋白質(Caps-GFP)をGAL4-UASシステムを用い特定の筋肉において強制発現させ、共焦点レーザー顕微鏡を用いてその挙動を追った。すると興味深いことに、Caps-GFPは、myopodiaの先端部に集積していた。この結果は標的細胞が突起の先端部に標的認識分子を提示しながら、積極的にシナプス前細胞の成長円錐を探索していることを示唆するものである。Caps-GFPは、myopodiaの先端部への局在は、運動神経が末梢へと伸びていかないミュータントprosperoにおいても起こることから、神経非依存的であることが分かった。さらに、実際に標的認識が、myopodia先端部においておこるかを調べるため、運動神経軸索と筋肉とが最初に接触を開始する瞬間をライブイメージングによって捉えることを試みた。このため、elav-gal4,M12-gal4株を用い、運動神経細胞と筋肉の両方に膜結合型GFPを発現し、その微細構造を可視化した。その結果、確かに、神経筋間の最初の接触がmyopodiaの先端部においておこることを見いだした。以上の結果はシナプス後細胞の方も結合相手の認識過程に能動的に関与するという考え方を支持している。

In this paper, we discuss the relationship between the neuromuscular junction system and the target, and discuss the relationship between the neuromuscular junction system and the target. myopodia is a report on the possibility of aggregation of growth cones and their interactions with target recognition. The cognitive process of the target must be clear. In this study, we analyzed the relationship between myopodia and target cognitive molecules. GFP and fusion protein (Caps-GFP) GAL4-UAS system is used in the development of specific muscle stress, confocal microscopy and microscoping. In addition, Caps-GFP and myopodia are concentrated at the top of the body. The results showed that the target cells were sensitive to molecular cues, and positive responses were detected in the growth cones of the target cells. Caps-GFP, myopodia, and the end of the game are in reverse, and the movement of the brain is not dependent on the end of the game. In the beginning, the movement axis and muscle are connected. In the beginning, the movement axis and muscle are connected. In the end, the movement axis and muscle are connected. The expression of membrane-bound GFP in motor neurons and muscle cells and the visualization of fine structures were observed. The result is that the first contact between the muscles and the brain is the tip of the myodia. These results support the dynamic relationship between the cognitive processes of the post-processing cells and their interaction.