シャペロニング機能を有する分子シンクロシステムの構築

具有陪伴功能的分子同步系统的构建

基本信息

项目摘要

本研究では、タンパク質の状態とシンクロして分子シャペロニング機能を発現しえる新規な動的機能性ナノゲルの設計と利用を図っている。スピロピランは、フォトクロミズムに伴って親水性・疎水性の変換や大きな構造変化を引き起こす化合物である。従来の疎水基に変えて高分子の会合制御因子として、この分子を多糖に部分置換した新規会合成高分子スピロピラン置換プルラン(SpP)の合成とその会合挙動を検討してきた。その結果、SpPはナノ微粒子を形成し、光、熱により動的に会合状態が変化する新しいナノ微粒子であることが明らかになった。本年度は、このナノ微粒子の蛋白質のリフォールディングにおけるシャペロン作用について検討し、新しい光応答性人工分子シャペロンとして機能することが明らかになった。SpPナノ微粒子のシャペロン作用を、モデル酵素としてホモ2量体であるCitrate Synthase(CS、Mw_<subunit>=50,000)を用いて検討を行った。CS(1.0mg/ml)を6MGuHClによって変性させ、50倍希釈によるリフォールディング実験を行った。希釈後の酵素活性を測定し、天然状態のそれと比較することで活性回復率を見積もり、シャペロン活性を評価した。自発的な系では30%しか酵素は再生しなかった。一方スピロ型(Spiro)のSpPナノ微粒子を調製し、可視光照射下リフォールディング実験を行ったところわずかながらシャペロン活性が見られた(〜40%)。メロシアニン型(Mer)のSpPナノ微粒子を調製し暗所下においてリフォールディングを行わせると、顕著なシャペロン活性を示した(〜60%)。さらに、Merでリフォールディングを開始し暗所下で30分ほど放置してから、可視光照射しSpiroにした系では、非常に大きなシャペロン活性を示した(80%)。このようにSpPはスピロピラン基の親水性・疎水性を制御することで高いシャペロン作用を示す新しいシステムとして機能することが明らかになった。
In this study, we are able to detect the functional impact of new regulations by using the mechanism of molecular monitoring and monitoring. The chemical compound is introduced in the presence of water, water and water. The new regulations will synthesize the synthesis of water-based polymers and molecular polysaccharides (SpP), which can be used to synthesize polymers. The results of the experiment show that the formation of SpP particles is characterized by the rendezvous of light, light and photon motions. This year, microparticles, protein, protein and so on. SpP, microparticles, enzymes, enzymes, Citrate Synthase (CS, Mw_<subunit>=50000), enzymes, enzymes and enzymes. CS (1.0mg/ml), 6MGuHCl, sex, sex and sex. After the determination of enzyme activity, the natural state of enzyme activity was determined, and the activity recovery rate was determined. 30% of the self-made cells were regenerated by enzymes. One side is Spiro (SpP), and the particles can be exposed to light, and the activity of the particles can be measured by light exposure. Type (Mer) SpP particles show activity (~ 60%) in the dark. In the first 30 minutes of the day, the Mer will be able to illuminate the Spiro system, and the activity of the system will show that it is very sensitive. On the basis of the SpP system, the system of water-based water-based water-based

项目成果

期刊论文数量(18)
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K.Akiyoshi 他3名: "Amphiphilic Block Copolymer with a Molecular Recognition Site : Induction of a Novel Binding Characteristic of Amylose by Self-assembly of Poly(ethylene oxide)-block-amylose in Chloroform"Biomacromolecules. 3. 280-283 (2002)
K. Akiyoshi 和其他 3 人:“具有分子识别位点的两亲嵌段共聚物:通过在氯仿中自组装聚(环氧乙烷)-嵌段直链淀粉来诱导直链淀粉的新颖结合特性”生物大分子 3. 280-283( 2002)
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秋吉 一成: "自己組織化多糖ナノゲル微粒子の設計と機能"化学総説、糖鎖分子の設計と生理機能. 48. 79-85 (2001)
Kazunari Akiyoshi:“自组装多糖纳米凝胶颗粒的设计和功能”糖链分子的化学评论、设计和生理功能48。79-85(2001)。
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    0
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秋吉 一成: "分子シャペロン高分子の構造形成と変換を制御する動的分子システム"化学同人. 15. 160-170 (2002)
Kazunari Akiyoshi:“控制分子伴侣聚合物结构形成和转变的动态分子系统” Kagaku Doujin。 15. 160-170 (2002)
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    0
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秋吉一成 他1名: "タンパク質の機能性ナノキャリアとしての分子シャペロン"日本DDS学会誌. 17. 486-495 (2002)
Kazunari Akiyoshi 等 1 人:“分子伴侣作为蛋白质的功能性纳米载体”,日本 DDS 学会杂志 17. 486-495 (2002)。
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Y.Ikuta 他12名: "Presentation of a major histocompatibility complex class 1-binding peptide by monocytederived dendritic cells incorporating hydrobized polysaccharide-truncated HER2 protein complex"Blood. 99・10. 3717-3124 (2002)
Y. Ikuta 和其他 12 人:“通过掺入水解多糖-截短的 HER2 蛋白复合物的单核细胞衍生的树突状细胞呈现主要组织相容性复合物 1 类结合肽”Blood.99·10。
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知道了