ALSの選択的神経細胞死に関わるGluR2サブユニットRNA編集異常の解析

GluR2 亚基 RNA 编辑异常与 ALS 选择性神经元死亡相关的分析

• 批准号: 14017020
• 负责人: 郭 伸
• 金额: $ 4.42万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14017020/
• 关键词: グルタミン酸受容体; 筋萎縮性側索硬化症; 脊髄運動ニューロン; RNA編集; GluR2; AMPA受容体; 神経伝達物質; ADAR

ALSの脊髄前角および脊髄運動ニューロンではグルタミン酸受容サブタイプであるAMPA受容体のサブユニットGluR2 mRNAはQ/R部位が未編集のものが増加している。この分子変化はAMPA受容体のCa2+透過性を亢進させ、動物脳で遅発性の脊髄運動ニューロン死を含む神経細胞死を引き起こすことが知られており、かつALS以外の神経疾患にはみられない疾患特異的な変化であることから、本疾患の神経細胞死に直接関わっている可能性が高い。RNA編集に関わる編集酵素adenosine deaminases acting on pre-mRNAs(ADAR)には3種(ADAR1〜ADAR3)が知られており、GluR2 mRNA編集率低下との関連を明らかにするために、ADARs mRNA発現量とGluR Q/R部位の編集率の相関を検討することを目的とした。凍結保存正常対照ヒト剖検脳組織より、GluR2、GluR5、GluR6、ADAR1〜ADAR3のmRNA量をLightCycler(Rocche Diagnostics)によるRT-PCR定量した。RNA編集を受けるQ/R部位を持つGluR2、GluR5、GluR6 mRNAのRT-PCR産物をQ/R部位を認識する制限酵素Bbv-1で処理し、その消化断片を2100 Bioanalyzer(Agilent)により定量解析し、RNA編集を受けた割合(編集率)を算出した。GluRの発現レベルはいずれの組織でもGluR2>GluR6>GluR5の順であり、ADAR1は全般に、ADAR2は灰白質優位、ADAR3は白質優位に発現していた。Q/R部位の編集率は、いずれのサブユニットmRNAも灰白質>白質であり、ADAR2の発現レベルに平行していた。とくにGluR2Q/R部位の編集率は灰白質では100%に保たれていたが、白質では最大40%低下していた。GluR2 mRNA編集率は、ADAR2/GIUR2比に依存し、編集率が100%の部位ではこの比が0.02以上であったが、編集率が低下している部位(全て白質)では0.02以下であった。編集率とADAR1/GluR2比にはこのような相関が見られなかった。ヒト脳ではADAR2 mRNAの発現レベルがGluR2Q/R部位のmRNA編集を規定している可能性が示された。ADAR2mRNA発現量の変化とALS脊髄運動ニューロンの神経細胞死との関わりについては今後の検討課題である。

ALS's ridge anterior horn movement ridge movement ニューロンではグルタミン acid receptor サブタイプであるAMPA receptor のサブユニットGluR2 The Q/R parts of the mRNA are not compiled yet. The Ca2+ permeability of the AMPA receptor is enhanced through molecular modification, and animal immunity is increased.遅発性のridge髄motility ニューロン死を怀神経外围的 cells 死をinduced き出こすことが知らNana change that is specific to diseases other than ALS and ALS. There is a high possibility that the disease will cause cell death, which is directly related to the disease. RNA editing enzyme adenosine deaminases acting on pre-mRNAs(ADAR)には3 types (ADAR1~ADAR3)が知られており、GluR2 The low mRNA editing rate is related to the low level of mRNA editing, and the amount of ADARs mRNA is related to the editing rate of GluR Q/R site. Freeze and preserve the normal irradiated tissue, GluR2, GluR5, GluR6, ADAR1~ADAR3 and quantitative RT-PCR using LightCycler (Rocche Diagnostics). RNA editing is controlled by the Q/R part of the RT-PCR product of GluR2, GluR5, and GluR6. The Q/R part of the mRNA is recognized, and the restriction enzyme Bbv-1 is processed. The digestion fragment is 2100 Bioanalyzer (Agilent) performs quantitative analysis and RNA editing, and performs cutting and coupling (editing rate) calculation. GluRの発成レベルはいずれの体でもGluR2>GluR6>GluR5の顺であり, ADAR1 is normal, ADAR2 is gray-white quality, and ADAR3 is white-quality quality. Q/R site editing rate, gray and white matter mRNA, and ADAR2 parallelism. The compilation rate of GluR2Q/R parts is 100%, and the white matter is maintained at 100%, and the white matter is reduced by up to 40%. GluR2 The mRNA editing rate is not dependent on the ADAR2/GIUR2 ratio, and the editing rate is 100%. If the compilation rate is lower than 0.02, it will be the same. If the compilation rate is low, the part (all white matter) will be the same if it is less than 0.02. The editing rate of ADAR1/GluR2 is higher than that of ADAR1/GluR2.ヒト脳ではADAR2 mRNA の発appears and レベルがGluR2Q/R site のmRNA compilation を stipulates the possibility of している and shows された. The amount of ADAR2mRNA is changed and the movement of ALS spinal cord is related to the death of cells. This is a topic to discuss in the future.

项目成果

郭 伸: "今日の診断指針 2003年版 ハンチントン病(613頁)"総編集 山口徹、北原光夫;医学書院、東京. 1605 (2003)

Shin Guo：《今日诊断指南 2003 年版亨廷顿病》（613 页）总编辑 Toru Yamaguchi、Mitsuo Kitahara，Tokyo 1605（2003）。

河原行郎, 郭 伸: "筋萎縮性側索硬化症におけるAMPA受容体異常"Brain Medical. 14. 55-62 (2002)

Yukio Kawahara，Shin Guo：“肌萎缩侧索硬化症中的 AMPA 受体异常”Brain Medical。14. 55-62 (2002)

郭 伸: "変異型Creutzfeldt-Jakob病(vCJD)の投げかける今日的問題"化学療法の領域. 18. 665-682 (2002)

郭新：“变异型克雅氏病 (vCJD) 带来的当前问题”化疗 18. 665-682 (2002)。

Yoshimura M, Yamamoto T, Sone-Isoo N, Imafuku I, Momose T, Shirouzu I, Kwak S, Kanazawa I: "Hemiparkinsonism in a patient with a mesencephalic tumor"J Neurol Sci. 197. 89-92 (2002)

Yoshimura M、Yamamoto T、Sone-Isoo N、Imafuku I、Momose T、Shirouzu I、Kwak S、Kanazawa I：“中脑肿瘤患者的偏侧帕金森病”J Neurol Sci。

Yamamoto Y, Hidaka I, Isoo N, Komai A, Soma R, Kwak S: "Noise-based compensation for postural hypotension in primary autonomic failure"Brain Research. 945. 71-78 (2002)

Yamamoto Y、Hidaka I、Isoo N、Komai A、Soma R、Kwak S：“原发性自主神经衰竭中体位性低血压的基于噪声的补偿”脑研究。