ALSの選択的神経細胞死に関わるGluR2サブユニットRNA編集異常の解析

GluR2 亚基 RNA 编辑异常与 ALS 选择性神经元死亡相关的分析

• 批准号: 14017020
• 负责人: 郭 伸
• 金额: $ 4.42万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14017020/
• 关键词: グルタミン酸受容体; 筋萎縮性側索硬化症; 脊髄運動ニューロン; RNA編集; GluR2; AMPA受容体; 神経伝達物質; ADAR

ALSの脊髄前角および脊髄運動ニューロンではグルタミン酸受容サブタイプであるAMPA受容体のサブユニットGluR2 mRNAはQ/R部位が未編集のものが増加している。この分子変化はAMPA受容体のCa2+透過性を亢進させ、動物脳で遅発性の脊髄運動ニューロン死を含む神経細胞死を引き起こすことが知られており、かつALS以外の神経疾患にはみられない疾患特異的な変化であることから、本疾患の神経細胞死に直接関わっている可能性が高い。RNA編集に関わる編集酵素adenosine deaminases acting on pre-mRNAs(ADAR)には3種(ADAR1〜ADAR3)が知られており、GluR2 mRNA編集率低下との関連を明らかにするために、ADARs mRNA発現量とGluR Q/R部位の編集率の相関を検討することを目的とした。凍結保存正常対照ヒト剖検脳組織より、GluR2、GluR5、GluR6、ADAR1〜ADAR3のmRNA量をLightCycler(Rocche Diagnostics)によるRT-PCR定量した。RNA編集を受けるQ/R部位を持つGluR2、GluR5、GluR6 mRNAのRT-PCR産物をQ/R部位を認識する制限酵素Bbv-1で処理し、その消化断片を2100 Bioanalyzer(Agilent)により定量解析し、RNA編集を受けた割合(編集率)を算出した。GluRの発現レベルはいずれの組織でもGluR2>GluR6>GluR5の順であり、ADAR1は全般に、ADAR2は灰白質優位、ADAR3は白質優位に発現していた。Q/R部位の編集率は、いずれのサブユニットmRNAも灰白質>白質であり、ADAR2の発現レベルに平行していた。とくにGluR2Q/R部位の編集率は灰白質では100%に保たれていたが、白質では最大40%低下していた。GluR2 mRNA編集率は、ADAR2/GIUR2比に依存し、編集率が100%の部位ではこの比が0.02以上であったが、編集率が低下している部位(全て白質)では0.02以下であった。編集率とADAR1/GluR2比にはこのような相関が見られなかった。ヒト脳ではADAR2 mRNAの発現レベルがGluR2Q/R部位のmRNA編集を規定している可能性が示された。ADAR2mRNA発現量の変化とALS脊髄運動ニューロンの神経細胞死との関わりについては今後の検討課題である。

ALS の the anterior horn of spinal marrow お よ び spinal marrow movement ニ ュ ー ロ ン で は グ ル タ ミ ン acid by volume サ ブ タ イ プ で あ る AMPA by let body の サ ブ ユ ニ ッ ト GluR2 mRNA が は Q/R parts not compiled の も の が raised plus し て い る. こ の molecule - the は AMPA by let body の Ca2 + through sexual を hyperthyroidism さ せ, animal 脳 で 遅 発 sex の spinal marrow movement ニ ュ ー ロ ン die を containing む を 経 cell death god led き up こ す こ と が know ら れ て お り, か つ ALS の god 経 disorders に は み ら れ な い disease specific な variations change で あ る こ と か ら, this disease の 経 cell death god に directly masato わ っ Youdaoplaceholder0 て る possibility が high て. Compiling enzyme RNA compiling に masato わ る adenosine deaminases acting on the pre - mRNAs (ADAR) に は three (ADAR1 ~ ADAR3) が know ら れ て お り, GluR2 compilation mRNA is low と の masato even を Ming ら か に す る た め に, ADARs mRNA occurrence quantity とGluR Q/R site <s:1> compilation rate <e:1> related を検 discussion する とを とを objective と た た た. Frozen and preserved normal images were compared with ヒト section 検脳 tissues for よ, GluR2, GluR5, GluR6, ADAR1 to ADAR3 <s:1> mRNA quantities をLightCycler(Rocche Diagnostics)によるRT-PCR quantification た た. Compiling を RNA by け る Q/R parts を hold つ GluR2, GluR5, GluR6 mRNA の rt-pcr product を Q/R parts を know す limitations る enzyme Bbv - 1 で 処 し, そ の digestion fragment を 2100 Bioanalyzer(Agilent)によ によ quantitatively analyzed を, RNA compilation を was cut by けた (compilation rate)を, and <s:1> た was calculated. GluR の 発 now レ ベ ル は い ず れ の organization で も GluR2 > GluR6 > GluR5 の shun で あ り, ADAR1 は all に, ADAR2 は grey quality bits, ADAR3 は white a high-quality に 発 now し て い た. Q/R parts compiling rate は の, い ず れ の サ ブ ユ ニ ッ ト mRNA も gray matter > white matter で あ り, ADAR2 の 発 now レ ベ ル に parallel し て い た. と く に GluR2Q compiling rate/R parts の は gray matter で は に risks 100% た れ て い た が, white matter で は maximum 40% low し て い た. Compiling rate は GluR2 mRNA, ADAR2 / GIUR2 than に dependent し, compiling が 100% の parts で は こ の than が above 0.02 で あ っ た が, low rate of compiling が し て い る parts (full て white matter) で は 0.02 following で あ っ た. The compilation ratio とADAR1/GluR2 is related to に, に, <s:1>, ような and ような. Youdaoplaceholder3 see られな, った, った. ヒ ト 脳 で は ADAR2 mRNA の 発 now レ ベ ル が GluR2Q/R parts の compiling を mRNA rules し て い が る possibility in さ れ た. ADAR2mRNA 発 amount is の variations change と ALS spinal marrow movement ニ ュ ー ロ ン の 経 cell death god と の masato わ り に つ い て は future の 検 for subject で あ る.

项目成果

郭 伸: "今日の診断指針 2003年版 ハンチントン病(613頁)"総編集 山口徹、北原光夫;医学書院、東京. 1605 (2003)

Shin Guo：《今日诊断指南 2003 年版亨廷顿病》（613 页）总编辑 Toru Yamaguchi、Mitsuo Kitahara，Tokyo 1605（2003）。

河原行郎, 郭 伸: "筋萎縮性側索硬化症におけるAMPA受容体異常"Brain Medical. 14. 55-62 (2002)

Yukio Kawahara，Shin Guo：“肌萎缩侧索硬化症中的 AMPA 受体异常”Brain Medical。14. 55-62 (2002)

郭 伸: "変異型Creutzfeldt-Jakob病(vCJD)の投げかける今日的問題"化学療法の領域. 18. 665-682 (2002)

郭新：“变异型克雅氏病 (vCJD) 带来的当前问题”化疗 18. 665-682 (2002)。

Yoshimura M, Yamamoto T, Sone-Isoo N, Imafuku I, Momose T, Shirouzu I, Kwak S, Kanazawa I: "Hemiparkinsonism in a patient with a mesencephalic tumor"J Neurol Sci. 197. 89-92 (2002)

Yoshimura M、Yamamoto T、Sone-Isoo N、Imafuku I、Momose T、Shirouzu I、Kwak S、Kanazawa I：“中脑肿瘤患者的偏侧帕金森病”J Neurol Sci。

Yamamoto Y, Hidaka I, Isoo N, Komai A, Soma R, Kwak S: "Noise-based compensation for postural hypotension in primary autonomic failure"Brain Research. 945. 71-78 (2002)

Yamamoto Y、Hidaka I、Isoo N、Komai A、Soma R、Kwak S：“原发性自主神经衰竭中体位性低血压的基于噪声的补偿”脑研究。