ALSモデル動物の単一運動ニューロンにおけるグルタミン酸受容体分子変化の検討

ALS模型动物单个运动神经元谷氨酸受体分子变化的检测

• 批准号: 12050211
• 负责人: 郭 伸
• 金额: $ 4.67万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12050211/
• 关键词: グルタミン酸受容体; 筋萎縮性側索硬化症; 脊髄運動ニューロン; RNA編集; GluR2; AMPA受容体

昨年に引き続き、筋萎縮性側索硬化症(ALS)の運動ニューロンにおけるAMPA受容体の分子変化を、サブユニットであるGluR2 mRNAに着目して単一神経細胞レベルでの検索を行った。脳・脊髄組織、単一・脊髄運動ニューロン組織を用いて、(1)正常対照の脊髄運動ニューロンにおけるAMPA受容体各サブユニットGluR1〜GluR4のmRNA発現量、特にGluR2 mRNAの全サブユニットに占める割合の測定、(2)ALSにおける(1)の変化の有無の検討、を目的とした。[方法・材料]材料は凍結保存したヒト剖検脊髄を用いた。単一ニューロンの切り出しにはlazor microdissector(浜松ホトニクス杜)を用いた。LightCycler System(Rcche Diagnostics)を用いた定量的RT-PCRをAMPA受容体各サブユニットGluR1〜GluR4について確立した。[結果](1)GLuR2 mRNAの発現量が最も多く、全サブユニットmRNAコピー数のほぼ80%を占めていた。GluR2 mRNAの比率は中枢神経の部位にかかわらずほぼ同様の値であった。(2)ALSの運動ニューロンでも各GluR mRNAのコピー数は保たれており、GluR2 mRNAの比率はむしろ増加する傾向が見られた。[考察]ALSの運動ニューロンAMPA受容体mRNA発現量およびGluR2サブユニット比率とも低下しておらず、AMPA受容体のサブユニット構成はALSでは変化していないことが明らかになった。AMPA受容体を介する神経細胞死がALSの病因に関わっていることが示唆されているが、GhR2を含めたサブユニットの発現量の変化はその要因ではなく、むしろGluR2 mRNA編集の低下が大きくAMPA受容体の機能を変化させる要因であることが明らかになった。

Last year, the molecular modification of AMPA receptor for amyotrophic lateral sclerosis (ALS) and the movement of amyotrophic lateral sclerosis (ALS) were carried out. GluR2 The content of the mRNA is the same as that of the single God's cell. Spinal tissue, single spine movement tissue, (1) normal spinal movement tissue Each of the AMPA receptors is GluR1~GluR4, and the specific amount of mRNA is GluR2. Determination of the completeness of mRNA's cleavage and synthesis, (2) ALS's cleavage and synthesis (1) The presence or absence of ALS changes, and the determination of purpose. [Method/Materials] The materials are frozen and preserved, and they can be used for cutting and cutting.単一ューロンのcutり出しにはlazor microdissector(浜松ホトニクスDU)を用いた. LightCycler System (Rcche Diagnostics) has established quantitative RT-PCR for each of the AMPA receptors GluR1 to GluR4. [Results] (1) The amount of GLuR2 mRNA was the highest, and the total amount of GLuR2 mRNA was 80%. The ratio of GluR2 mRNA is the same as the central nervous system. (2) The movement of ALS and the number of GluR mRNAs are high, and the ratio of GluR2 mRNA is high and the tendency is high. [Investigation] ALS motility test AMPA receptor mRNA expression amount およびGluR2 ratio ともThe low level and the AMPA receptor are the same as the ALS type. AMPA receptor activator ALS cell death ALS cause ALS activator ALSが、GhR2をcontaining めたサブユニットの発真人の変化はそのessential factor ではなく、むしろGluR2 The main reason for the low level of mRNA editing is the improvement of the function of the AMPA receptor.

项目成果

Yoshimura M, Yamamoto T, Sone-Isoo N, Ima fuku I, Momose T, Shirouzu I, Kwak S, Kanazawa I: "Hemiparkinsonism in a patient with a mesencephalic tumor"J Neural Sci. (in press). (2002)

Yoshimura M、Yamamoto T、Sone-Isoo N、Ima fuku I、Momose T、Shirouzu I、Kwak S、Kanazawa I：“中脑肿瘤患者的偏侧帕金森病”J Neural Sci。

河原行郎, 郭 伸: "筋萎縮性側索硬化症におけるAMPA受容体異常"Brain Medical. (印刷中). (2002)

Yukio Kawahara，Shin Guo：“肌萎缩侧索硬化症中的 AMPA 受体异常”Brain Medical（2002 年出版）。

Kwak S, Takuma H, Kanazawa I: "Molecular changes of AMPA receptor subunits in ALS spinal cord"Molecular Mechanism and Therapeutics of Amyotrophic Lateral Sclerosis. (Eds. Abe K) Elsevier Science, Amsterdam. 197-202 (2001)

Kwak S、Takuma H、Kanazawa I：“ALS 脊髓中 AMPA 受体亚基的分子变化”肌萎缩侧索硬化症的分子机制和治疗。

郭 伸, 金澤一郎: "筋萎縮性側索硬化症・運動ニューロン疾患、臨床医学の展望「神経病学-血管系を除く」"日本医事新報. 4019. 8-9 (2001)

郭新、金泽一郎：“肌萎缩侧索硬化症/运动神经元病的临床医学展望‘神经病学-不包括血管系统’”日本医疗新报4019. 8-9 (2001)。

郭伸: "Startle病(hyperekplexia)"Clinical Neuroscience. 18. 338-340 (2000)

郭新：“惊吓症（惊恐症）”临床神经科学 18. 338-340 (2000)。