ALSモデル動物の単一運動ニューロンにおけるグルタミン酸受容体分子変化の検討

ALS模型动物单个运动神经元谷氨酸受体分子变化的检测

• 批准号: 12050211
• 负责人: 郭 伸
• 金额: $ 4.67万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12050211/
• 关键词: グルタミン酸受容体; 筋萎縮性側索硬化症; 脊髄運動ニューロン; RNA編集; GluR2; AMPA受容体

昨年に引き続き、筋萎縮性側索硬化症(ALS)の運動ニューロンにおけるAMPA受容体の分子変化を、サブユニットであるGluR2 mRNAに着目して単一神経細胞レベルでの検索を行った。脳・脊髄組織、単一・脊髄運動ニューロン組織を用いて、(1)正常対照の脊髄運動ニューロンにおけるAMPA受容体各サブユニットGluR1〜GluR4のmRNA発現量、特にGluR2 mRNAの全サブユニットに占める割合の測定、(2)ALSにおける(1)の変化の有無の検討、を目的とした。[方法・材料]材料は凍結保存したヒト剖検脊髄を用いた。単一ニューロンの切り出しにはlazor microdissector(浜松ホトニクス杜)を用いた。LightCycler System(Rcche Diagnostics)を用いた定量的RT-PCRをAMPA受容体各サブユニットGluR1〜GluR4について確立した。[結果](1)GLuR2 mRNAの発現量が最も多く、全サブユニットmRNAコピー数のほぼ80%を占めていた。GluR2 mRNAの比率は中枢神経の部位にかかわらずほぼ同様の値であった。(2)ALSの運動ニューロンでも各GluR mRNAのコピー数は保たれており、GluR2 mRNAの比率はむしろ増加する傾向が見られた。[考察]ALSの運動ニューロンAMPA受容体mRNA発現量およびGluR2サブユニット比率とも低下しておらず、AMPA受容体のサブユニット構成はALSでは変化していないことが明らかになった。AMPA受容体を介する神経細胞死がALSの病因に関わっていることが示唆されているが、GhR2を含めたサブユニットの発現量の変化はその要因ではなく、むしろGluR2 mRNA編集の低下が大きくAMPA受容体の機能を変化させる要因であることが明らかになった。

GluR2 mRNA is involved in the molecular transformation of AMPA receptors in the motor cycle of ALS. (1) mRNA production of GluR1-GluR4 in AMPA receptors under normal illumination, and in particular, determination of the total mRNA content of GluR2 mRNA,(2) investigation of the presence or absence of transformation in ALS, and (3) determination of the presence or absence of transformation in ALS receptors under normal illumination. [Method·Material] Material is frozen and stored. A lazor microdissector is used in a single case. LightCycler System(Rcche Diagnostics) is used to establish quantitative RT-PCR for AMPA receptors. [Results](1) The expression of GLuR2 mRNA was the highest, accounting for 80% of the total expression of GLuR2 mRNA. GluR2 mRNA levels vary according to the location of the central nervous system. (2) The number of GluR2 mRNA in ALS mRNA increased rapidly, and the ratio of GluR2 mRNA increased rapidly. [Investigation]ALS movement, AMPA receptor mRNA expression, GluR2 receptor mRNA expression ratio, AMPA receptor mRNA expression, ALS receptor mRNA expression ratio, AMPA receptor mRNA expression, ALS receptor mRNA expression ratio, AMPA receptor mRNA expression ratio, ALS receptor mRNA expression ratio, AMPA receptor mRNA expression ratio, ALS receptor mRNA expression ratio, AMPA receptor mRNA expression ratio, ALS expression ratio, ALS receptor mRNA expression ratio, ALS expression ratio, ALS receptor mRNA expression ratio, ALS expression ratio, ALS The main causes of changes in the expression of AMPA receptor mRNA are the decrease in the expression of GhR2 mRNA and the change in the function of AMPA receptor.

项目成果

Yoshimura M, Yamamoto T, Sone-Isoo N, Ima fuku I, Momose T, Shirouzu I, Kwak S, Kanazawa I: "Hemiparkinsonism in a patient with a mesencephalic tumor"J Neural Sci. (in press). (2002)

Yoshimura M、Yamamoto T、Sone-Isoo N、Ima fuku I、Momose T、Shirouzu I、Kwak S、Kanazawa I：“中脑肿瘤患者的偏侧帕金森病”J Neural Sci。

河原行郎, 郭 伸: "筋萎縮性側索硬化症におけるAMPA受容体異常"Brain Medical. (印刷中). (2002)

Yukio Kawahara，Shin Guo：“肌萎缩侧索硬化症中的 AMPA 受体异常”Brain Medical（2002 年出版）。

Kwak S, Takuma H, Kanazawa I: "Molecular changes of AMPA receptor subunits in ALS spinal cord"Molecular Mechanism and Therapeutics of Amyotrophic Lateral Sclerosis. (Eds. Abe K) Elsevier Science, Amsterdam. 197-202 (2001)

Kwak S、Takuma H、Kanazawa I：“ALS 脊髓中 AMPA 受体亚基的分子变化”肌萎缩侧索硬化症的分子机制和治疗。

郭 伸, 金澤一郎: "筋萎縮性側索硬化症・運動ニューロン疾患、臨床医学の展望「神経病学-血管系を除く」"日本医事新報. 4019. 8-9 (2001)

郭新、金泽一郎：“肌萎缩侧索硬化症/运动神经元病的临床医学展望‘神经病学-不包括血管系统’”日本医疗新报4019. 8-9 (2001)。

郭伸: "Startle病(hyperekplexia)"Clinical Neuroscience. 18. 338-340 (2000)

郭新：“惊吓症（惊恐症）”临床神经科学 18. 338-340 (2000)。